脾胃湿热证湿、热偏重量化的实验研究论文

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1、硕士学位论文脾胃湿热证湿、热偏重量化的实验研究目的硕士研究生：谭永振指导教师：文小敏教授摘要脾胃湿热证是临床常见的证候，其在病变过程中存在湿偏重、热偏重及湿热并重等病理变化，在临床诊断上比较困难。本课题通过观察大鼠的一般状态、尿液中的水通道蛋白2(AQP2)、血浆淋巴细胞热休克蛋白70(HSP70)、胃窦P物质(SP)及生长抑素(SS)、胃及十二指肠的病理变化等指标，探讨脾胃湿热证湿、热偏重的本质和它们之间的差异，为脾胃湿热证湿、热偏重的量化提供实验依据；通过观察在三仁汤、白虎加苍术汤的干预下脾胃湿热证湿偏重

2、、热偏重大鼠模型一般状况及一系列实验指标的变化，从不同角度揭示三仁汤、白虎加苍术汤的作用机理。方法1．药物与饲料①附子干姜汤的药物组成：制附子、干姜②三仁汤的药物组成：苦杏仁、法半夏、滑石、薏苡仁、白豆蔻、厚朴、通草、淡竹叶③白虎加苍术汤的药物组成：苍术、粳米、知母、石膏、甘草。高糖高脂饲料：普通饲料中混入12％猪油，8％蜂蜜加工而成。2．分组SPF级SD大鼠40只，随机分为5组，每组8只，雌雄各半，即正常对照组、湿偏重组、三仁汤组、热偏重组和白虎加苍术汤组。中文摘要3，造模在肥甘饮食、酒伤、湿热环境、病原微

3、生物的综合因素作用下，建立脾胃湿热证的湿偏重型、热偏重型的动物模型：①正常对照组：在20～28℃温度，50％'--'70％相对湿度的环境下，以普通混合饲料喂养：②湿偏重组：高糖高脂饲料+造模箱+白酒+大肠杆菌；③三仁汤组：高糖高脂饲料+造模箱+白酒+大肠杆菌+三仁汤；④热偏重组：高糖高脂+造模箱+附子干姜煎剂+大肠杆菌；⑤白虎加苍术汤组：高糖高脂+造模箱+附子干姜煎剂+大肠杆菌+白虎加苍术汤。4．观察及检测指标对比观察实验大鼠造模前后的一般状态、体重、肛温、24小时尿量、大便性状等的变化。用ELISA法检测大

4、鼠尿液中的AQP2、流式细胞仪检测血浆淋巴细胞HSP70、放射免疫法检测胃窦匀浆SP及SS的含量。光镜下观察大鼠的胃、十二指肠的病理变化。5．统计学方法用SPSS软件(13．0版)处理，实验结果的数据类型为计量资料，各数据以均数士标准差(r±s)表示。体重、体温采用重复测量的方差分析进行比较；24小时尿量、AQP2含量、HSP70、SP及SS含量采用One．WayANOVA对各组实验结果进行方差分析，组间多重比较用LSD法检验，以P

5、期间，毛色光泽、食欲好、活动正常，大便正常。湿偏重组、热偏重组：随着造模时间的推移，大部分动物出现倦怠，嗜卧懒动，反应迟钝，毛发蓬松，颜色枯槁；从造模第7天开始，均出现大便溏泻或粘腻，湿偏重组更严重；进入造模箱后，大便溏泻或粘腻症状加重，渐见肛周污秽。三仁汤组、白虎加苍术汤组：大鼠造模后出现与模型组相同的症状，经三仁汤、白虎加苍术汤灌服后，症状有所减轻。Ⅱ硕士学位论文2．体重、体温、24小时尿量变化随着造模时间的延长，进入造模箱后4个模型组的体重下降，不同时间点模型组的体重均低于正常对照组(尸

6、三仁汤、白虎加苍术汤的治疗后体重恢复正常增长水平。模型组大鼠进入造模箱后体温升高，灌喂大肠杆菌后体温急剧上升，与正常对照组比较差异有统计学意义(尸0．05)。3．实验室指标检测湿偏重组、热偏重组尿液AQP2的含量显著高于正常对照组(P<0．01)，而且湿偏重组比热偏重组增高显著

7、(尸0．05)。湿偏重组、热偏重组血浆淋巴细胞HSP70表达高于正常对照组(P<0．01)，而且热偏重组比湿偏重组增高显著(尸<0．01)。三仁汤组、白虎加苍术汤组HSP70表达恢复正常水平，与正常对照组比较差异无显著差异(P>0．05)。湿偏重组、热偏重组大鼠胃窦SP、SS较正常对照组显著降低(尸<0．01)；并且湿偏重组SP、SS水平低于热偏重组(尸

8、正常水平，与正常对照组比较无显著差异(尸>O．05)。4．胃、十二指肠病理切片正常对照组胃粘膜层可见少量炎症细胞，粘膜下层无组织水肿，十二指肠绒毛上皮较完整。湿偏重组、热偏重组大鼠胃及十二指肠病理切片无较大差异，均可见：(1)胃粘膜层有大量中性粒细胞、嗜酸性粒细胞浸润，血管扩张充血；胃粘膜下层组织水肿，中性粒细胞、嗜酸性粒细胞浸润显著；(2)十二指肠可见绒毛上皮细胞脱落，大量炎症细胞渗出。三仁汤组、