脑源性神经营养因子与神经干细胞移植治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的实验的的研究

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1、谴求溉久学灏七学缱论_叟；}，文摘要[摘要]目的：观察脑源性神经惹养因子(brain—derivedneurotrophlcfactor，BDNF)对植入至l蓊生太鬣缺氧袋盘缝艟损伤(hy。xic—ische翔icbra{ndam耀e，}

2、lBD)动物模型的神经十：细胞(neuralstemcells，NSCs)的存活、迁移、分化作用及损伤动物耱经功爱滚复穗嚣。方法：耿新生24小时的w【star大鼠海马NScs进行培养、鉴定，以5一溪脱氧尿嘧I赃(8ro臻odeoxyUridine，8fd王

3、)、毒枣经元特器毪爝醇{七酶《neuronspeeifieenoi8so，NSE

4、)、胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidfcprotein，GFAP)分别作为分化秘瓒骥的豁志。7}{龄w{star大鼠制备HlBD动物模型，7天蕊经侧艟突接受B渊F及Nscs移植。7同龄新生大鼠随机分为模掇组(HIBD组)、磷酸靛缓冲液移植组(PBS组)、NSCs移植组、BDNF组、BDNF+NSCs移植缎。移植4周后电迷离评价大鼠的学习记忆功能及神经功能恢复评分，取脑缀缀骰Brdu免疫组亿及NS丑／B髓u免疫菠光梭查。络采；l、黼叠三大鬣海马袋功墙养毽Nses，并表达NScs静标恚物神经鬃蛋自(neuroepithelialstemcellprot

5、ein，Nestin)，NScs可分化为神经元及星形胶质细胞；2、缝大多数筏Scs穆攘翦爨遮尧B堪H麓蛙绥藏；3、移褴4舞蜃瓣缝织8撼u受疫缝傀发现侧脑室中存活着大量移植的Nscs且向脑组织内广泛迁移；4、BDNF促进NSCs岛皱氧缺囊麟摄伤区邋移及存滔及分化为}参经元数燮璞趣，联合移檀缝大簸学习进忆能力及神经功能恢复与其余各组比较差异舆有显著性(P<0．001)；5、单纯移植NSCs组神经功能恢复与HIBD缝、pBs组比较，差异无照装性(P>O．05)。结论：l、存体外培养条件F，可以从新嫩大鼠脯组织中分离、培养具有多分化潜能的NScs；2、NScs经侧脑室移植至HlB

6、D敝脑后能存活、迁移，并可分化成神经元，偿鹣存活率殿分化成神经元的比例尚有待予进一步掇高；3、8DNF能鼗著提高外源性NScs的增碴和分化成神经元能力，明懿增进NSc8的移植效果，改替HIBD大鼠享率经功能；4、B黼F与NSes联会移植楚治疗}{IBD懿有效方法。[关键词]脑源性神经营养因子；神经干细胞；移植；缺氧缺JIn性脑损伤经冬{

7、}i久学碗{=学位论爻Abstract【Abstract】objectiveTbinvestigatethesurViValandmigration，difrerentiationefrectsofBDNFtoneumIstemcells

8、tmnspl肌tedimoncwbomhypoxic-ischemicbraindamageinratsandtheratsneuronrecoverydencits．MethodsTheNSCswereseparatedf沁mhippocampusofneonatalWistarmt’sin24h．Brdu、NSE、GFAPwereusedtomarkdiff色rentiatingandprolifbration．Newbomratsweresustainedhypoxic—ischemicbraindamage．7dayslater’animalsreceiVedtr

9、ansplantation，ThcyweredividedintoHIBDgmup；PBS耵0up；NSCstmllsplantationgmup；BDNFgroupa11dBDNF十NSCstransplantationgmup删1domlyAt4weeksaRertra芏1splantationtheneuronfunctionofratswasobservedbyY_mazeandnervebehaviortest，ARertheyweresacrificed，theratbrainswercexamincdbyBrduimmunoc”ochemistryandNS

10、E，Brduimmunonuorescence．ResuIts1．Thehippoc锄pusNSCsofnewbomratwerewellcultuTedandtheyexpressednestinaIldt11eycandifrerentiateintoNsE，GFAP；2．M旬oritiesofthecellsweremarkedBrdu；3MostofNSCswercsuⅣiValincerebralVentricleaner4weeksoftransplaIl眦ioninbminthmughBrdujmmunocyto