macc1基因对胃癌细胞株bgc-823基因表达的影响

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1、南方医科大学2009级硕士学位论文MACCl基因对胃癌细胞株BGC．823基因表达的影响ToInvestigatetheEffectsofMACCIontheExpressionProfileofGastricCancerCellLineBGC．．823课题来源：自选专业名称学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员肿瘤学王妮娜廖旺军主任医师陈龙华教授李金瀚教授张文清教授宋立兵教授李宇红教授论文评阅人袁亚维教授张为民教授2012年3月20日广州硕士学位论文MACC1基因对胃癌细胞株BGC．823基因表达的影响硕士研究生：王妮娜指导教师：廖旺军主任

2、医师摘要研究背景胃癌是消化系统常见肿瘤，在世界范围，胃癌死亡率居世界第二位，虽然在发达国家，近年胃癌发病率有所下降，但在我国，根据最新的统计资料，我国城市胃癌的死亡率居恶性肿瘤死亡率的第三位，在农村，胃癌的死亡率甚至居于第一位【l】。外科手术仍是其主要的治疗方法，但仅有30．50％的患者可获得根治性切除，虽然目前针对胃癌的药物及治疗方法较多，但疗效并不满意121，究其原因，胃癌的早期转移是死亡率高的重要原因，故而研究胃癌早期转移的机制及其标志物就显得尤为重要了。2009年stein等人报道了MACC1(Metastasis．associatedinc

3、oloncancer1)基因在肠癌中的可能作用，他们研究发理坚垒gg!盥噻哒泣翌墨生在奎盟显扫关，低表达箜璺耋!生生在奎为卫Q％，而壹室鲨耋基蔓生生存率仅有15％。发—————————————————一一———————————————一生转移的患者的MACClmRNA水平明显高于未转移患者(p<0．0001)，Logistic～—————————————————————一和Cox回归分析表明，MACCl可以作为肠癌转移的预后指标‘31。继而出现大量的研究报道MACCl不硬在肠癌，而且与肝细胞癌、肺癌、胃癌等实体肿瘤的转移相关。其中，有学者发现在MAC

4、CI基因在发生血管转移的肝细胞癌中高表达，ShimokawaH等人收集了146例I期肺腺癌术后标本，发现MACCI的表达水平与预后密切相关。而在胃癌中，目前有文献报道MACCl基因的表达与其腹膜转移相关14击∑这些均表明MACCl在早期发现肿瘤转移及复发方面摘要具有重要的指导作用，极有可能作为一个肿瘤预后的分子标志物。但是在胃癌方面的作用仍不深入，需进一步的探讨研究。研究MACCl基因功能，需要大量的体内体外实验，所以构建合适的MACCl表达载体是研究其结构功能的必要基础。目前国内尚未见构建胃癌MACCI表达载体的相关报道。本研究应用293FT细胞为

5、模板，成功扩增出MACCl全长cDNA序列及MACCl表达的干扰片段，构建过表达载体及干扰表达载体，为研究该基因在多种类型肿瘤中的作用及机制奠定了基础。已有文献报道，胃癌中MACCl基因与其腹膜转移相关，为了进一步研究其作用机制，我们首次成功建立了稳定表达MACCl的胃癌pBaBb．MACCl／BGC．823细胞株及其MACCl基因沉默表———————————————～。—————————————————————————————————————————一达的塑垦堡!垒：坚垒!坠当塑堑坠丝丑j啦出蛆选要地堕鲎堡望塾坠!竺垦墨．Westernblot进行

6、验证分析，为探讨坐堡g!垄宣疸主笪缝旦担剑握逃工亘靠保l—————————————————一一一——。’。’r‘扯2基因芯片又称DNA微阵列(DNAmicroarray)，该技术是指将大量探针分子固定于支持物上，将样品分子标记，然后将两者进行杂交，利用相关软件收集杂交信号，从而获取样品分子的数量和基因信息。通过不同的探针序列的设计、不同的分析方法使得该技术的应用价值也各有不同，如基因表达谱测定、突变检测、多态性分析、基因组文库作图及杂交测序等。随着20世纪80年代人类基因组计划的开展，结构基因组学已经得到了充分的认识，而功能基因组学方面仍存在太多的未

7、知领域，基因芯片技术的出现给功能基因组的研究提供了一个全新的平台。基因表达谱芯片目前应用比较广泛，技术比较成熟，它可以检测整个基因组的各个基因mRNA的变化水平。传统的研究方法仅仅局限于某个或某几个基因和他们之间简单的调控关系，无法全面的认识和研究肿瘤整个发生过程中基因复杂的调控关系。而基因芯片恰恰能解决传统研究方法的不足之处，其以大规模高通量的方法研究成千上万的基因在不同状态下的表达，预测他们的功能，预测他们之间的复杂的相互调控关系。从基因水平研究肿瘤相关基因的变化，通过基因芯片技术筛选和检测肿瘤n硕士学位论文发生、发展及转移过程中的差异表达基因，

8、不但可以从病理状态中寻找可能病因，也为早期的诊断及预后提供依据，基因芯片技术和临床的相互结合将为成为未来研究