neurod在大鼠脊髓损伤过程中的特异性表达

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1、分类号：R651.2学校代码：10392学科专业代码：100101学号：200703221福建医科大学硕士学位论文NeuroD在大鼠脊髓损伤过程中的特异性表达NeuroDSpecificExpressioninSpinalCordInjuryofRats学位类型：医学硕士所在学院：基础医学院申请人：简国坚学科、专业：人体解剖与组织胚胎学导师：王玮教授研究起止日期：2011年5月至2012年8月答辩日期：2012年12月28日二○一二年十二月目录英文缩略词表……………………………………………………………………1中文摘要……………………………………

2、……………………………………2英文摘要…………………………………………………………………………3前言………………………………………………………………………………5材料与方法………………………………………………………………………7结果………………………………………………………………………………17讨论………………………………………………………………………………27结论………………………………………………………………………………31参考文献…………………………………………………………………………32附表……………………………………………………………

3、…………………35致谢………………………………………………………………………………37综述………………………………………………………………………………38参考文献…………………………………………………………………………47英文缩略词表NeuroDneurogenicdifferentiation神经源性分化因子bHLHbasichelix-loop-helix碱性螺旋-环-螺旋MSCmesenchymalstemcell骨髓干细胞GFAPglialfibrillaryacidicprotein胶质纤维酸性蛋白RT-PCRreversetrans

4、criptionpolymerasechainreaction逆转录聚合酶链式反应DAB3,3’-diaminobenzidine二氨基联苯胺DEPCdiethylpyrocarbonate焦磷酸二乙酯EBethidiumbromide溴化乙锭TBStrisbuffersaline氨基丁三醇缓冲液TBSTTweentrisbuffersaline含Tween20的TBS缓冲液HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物酶PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲液GAPDHglyceraldehydesph

5、osphatedehydrogenase磷酸甘油醛脱氢酶TEMEDtetramethylethylenediamine四甲基二乙胺Tris-HclTris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride三羟甲基氨基甲烷盐酸盐SDS-PAGEsodiumdodecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳TBETris-Boricacid-EDTA三羟甲基氨基甲烷-硼酸-乙二胺四乙酸SPSSstatisticalpackageforsoci

6、alscience社会科学统计程序BBBBassoBeattieBresnahan运动功能评分及脚印分析1NeuroD在大鼠脊髓损伤过程中的特异性表达中文摘要目的探讨大鼠脊髓损伤过程中神经源性分化因子（NeurogenicDifferentiation，NeuroD）的分布、变化及规律，进而研究其对脊髓损伤模型的影响。方法SD大鼠腹腔麻醉，无菌条件下显露并咬除T10棘凸及椎板，显露其下方的硬脊膜，采用改良Allen’s打击法进行打击建立急性脊髓损伤模型。假手术对照组同法暴露，但不损伤脊髓。建模成后采用免疫组织化学法检测NeuroD在脊髓中分布情

7、况；应用RT-PCR方法检测在大鼠脊髓损伤不同时段NeuroDmRNA的表达变化；应用蛋白质免疫印迹(WesternBlotting)对NeuroD蛋白在鼠脊髓损伤不同阶段的表达进行半定量分析，进而确定NeuroD在SCI大鼠脊髓中表达的规律。结果免疫组化提示NeuroD主要表达在脊髓灰质中，白质中未见阳性反应细胞。NeuroD阳性细胞经常成团排列，分布于损伤处与正常细胞的交界处。RT-PCR和蛋白免疫印迹结果提示NeuroD在大鼠脊髓损伤后不同时期都有表达：从脊髓损伤后第1天开始，NeuroD的表达呈现明显升高，在第5天达到最高峰，随后逐渐降

8、低。结论在大鼠脊髓损伤后的不同阶段，NeuroD的表达在时间和空间上有明显的变化差异：损伤后，NeuroD表达呈现升高的水平，到术后第5天达到最高峰；