参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑保护作用的实验研究

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1、军医进修学院解放军总医院硕士学位论文参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑保护作用的实验研究姓名：许成勇申请学位级别：硕士专业：中西医结合临床指导教师：王发渭2012-05-26军医进修学院硕士学位论文参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑保护作用的实验研究中文摘要目的：建立脑缺血并智能损伤动物模型，探索参龙健脑胶囊对脑缺血并智能损伤动物模型脑保护作用的机制。方法：用结扎双侧颈总动脉(2一V0)方法制备脑缺血模型，模型成功后随机分为假手术组、模型组、吡拉西坦组及参龙健脑胶囊低、高剂量组。分别于术后1天、14天、28天对各组大鼠进行神经功能评分。灌胃28天后，采用Morris水迷宫评

2、价各组大鼠的学习记忆能力。应用酶联免疫法(ELISA)测定各组大鼠脑组织中ACh的含量；采用比色法测定各组大鼠脑组织中谷氨酸(Glu)的含量；应用H．E染色方法观察各组大鼠脑组织切片海马区神经元形态的变化；应用免疫组织化学染色法观察各组大鼠脑组织切片海马区胆碱乙酰转移酶(CHAT)、N一甲基一D．门冬氨酸受体(NRl)、脑源性神经生长因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(TrkB)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)表达的变化。结果：1脑缺血并智能损伤大鼠模型评价结果显示：与假手术组相比，模型组的神经功能评分较高，差异有统计学意义(P<0．01)；模

3、型组的逃避潜伏期明显延长，首次跨越原平台时间也明显延长，差异有统计学意义(P<0．01)。2神经功能评分及Morris水迷宫实验结果结果显示：与模型组相比，参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组大鼠的神经功能评分显著降低(P<0．05)；与模型组相比，参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组的逃避潜伏期明显缩短，且跨越原平台频率也明显增加(P<0．05，P<0．01)。3大鼠脑组织切片H．E染色结果显示：与模型组比较，参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组海马区变性、坏死的神经细胞较少，神经元细胞层次较为清楚，排列整齐，核固缩、深染的细胞数目减少。4ACh、ChAT

4、、Glu、NRl、BDNF、TrkB、CGRP、NPY的测定结果显示：参龙健脑胶囊低、高剂量组及吡拉西坦组大鼠脑组织ACh含量、海马区ChAT军医进修学院硕士学位论文阳性细胞表达数和平均光密度值与模型组比较，均显著增加(P

5、吡拉西坦组大鼠海马区内CGRP阳性细胞表达数和平均光密度值明显高于模型8Ft(P<0．05，P<0．01)，而NPY阳性细胞表达数和平均光密度值则明显低于模型组(P<0．01)。结论：参龙健脑胶囊能够改善脑缺血并智能损伤模型的学习记忆能力，其作用机制可能为：减轻脑组织神经元坏死；增强胆碱能系统功效；调节Glu的含量和NRl的表达，对抗兴奋性毒性；促进BDNF与其特异性受体TrkB表达，保护受损的神经元；调节CGRP和NPY的表达，调控脑血管的舒缩状态。关键词：参龙健脑胶囊；脑缺血；学习记忆能力；脑保护；免疫组织化学4Experimentalstudiesof

6、shenlon舀iannaocapsuleonprotectiveeffectofbrainneuronsinratswithcerebralischemiaAbstractObjective：Tobuildtheratmodelofcerebralisehemiawithintelligentimpairment，andexploreneuroprotectionmechanismsofshenlonNiannaocapsuleforthismodel．Methods：Two-vesselocclusionwereadoptedtoestablishthe

7、cerebralischaemiamodel．60ratswererandomlydividedinto5groups：shamoperationgroup，modelgroup，pisacetamgroup，shenlongjiannaocapsulegroups(10wandhi曲dosage)．Onthe7d，14dand28d，thescoresofneuralfunctionwereobserved．Afteradministratingintragastricallyfor28days，theleamingandmemoryabilitieswe

8、retestedwiththeMorriswater