番茄黄化曲叶病毒分子鉴定及致病性研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M090109286上海海洋大学硕士学位论文题目：番茄黄化曲叶病毒分子鉴定及致病性研究英文题目：MolecularIdentificationofTYLCVandPathogenicity专业：作物遗传育种研究方向：分子抗病育种姓名：田守波指导教师：朱为民研究员二O一二年三月十一日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包

2、含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本

3、学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日番茄黄化曲叶病毒分子鉴定及致病性研究摘要番茄（LycopersiconesculentumM）是世界范围内广泛种植的主要蔬菜之一，但近些年由于番茄黄化曲叶病毒（Tomatoyellowleafcurlvirus）的大规模爆发给番茄生产带来了巨大影响，造成了严重损失。该病毒是一种由烟粉虱传播的双生病毒，严重影响番茄品质和产量，甚至可以造成番茄绝收。目前该病毒病在上海郊区也有大面积发生，已成为影响该地区番茄种植的主要障碍之一。

4、近几年来专家们一直致力于寻求解决这一问题的方法，其中筛选和培育抗病品种被认为是解决该病害问题最有效、最直接的方法。而开展番茄抗病基因的分子标记和品种资源的抗病鉴定、评价工作，则有助于建立番茄分子标记辅助选择育种体系，获得更多、更准确的抗源材料，促进番茄抗病育种水平的显著提高。本研究对上海农科院园艺所番茄组提供的番茄材料进行病毒病和抗病基因的鉴定，并在大田中用自然传毒的方法对分子鉴定的抗性基因结果进行验证。经鉴定含纯合抗性基因的株系，则可用于杂交育种，从而培育出更多优良的含复合抗性基因的品种。该实验

5、对番茄抗病育种研究具有实际应用价值。从上海、山东、河北地区采集了表现为黄化曲叶病的番茄样本，用兼并引物PA/PB扩增，均得到500bp的目的片段，克隆测序后在GenBank上比对分析，均为番茄黄化曲叶病毒（TomatoYellowLeafCurlVirus，TYLCV）。各地区TYLCV分离物具有很高的同源性，其同源性均超过98.9%，而与其他双生病毒亲缘关系相对较远。对上海市农科院园艺所抗双生病毒的番茄抗性材料提取DNA，利用已经报道的分子标记，初步分析这些材料携带抗病基因Ty-1、Ty-2、T

6、y-3。目前番茄材料中含有最多的抗性基因为Ty3，其次是Ty1-1,最少的是Ty2，其中含有Ty-3/Ty-3(纯合抗病)的田间均表现为抗病。并对分子标记结果与田间试验符合率为97.3%。构建了侵染番茄的两种双生病毒（HaNHK7与PaLCCNV）侵染性克隆，致病性测定表明，均可以系统侵染番茄、本氏烟并表现明显症状，HaNHK7侵染性克隆能侵染番茄和本氏烟，产生叶片向下卷曲症状；PaLCCNV侵染性克隆也可以侵染番茄和本氏烟，导致其叶片向上卷曲。关键词：番茄，番茄黄化曲叶病毒病，双生病毒，分子鉴定

7、IMolecularIdentificationofTYLCVandPathogenicityofGeminivirusesABSTRACTTomato(LycopersiconesculentumM)iswidlycultivatedintheworldasoneofthemainvegetables.Butinrecentyears,tomatoproductionisseriouslyaffectedresultin,hugelossesforTomatoyellowleafcurlviru

8、s(TYLCV)large-scaleoutbreakTYLCV,akindofGeminivirusestransmittedbythewhiteflyBemisiatabaci,canaffectseriousinfluencetoqulityandproductionoftomatoevencauseeconomiclossesupto100%intomatocrop.AtpresentTYLCVhasbrokeoutwidlyintheShanghaiareaandhasb