几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响

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广西大学硕士学位论文几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响姓名：陈泳先申请学位级别：硕士专业：水产养殖指导教师：陈晓汉20120630 几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响摘要与SPF凡纳滨对虾苗种生产密切相关的亲虾饵料生物安全性低的问题至今仍是严重影响凡纳滨对虾养殖进一步发展的一个重大问题。本文分别以“鲢鱼肉”、“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵”、“水丝蚓”为试验饵料，以“亲虾饲料”和“牡蛎肉+沙蚕”为对照，研究了所试饵料对凡纳滨对虾亲虾体长、体重、性腺发育、产卵及受精卵质量的影响，旨在为探索或开发适合SPF凡纳滨对虾苗种生产用的理想亲虾饵料提供参考。研究结果表明，“水丝蚓”对亲虾体长、体重、性腺发育、产卵效果以及受精卵质量均有较好影响；“鲢鱼肉+水丝41+鲢鱼卵”的效果与“水丝蚓”有诸多相似之处，但还不及“水丝蚓"；“鲢鱼肉”的效果较差。(1)对亲虾体长、体重影响方面：各饵料组均无显著差异(P>O．05)。“水丝蚓"组的亲虾体长增长幅度、增长率和体重增重幅度、增重率均最大，其次为“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵”组。“水丝蚓"组的亲虾体长增幅达0．93cm，平均增长6．73％；体重增幅达6．69，平均增重19．42％。(2)对亲虾性腺发育影响方面：“水丝蚓"组的性腺增重1475％，显著大于“亲虾饲料”组和“鲢鱼肉”组(PO．05)：“水丝蚓”组的终末性腺指数、性腺指数增幅分别为5．12％、4．50％，最大。初产时间，“水丝蚓”组的平均为113．67h，极显著小于“鲢鱼肉”组(P0．05)。 “水丝蚓”组的成熟率平均为10．45％，与各组的差异不显著(P>0．05)。(3)对亲虾的产卵影响方面：“水丝蚓’’组的连续产卵率最大，平均为72．08％，与“牡蛎肉+沙蚕"组无显著差异性(P>O．05)，但两者均极显著大于“亲虾饲料”和“鲢鱼肉"组(PO．05)。“牡蛎肉+沙蚕”组为117h，最大；“水丝蚓”组为134h，仅次其后。产卵量，“鲢鱼肉”组极显著小于其他组(PO．05)，“牡蛎肉+沙蚕’’组的最大，为12．59万。平均产卵次数，“水丝蚓”组为2．33次，显著小于“牡蛎肉+沙蚕”组(P0．05)ontheultimategonadindexamongthegroups，yettheultimategonadindexandgonadindexincreaseofthec·liIImodrilus’’was5．12％and4．50％separately，tookupthebest．Thefirstspawningtimeofthe“limnodrilus’’WaS13．67h，WaSserioussigni6cantlyshorterthanthe‘‘silvercarpmeat'’group(P0．05)．111em舭均teofthecclimnodrilus"Was10．45％．Eachgroupwasofnosignificantdifference(P>0．05)·(3)Onthespawnside：Thecontinuousspawningrateofthe“limnodrilus”groupWas72．08％，beingthelargest，whichWasnosignificantdifferencewiththe“crassostreameatmixedwithneathes'’group(P>0．05)．Whilethetwogroupswerebothserioussignificantlylargerthanthe‘'broodstockfeed'’or‘‘silvercarpmeat'’group口<0．01)．ThespawningintervalamongeachgroupWasofnosignificantdifference(P>o．05)．Theoneofthe“crassostreameatmixedwithneathes"WaS17h，beingsho疵st：aIldtheoneofthe“limnodrilus'’WaS134hdustfollowingbehind． Theeggamountofthe‘‘silvercarpmeat'’groupwasserioussignificantlysmallerthantheother(P<0．01)，whiletheotherwereofnosignificantdifference(P>O．05)．ThelargestoneWasthe“crassostreameatmixedwithneathes’’，achieving125．9thousand．一gespawningtimeof‘“limnodrilus’’was2．33．obviouslylheaveragespawnml臣timeofthelimnodriluswas2timesobviouslv‘●，’．1essthanthe“crassostreameatmixedwithneathes”(P5mg／L、总氨氮50cm、水深50一--60cm，密度8"--20雕。与此同时，由于亲虾在性腺发育和繁殖过程中，需要消耗大量物质和能量，并需要合成、积累大量卵黄物质供胚胎发育，因此，必需及时给亲虾提供营养丰富的充足饵料。否则，亲虾的性腺成熟和正常的繁殖活动将受到严重阻碍，使得苗种的生产难以继续或者造成对虾幼体质量大幅下降的后果。事实上，所供给饵料与亲虾的繁殖效果有许多重要的联系。为了提高生产亲虾的繁殖水平以获得更多健康苗种，许多学者已经开展了不少关于饵料与亲虾繁殖效果关系的研究。1．2亲虾饵料与亲虾繁殖效果的研究概述目前，亲虾繁殖培育中常使用的饵料主要分为两大类：亲虾饲料和生物饵料。亲虾饲料具有营养较全面、运输使用方便、基本不会带入致对虾发病的病原等优点，应用前景广阔。但是亲虾饲料也有较大缺陷。因为饲料在加工生产过程中，通常需要长时间暴露于开放的环境，并需要经过高温处理，因此饲料中的一些关键营养物质可能因此受到了严重破坏，使得饲料的培育效果难以保证，至今未见理想效果。为了保证亲虾的繁殖效果，获得更多健康虾苗，苗种生产单位在进行亲虾培育时，还不得不大量投喂目前效果较理想的传统生物饵料，主要包括鲜活的沙蚕以及冰冻的牡蛎、鱿鱼篁【2'3'4】·弋丁。研究表明，与其他生物饵料相比，沙蚕的氨基酸、脂肪酸总量(干重)分别可达67．43％、14．24％，均较其他饵料生物高f5-g]。其必需氨基酸的含量基本在38．39％以上，其中谷氨酸、亮氨酸、甘氨酸、天门氨酸、赖氨酸、精氨酸分别可达10．29％、8．98％、6．73％、6．63％、6．36％、5．70％；多不饱和脂肪酸也常占到脂肪酸总量的46．62％以上，且EPA、AA一般可分别达到16．20％、10．41％【51。沙蚕的蛋白质水平也较高，一般在52％以上【6，71。同时，其维生素E含量丰富，基本上可以达到2．67mg·1009"1【8】。沙蚕的营养价值高，对亲虾的繁殖效果也很好。Naessens等【9J(1997)研究表明，往基 广西大掌硕士研究生掌位论文几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响础饵料乌贼中添加了沙蚕的凡纳滨对虾亲虾比仅投喂乌贼的亲虾有更高的成熟率、交配率、受精率、产卵率和无节幼体产量，其效果能与乌贼中添加强化卤虫的饵料相当。姚卫军等(2009)的研究也表明，饵料中添加沙蚕比不添加沙蚕更能促进亲虾的性腺发育和繁殖n仉111。事实上，沙蚕作为亲虾繁殖培育中的一种高效生物饵料早已经得到了广泛的认可和应用[12-21】。另一种研究得较多的亲虾传统的生物饵料——牡蛎，同样具有较高的营养价值。研究表明，牡蛎肉的蛋白质含量基本能保持在其干重的45％～57％，因而常被视为一种高蛋白食物圈。与此同时，其氨基酸组成也较合理。除色氨酸外，8种必需氨基酸的量基本可占到氨基酸总量的34％；天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸4种呈昧氨基酸的量也能占到氨基酸总量的44％。可见，营养性和诱食性俱佳[23,24]。此外，牡蛎的脂肪水平较高，一般可以达到其湿重的14．30％以上，且不饱和脂肪酸含量丰富【25】。研究认为，牡蛎因其氨基酸组成适宜以及不饱和脂肪酸含量丰富，对亲虾的繁殖有较好效果【犁51。沙蚕、牡蛎这些生物饵料的营养价值高，对亲虾的繁殖有较理想效果，目前在亲虾的繁殖培育中仍被广泛使用【l】，但是在其应用过程中，尤其是在无特定病原体(SPF)凡纳滨对虾苗种生产中所存在的风险和成本问题，已越来越多地制约了它们的大量应用。已有研究证实，沙蚕、牡蛎等培育亲虾的传统生物饵料是对虾多种病原的中间寄主，其携带的致病原能通过垂直传播途径传染给虾苗，继而能导致对虾的养殖生产蒙受重大损失【2】。同时，由于沙蚕、牡蛎这些饵料生物与凡纳滨对虾一样常年生活在海水中，在当前各种环境污染越来越严重的情况下，可能已经较多地携带了能致凡纳滨对虾发病或死亡的病原、甚至重金属等化工毒素残留。因此，使用这些传统的生物饵料进行亲虾繁殖培育，亲虾或苗种出现大批死亡的风险较大，由此可能给SPF凡纳滨对虾优良苗种的生产以及对虾的健康养殖造成无法挽回的损失。加之，这些饵料生物的生长、繁殖也常常受到季节、水质、水温、洋流、产地等的影响，质量和产量不稳定【2】。而且，这些生物还长期处在过度的无序采捕状态，再者其赖以生存的海区环境也遭受了越来越严重的破坏。因此，造成了这些饵料生物资源量急剧下降，市场价格持续大幅上涨。在亲虾繁殖培育的传统生物饵料生物安全性大幅降低且资源紧缺的严峻形势下，SPF凡纳滨对虾苗种生产单位要正常开展亲虾的繁殖培育和保证健康虾苗的稳定生产势必困难重重。凡纳滨对虾是我国最主要的对虾养殖品种，但是近两年来凡纳滨对虾的病害频频发生，已越来越严重低影响了对虾健康养殖的发展。由于SPF凡纳滨对虾苗种是目前3 广西大尊明IE士习门宅生掌位键叼≮几种饵料对^纳滨对蜩阳蔓虾曩}殖目．j眨的影响提高对虾养殖成功率的重要保证。而SPF凡纳滨对虾苗种的生产，离不开生物安全性高、效果理想的亲虾培育饵料。因此，探索一些生物安全性高、同时对亲虾有较明显繁殖效果的可替代生物饵料是很有必要的。已有研究发现，鱼肉能在一定程度上促进亲虾的繁殖性能提高126]。鲢鱼作为一种广泛分布、环境适应性强的淡水鱼类，不仅资源量大、来源广泛、价格低廉、容易利用，而且因其常年生活在淡水环境中很少能带入致对虾发病的病原、生物安全性高。加之鲢鱼为浮游生物滤食性鱼类，而浮游生物机的不饱和脂肪酸水平常常较高，所以鲢鱼组织中可能就富集了较高水平的不饱和脂肪酸。实际上，罗永康(2001)等[271的研究已经表明，与其他淡水鱼相比，鲢鱼的不饱和脂肪酸极为丰富，其多不饱和脂肪酸的总量基本能维持在54％以上，n-3多不饱和脂肪酸平均可达23．5％。肌肉与内脏中的EPA和DHA水平也均较高，,∑m-3．与Xn-6脂肪酸的比值分别能达到1．9(肌肉)和1．7(内脏)，脂肪酸的组成较为平衡阴¨。此外，鲢鱼肉的蛋白水平也较高，其鲜体蛋白含量基本保持在17．6％以上【32】。一些重要的氨基酸组成，也与海水鱼接近1331。目前已有不少研究认为，较高的不饱和脂肪酸、蛋白质水平以及适宜的氨基酸组成是亲虾成功繁殖的重要保证【3胛6】。因此，以富含不饱和脂肪酸及蛋白质的鲢鱼组织作为亲虾饵料，研究其对亲虾繁殖的效果可能对促进生物安全性高、效果理想的亲虾饵料开发具有较多意义。但至今，鲢鱼组织作为亲虾培育饵料的研究未见报道。水丝蚓，由于在动物学分类地位、生活习性以及组织结构上与沙蚕相似，因此一些重要的生理代谢机能或调控机制可能还与沙蚕存在较多相似之处。而且，已有的营养研究表明，水丝蚓的蛋白质、不饱和脂肪酸含量也很丰富，水平较常见的许多淡水浮游生物高【3刀。其干品蛋白质含量平均在50％以上，被视作一种优质蛋白饵料；脂肪含量也常保持在18％以上。特别是其不饱和脂肪酸一般占到了脂肪总量的58％以上【33】。同时，有研究表明，其氨基酸和脂肪酸组成也与沙蚕、牡蛎的相似134,37,38]。必需氨基酸常可以占到总氨基酸的40％以上138-401。且其呈味氨基酸丰富，能有效促进鱼虾摄食，有促进鱼苗快速生长的作用H“51。再者，水丝蚓也是常年生活在淡水环境中的生物，与常年生活与海水环境中的对虾，病原的物种隔离大，生物安全性高。同时，水蚯蚓的来源较广、资源量大、价格便宜、规模化养殖利用等技术也较为成熟，大量使用起来方便。因此，将营养价值高、促生长效果好的水丝蚓用作亲虾饵料，研究其对亲虾繁殖的效果，可能对探索效果理想的亲虾培育饵料有较为重要意义。但迄今，有关生物安全性高的水丝蚓用作亲虾饵料对亲虾繁殖效果方面的研究，未见报道。 广西大掌司nb习院生掌位髓汶几种饵料对凡纳滨对虾亲虾曩}殪目a邑的影响1．3饵料营养与亲虾繁殖的研究概述目前许多研究认为饵料营养对亲虾的繁殖有重大影响，能对亲虾的性腺发育、成熟、交配、产卵以及受精卵质量起决定性作用，是亲虾繁殖培育的关键因素【弘弦511。如果亲虾在性腺发育和成熟过程中，供给的饵料不足或者营养不当，那么亲虾的性腺成熟、繁殖性能表现都会受到严重的不良影响，正常的繁殖活动甚至还可能会因此终止晰，521。一些研究还认为，亲虾的繁殖性能表现和受精卵质量的好坏，主要受到了亲虾饵料中的脂类、维生素、类胡萝卜素、蛋白质和氨基酸以及一些生物活性因子的影响[2,3,461。1．3．1脂类脂类对保证亲虾的正常繁殖极为重要。它们不仅可以作为能源物质给亲虾的性腺发育、交配、产卵以及胚胎的变态发育等提供大量能量，而且可以作为底物参与亲虾的繁殖调控、机能代谢和配子生成，而深刻影响了亲虾的繁殖水平。目前，与亲虾繁殖相关的脂类研究主要集中在高度不饱和脂肪酸(HUFAs)、磷脂(Phospholipid)、胆固醇(Cholester01)、甘油三酯(Triglyceride)方面【3,51-70]。1．2．2维生素维生素对亲虾的正常繁殖也有重要作用。目前，VC(VitaminC，Ascorbicacid)、VE(VitaminE，a—tocopher01)和VA(VitaminA，Retionl)有关的研究较多。饵料中的维生素能对亲虾性腺发育和繁殖活动产生较大作用，与其抗氧化活性较强、能对亲虾的内分泌生理活动产生重要的调控作用有关13,7q。不少研究已经证实，保证饵料中适量的VC、VE、VA的供给能明显改善或维持亲虾较高的繁殖性能；否则，日本对虾(Penaeus]aponicus)亲虾卵巢的成熟明显滞后[721。1．2．3类胡萝l、素类胡萝卜素不能在亲虾体内自行合成，必须由外源饵料提供‘731。同时，由于类胡萝卜素能作为类维生素、色素、抗氧化剂或抗光敏损伤的保护物质，有效起到保护繁殖有关的重要物质以及胚胎的作用，因此对保证亲虾的性腺发育或繁殖正常具有重要意义【31，件761。研究认为，亲虾的性腺成熟或胚胎的正常发育，均需要大量类胡萝卜素【771。若亲虾饵料的类胡萝卜素不足，亲虾的卵巢发育、受精卵质量或幼体的存活率均会下斛781。还有研究指出，亲虾饵料的类胡萝卜素水平，不仅与细胞膜及高度不饱和脂肪酸的氧化损伤程度直接相关[791，而且与刚孵出幼体的蛋白水平关系密切，对无节 31．种饵料对凡纳滨列曹F亲虾繁殖帽-J眨的影响幼体的个体大小有重要影响180]。此外，类胡萝卜素也能较多地影响到胚胎和开IS!前幼体色素细胞以及眼点的形成，能影响幼体的存活率【例。1．2．4蛋白质和氨基酸亲虾的繁殖过程，不仅需要消耗大量能量、需要合成及积累大量卵黄物质，而且需要大量特定的蛋白酶类或肽类激素参与。亲虾饵料中的蛋白质和氨基酸充足，不仅能保证亲虾繁殖所需的大量能量供应，也能保证亲虾性腺发育、配子生成、繁殖活动以及胚胎发育中有大量的调控因子或合成底物(如生物酶类激素、核酸、核苷酸、卵黄磷脂蛋白和卵黄蛋白原等)的供给，有保障亲虾性腺发育和繁殖顺利进行的效果陵3,34,52,81,82】。研究表明，罗氏沼虾(MacrobrachiumrosenbergiO的性腺指数和产卵量与亲虾饵料中蛋白质的含量有较大关联【2】；提高亲虾饵料的蛋白质水平，凡纳滨对虾的卵巢成熟频率、交配率和产卵量能随之升耐831。还有研究认为，斑节对虾亲虾在性腺发育和繁殖过程中对蛋白质或氨基酸的需求量可能高于生长阶段，亲虾饵料中的蛋白质水平应达到50％以上[z,34,59]。另一些研究也指出，不同来源的蛋白质对亲虾的繁殖性能有较大影响，并认为饵料中的氨基酸组成可能对亲虾的繁殖更为重要【2，341。亲虾饵料中的蛋白质或氨基酸含量及组成，应该满足亲虾性腺发育、繁殖产卵和胚胎正常发育的需要，具体可以参考优质天然饵料或野生亲虾及其幼体的组成【34】。蛋白质或氨基酸在亲虾饵料中组成较为适宜时，亲虾的性腺成熟和繁殖能较顺利进行【2’3】。如果组成不当或者比例失衡，就有可能造成亲虾性腺发育迟缓、繁殖性能下降或胚胎死亡率上升[34,46,81J。可见，亲虾饵料能否满足一定的蛋白质或氨基酸供应对保证亲虾的正常繁殖有重要意义。1．2．5生物活性因子此外，一些存在于生物活饵料中的生物活性因子也能通过影响机体的生理代谢水平对亲虾性腺的成熟发育和繁殖活动产生调控作用。例如，沙蚕中的甲基法尼醇(Methylfamesoate．MF)可以通过影响亲虾的内分泌系统进而促进凡纳滨对虾或斑节对虾性腺成熟以及繁殖性能提高；鱿鱼和卤虫中的一些性激素或甾醇类物质可以有效地诱导凡纳滨对虾或日本对虾的卵黄物质产生和积累【辨嘲，等。由此可见，人们已经较多地认识到了饵料营养与亲虾繁殖的重要关系。但较遗憾的是，目前有关亲虾性腺发育或繁殖活动中各种营养素的繁殖作用机制、代谢规律、相互作用以及适宜需要量等的认识都还没有达成一致，以致理想亲虾饵料的各营养素的组成及含量仍没能确定。6 广西大d明|旺七研究生掌位论文几种饵料对凡纳滨羽嚏p簧虾曩}殖目．J眨的影响1．4存在的问题一方面，尽管人们还在不断地加强亲虾饵料繁殖营养相关的研究并更多地认识了饵料营养在保障亲虾性腺发育和繁殖正常方面的重要作用，但是由于至今为止亲虾繁殖与营养相关的许多重要认识都还没有达成一致，致使曾经被寄予厚望的营养全面、搭配合理、使用方便的理想亲虾饲料还没能真正研制出来瞳3。事实上，目前国内外虽已有商品化的亲虾饲料出售，但是营养搭配或生产技术原因至今未见理想效果；现有的亲虾饲料还未能替代传统的亲虾培育生物饵料。为了获得更多健康虾苗，苗种生产单位在进行亲虾繁殖培育时，还不得不大量投喂对亲虾繁殖具有较理想效果的传统的生物饵料，主要包括鲜活的沙蚕以及冰冻的牡蛎、鱿鱼等[2,31。然而沙蚕、牡蛎、鱿鱼等这些天然的饵料生物由于生物安全性、成本、资源量存在的问题已越来越严重地制约了SPF凡纳滨对虾苗种的生产和推广。因此，有必要再探索或开发一些生物安全性高、来源广泛、价格低廉、对亲虾的繁殖效果良好、可替代沙蚕和牡蛎等亲虾传统饵料的生物饵料，以帮助解决当前亲虾繁殖培育所面临的饵料难题。另一方面，虽然目前部分学者已经开展了一些关于饵料对亲虾繁殖影响的研究，且获得了不少有价值的发现：如，刘元英等曾以冰冻卤虫成虫、鱼肉、虾肉、乌贼、卤虫无节幼体、桡足类6种天然饵料为试验对象，研究其对清洁虾(Lysmataa四boinensis)亲虾性腺发育、繁殖性能和受精卵质量的影响，发现了卤虫无节幼体或桡足类能有效地促进清洁虾亲虾的性腺发育、鱼肉可以较好地提高亲虾的繁殖性能和受精卵质量[261；姚卫军等人研究了双齿围沙蚕(Perinereisaibuhitensis)、杜氏枪乌贼(Loligoduvaucelii)、近江牡蛎(Ostreariuularis)以及三者的饵料组合对凡纳滨对虾亲虾性腺发育的影响，以确定培育亲虾的优质饵料，结果发现添加沙蚕的饵料比其他饵料更能促进亲虾的性腺发育和繁殖【lo’11】，等。但目前所报道的相关研究均还未能从真正意义上找到对凡纳滨对虾亲虾生物安全性高、繁殖效果好、应用成本较低的亲虾饵料。 几种饵料对月J内滨对虾亲虾繁殖榴-J眨的影响1．5本研究的目的和意义凡纳滨对虾是目前我国最主要的对虾养殖品种，在保证我国水产养殖业持续稳步发展中具有不可撼动的重要地位。但是，近两年来凡纳滨对虾病害的频频发生，已经严重影响了该对虾健康养殖的发展。SPF凡纳滨对虾苗种是目前降低对虾发病率、提高养殖成功率的重要保证。而SPF凡纳滨对虾苗种的生产，离不开生物安全性高、效果理想的亲虾培育饵料。沙蚕、牡蛎等传统的生物饵料，对亲虾的繁殖培育效果较好，但生产单位常常发现它们也是对虾许多病毒的中间寄主。它们携带的这些病毒能通过亲虾的摄食途径继而垂直传播给下一代，已然对SPF苗种的生产和对虾的健康养殖造成了严重的不良影响。目前，SPF凡纳滨对虾苗种的生产仍迫切需要安全、高效、价廉的亲虾培育饵料。因此，本试验选取生物安全性高、营养丰富、来源广泛、价格低廉的鲢鱼肉、水丝蚓作为凡纳滨对虾的亲虾饵料，比较研究了它们与亲虾饲料、沙蚕和牡蛎混合饵料对亲虾的体长、体重、性腺发育、产卵效果、受精卵质量的影响，旨在为开发安全、价廉、可替代沙蚕和牡蛎等亲虾的生物饵料提供参考，这对促进SPF凡纳滨对虾苗种的生产以及对虾的健康养殖具有重要意义。．8 广西大掌硕士研究生掌位论文几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响第二章几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响2．1材料试验分别以台湾某知名品牌的亲虾饲料、鲢色__(Hypephthalmichtysmolitrix)肉、鲢鱼卵、水丝蚓(Limnodrilus踞)、牡蛎(Crassostrea艰)肉、沙蚕(Neathes踱)作为饵料材料，研究了“亲虾饲料’’(A)、“鲢鱼肉’’(B)、“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵"(C)、“水丝蚓’’(D)及“牡蛎肉+沙蚕”(E)5种试验饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响。2．1．1饵料材料的来源及处理亲虾饲料来自广西水产研究所的SPF南美白对虾良种场亲虾饲料仓库，为台湾某知名品牌的产品，目前已在一些SPF凡纳滨对虾优良品种选育单位中得到应用，其亲虾繁殖的培育效果反映较好。鲢鱼肉、水丝蚓分别购自广西南宁市的青山菜市场、花鸟市场。牡蛎肉和沙蚕购自广西防城港企沙镇的海港市场。所有材料分别在投喂亲虾前，按表2．1的方法进行处理：表2-1试验饵料的处理方法Tab．2-1Thedisposalofthetrialdiets试验饵料的材料处理方法亲虾饲料鲢鱼肉鲢鱼卵水丝蚓牡蛎肉沙蚕避光密封冷藏保存。为鲢鱼去头、鳞、鳍、皮、骨、刺后经过剁碎或搅碎后获得的鱼肉，以小袋分装并置-20℃冰冻保存。为鲢鱼的卵巢组织，以小袋分装并置．20℃冰冻保存。鲜活暂养，用时以清水洗净沥干后投喂。清水反复清洗、沥干后，以小袋分装并置．20℃冰冻保存。鲜活暂养，用时以新鲜海水洗净沥干后投喂。9 几种饵孛I．对R纳滨列'隙虾繁殖目IJ电的影响2．2．2试验亲虾试验亲虾来自广西水产研究所的SPF南美自对虾良种场，为该场的后备亲虾。选取13月龄、无外伤、反应灵敏、弹跳力好、体色正常、卵巢未开始成熟发育的个体。2．2．3养殖海水试验所使用的海水取自近岸潮间带，经过滤、沉淀、砂滤、消毒、消氯、曝气后备用。2．2．4试验用品用具：电子称(最小刻度0．019)、量尺、量杯、显微镜、显微镜用测微尺、溶氧计、盐度计、光强计、温度计、PH试剂盒、亚硝酸盐试剂盒、氨氮试剂盒、养殖桶、孵化桶等。药品：聚维酮碘、优乐碘、EDTA-2Na、硫代硫酸钠、强氯精等。2．2方法2．2．1亲虾的饲养及繁殖管理2．2．1．1亲虾的投喂管理本试验所有亲虾随机分成5组，每组50尾，同时设2个平行。亲虾每天分别喂以“亲虾饲料”、“鲢鱼肉”、“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵”、“水丝蚓”、“牡蛎肉+沙蚕”5种饵料。每种饵料的日总投喂量控制在亲虾体重的15％"--20％(湿重)。其中饵料“牡蛎肉+沙蚕”参考了生产中的饵料搭配比例，牡蛎肉与沙蚕的质量比为2：1；“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵”则是经过预试验的摸索和优化确定的。每种试验饵料分5个时间段投喂其相应的饵料成分进行。饵料成分的投喂量，具体以喂食1～1．5h后还有少量剩饵为宜。各种饵料材料的搭配及投喂，如表2—2所示。表2-2试验饵料材料的搭配和投喂Tab．2-2Theassortingandfeedingmanagementofthetrialdiets10 广西大掌硕士研究生掌位论文几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖佳能的影响注：“—，表不在相_匝的时刻内不投喂该种饵科对应的成分Note：“—”m∞nsthecomponentoflllalInaldietwasnotgivenatthecorrespondingtime2．2．1．2饲养环境管理试验过程中通过监测和适时换水控制养殖水体总氨氮50cm、水深在35,、,50em。保持水体24h不间断地充气。同时，根据需要分别通过增减保温塑料薄膜、黑色遮阳网和加海水粗制盐或适量淡水的办法调节养殖水温、光照强度和盐度，使水温稳定在28"--30℃、光照强度在100lx一-500lx、盐度在28‰～33‰。本试验环境的光照为自然光照，光照周期约为14L：10D。2．2．1．3亲虾的促熟和观察采用镊烫法摘除亲虾的单侧眼柄进行促熟。亲虾在摘除单侧眼柄后，一般继续投饵培育3～7d，即可出现性腺发育成熟个体。之后，每天检查是否有性腺发育成熟即将产卵的个体。发现亲虾性腺首次发育成熟即将产卵时，立即对其另一侧眼柄以眼柄环进行标记。2．2．1．4成熟亲虾的交配管理各饵料组的成熟亲虾均安排在同一个雄虾交配池中进行交配。该池面积4xlOm2，水深0．5～O．6m，光照1000"--15001ex。性腺发育良好的雄虾约有250尾，健壮无伤病、 几种饵料对R纳滨列'F亲虾曩}殖目．j眨的影响有活力、反应灵敏、精荚呈白色且饱满凸出。交配池的条件以及雄虾的品质和数量，均达到了成熟亲虾充分完成正常交配的要求。2．2．1．5幼体的孵化和培育成熟亲虾的产卵以及幼体的孵化和培育，分别安排在各组专门的产卵桶兼孵化桶中进行。这些桶的单个容积约400L。每个桶控制产卵或孵化的水体保持在350L。安排亲虾产卵前，每桶各加入经消毒过滤的新鲜海水350L，同时旌5ppmEDTA-2Na络合水中的重金属离子，并施0．5ppm优乐碘抑杀水体中的病原微生物以达到保护卵子或幼体的作用。调整盐度维持在28％,,--,33*／00，并用加热棒控制水温稳定在29．5"--30．5℃。同时保持24h不间断地微充气。安排亲虾产卵时，按组别和编号分别把已成功交配或未成功交配的成熟即将产卵亲虾放入对应的孵化桶内，做好标记并静待其产卵。亲虾产卵时，不管是否已经成功交配，一般从22：00到3：00均会开始或已经完成产卵。亲虾产卵结束后，及时捞回已经产卵的亲虾并在2～3h内完成计数和记录其产卵量。成功交配的亲虾所产的卵，继续保留在孵化桶内，并每隔3h左右翻动一次，直至次日18：00大部分无节幼体孵出。此时，及时计数并测试该组无节幼体。孵化桶内存活下来的无节幼体大部分会在第二天18：00左右变态成为蚤状幼体，届时继续进行蚤状幼体的计数及测试。2．2．2繁殖性畿指标的测定2．2．2．1卵粒或幼体的计数亲虾产卵或幼体孵化、变态后，用手轻轻搅动水体并不断从桶内各个方向翻动卵子或幼体使其充分分散在孵化水体中。待卵子或幼体分散均匀后，分别迅速用35ml的量杯从桶内各相对固定位点打取水样8个，并分别置于250ml烧杯中。8个水样中卵子或幼体计数的数值取平均值后乘于10000，作为当前亲虾此次的产卵量或相应幼体产量。同时，及时记下该产卵亲虾或该组幼体的组别、编号、日期以便统计。 广西大荨埔交士习阳I巴生掌岱晴仑文几种蕾啊唪对^．蠡内滨哭卜|cF亲虾曩}殖目d岫影响2．2．2．2卵径的测定各组亲虾所产的卵子，以显微镜测微尺进行测量：每组随机抽取10粒刚产出不久的卵子置于显微镜下，然后用测微尺逐个测量其长径和短径。之后取其平均值，根据公式卵径=(长径+短径)陀，确定该组亲虾当前所产卵子的卵径。2．2．2．3幼体突入低盐海水环境的存活时间测定幼体突入低盐海水环境存活时间测定所用的低盐海水为孵化幼体所用的海水加入适量淡水调配而成。原孵化幼体使用的海水，盐度为31％o，调配成测试用海水后，盐度为10‰。测定前，调整孵化幼体用的和测试用的海水温度一致(本试验通过久置空调环境中进行预冷的办法，控制两种水体的水温在28℃)。测试开始时，迅速把幼体浸入低盐海水中，同时计时。接着，把浸入低盐海水后的幼体，用吸管带水转移到显微镜下密切进行观察。直至测试幼体完全停止活动，停止计时。各组幼体随机取样并做10个重复测试，所得的时间数值取平均值后作为该组幼体的突入低盐海水环境的存活时间。2．2．2．4亲虾体长、体重的测量试验开始前，测定亲虾入桶时的体长、体重，作为亲虾的初始体长、初始体重。以饵料分别对亲虾强化培育一段时间后，立即测定的未剪眼柄的亲虾体长、体重作为各组的终末体长、终末体重。体长、体重的测定试验从2011年6月15日开始，到2011年7月14日结束，共进行了30天。体长增长率(％)：100×(终末体长一初始体长)，初始体长体重增重率(％)=l00×(终末体重一初始体重)／初始体重2．2．2．5亲虾性腺发育的检测亲虾入桶时，以各组随机抽样、解剖测定的亲虾体重、性腺重确定初始性腺重、初始性腺指数。对亲虾摘除单侧眼柄后，至亲虾初次产卵时，以亲虾初次产卵的时刻和摘除亲虾眼柄的时刻差作为该组亲虾的初产时间。各组亲虾稳定成熟产卵时，以每 几种饵科．对凡纳滨哭卜|cF亲虾曩}疽诅．J眨的影响天各组内产卵的亲虾个体数和各组的亲虾个体总数确定该组亲虾的成熟率。同时，适时抽样、解剖确定该组亲虾的终末性腺重、终末性腺指数。性腺指数(％)=lOOx性腺重／亲虾体重性腺增重率(％)=lOOx(终末性腺重一初始性腺重)／初始性腺重初产时间=亲虾初次产卵的时刻一亲虾摘除单侧眼柄的时刻成熟率(％)=lOOx每天组内产卵的亲虾个体数／组内的亲虾个体总数2．2．2．6亲虾产卵效果的检测各组亲虾稳定成熟产卵时，标记、记录其连续成熟产卵的亲虾个体数和已成熟产卵的亲虾个体总数，统计确定该组亲虾的连续产卵率；统计各组同一亲虾个体连续两次成熟产卵的时间差，确定该组亲虾的产卵间期；统计各组亲虾累计产卵的总次数和己产卵的亲虾总个体数，确定该组亲虾的平均产卵次数。连续产卵率(％)=lOOx各组连续成熟产卵的亲虾个体数／各组已成熟产卵的亲虾个体总数产卵间期=各组中同一亲虾个体连续两次成熟产卵的时间差平均产卵次数=各组亲虾累计产卵的总次数／各组已产卵的亲虾总个体数2．2．2．7受精卵质量的检测各组随机抽样并测定亲虾受精卵的长径和短径，从而确定该组亲虾受精卵的卵径；通过分别计数各组无节幼体的产量和该组同一亲虾个体的产卵量，确定该组无节幼体的孵化率；通过计数各组蚤状幼体的产量和相应无节幼体的产量，确定无节幼体的变态率；通过测定同一批次无节幼体或蚤状幼体突然浸入低盐海水环境后完全停止活动时的时间，确定无节幼体或蚤状幼体突入低盐海水环境的存活时间(其中无节幼体检测的批次日期为2011年8月23日，蚤状幼体检测的批次日期为2011年8月24日)。卵径=(长径+短径)／2无节幼体孵化率(％)=lOOx(各组无节幼体的计数平均数／各组同一亲虾个体产卵量的计数平均数) 几种饵李L对月，j呐滨对蛔码案虾繁殖帽a巨的影响无节幼体变态率(％)=100x(各组蚤状幼体的计数平均数／各组相应的无节幼体计数平均数)2．2．3数据的统计分析试验亲虾繁殖性能检测所获得的各种指标，用Excel整理取平均值后，以统计分析软件SPSS17进行LSD多重比较和ANOVA差异性分析。当方差分析结果差异显著时，以P<0．05表示；差异极显著时，以P<0．01表示。 几种饵料对凡纳滨翼卜|(F亲虾曩}殖憎-j眨的影响第三章结果与分析3．1试验饵料对亲虾体长、体重影响的效果3．1．1体长及体长增长率各组亲虾经营养强化培育后，体长均有所增长，但不同饵料组的亲虾体长增长情况不一。D组的亲虾体长增长幅度最大，达0．93cm，平均增长6．73％，增长后的体长平均为14．77cm，均大于其他组。C组的亲虾体长仅次于D组，平均增长为O．73cm，增长了5．30％，比其余组大。B组的体长增长幅度以及体长增长率均最小，其体长增长幅度平均不及0．4era、体长增长率也平均不足3％。各组的亲虾体长及体长增长率统计分析结果，见表2．3。表2-3不同组的亲虾体长及其体长增长率Tab．2．3ThebroodstocksbodylengthandbodylengthincreaserateofdifferentgroupS注：表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均致士标准差”Note：the"value士figure"ofthetablemesns“m蚴dard"ofthetwoparalleltrialgroups方差分析表明，D组、C组、B组与E、A组的亲虾初始、终末体长以及体长增长率均没有显著差异性(P>0．05)。试验亲虾强化培育后，不同组的亲虾体长及体长增长率差异，分别如图2—1和图2—2所示。16 几种饵料对凡纳滨，日重F亲虾曩}殖目．JI巴的影响16瑚fi赢i丽●韧始体长口终末体长l———．，．．．．．．．．．．．．．．．．．．．一——，，．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．J15．00量14．00逝整13．00名^枨12．0011．00lO．∞ABCDE试验饵料组图2一l不同试验饵料组的亲虾体长Fig．2一lThebroodstoeksbodylengthofdifferenttrialdietgroups3．1．2体重及体重增重率王：门ABCDE试验饵料组图2-2不同试验饵料组的亲虾体长增长率Fig．2-2Thebroodstoeksbodylengthincreaserateofdifferenttrialdietgroups繁殖营养强化培育后，各组的亲虾体重均有所增加，但不同组的亲虾体增重不同。D组的亲虾体重平均增加幅度最大，达6．69，平均增重了19．42％，增重后的亲虾体重可达到41．299。其增重幅度、增重率、终末体重均比其他组的高。C组的亲虾体重增重率在10．66％"11．10％之间，分别次于A组、E组，平均增加了3．759，体重最大可达39．949。B组的体重增幅平均只有2．279、体重增重率平均只有6．61％，均最小。各组的亲虾体重及体重增重率统计分析结果，见表24。表2-4不同组的亲虾体重及体重增重率Tab．2_4Thebroodstocksbodyweightandbodyweightincreaserateofdifferentgroups注：表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”Note：the"valuc：Lfigure’’ofthetablemeans“m蝴dard"ofthetwoparalleltrialgroups∞∞∞∞∞∞∞∞ 几种饵料对R纳滨对虾亲虾—}殖性鼻邑的影响方差分析结果表明，D组、C组、B组与其他组的亲虾初始体重、终末体重以及体重增重率均无显著差异(P>o．05)。繁殖营养强化培育前后，各组亲虾的体重及其体重增重率差异，分别如图2-3和2-4所示。后磊忑‘磊ABCDE试验饵料组图2-3不同试验饵料组的亲虾体重Fig．2-3Thebroodstocksbodyweightofdifferenttrialdietgroups3．2试验饵料对亲虾性腺发育的效果3．2．1性腺重及性腺增重率主正王。nABCDE试验饵料组图2-4不同试验饵料组的亲虾体重增重率Fig．2-4Thebroodstocksbodyweightincreaserateofdifferenttrialdietgroups对比亲虾单侧眼柄摘除前后的性腺发育情况，发现不同组的亲虾性腺均有所发育，但其发育程度不一，以D组的亲虾性腺发育最好。D组的亲虾性腺比试验开始前平均增重1475％，平均增重达2．259，性腺均重到达2．49：性腺增重率、增重幅度、性腺重均大幅高于其他组。C组的亲虾性腺平均增重达到1100％，性腺增重为1．19，性腺近成熟时均重达1．29，均比A组重，仅次于E组。B组的性腺增重幅度平均为O．9昏性腺增重率平均为775％，两指标稍比A组高。不同组的亲虾性腺重及性腺增重率的统计分析结果，见表2-5。表2．5不同组的亲虾性腺重及性腺增重率Tab．2．5Thebroodstoeksgonadweightandgonadweightincreaserateofdifferentgroups18 g-西大菩蛹野士习"}巴生掌位葭咒赶几种饵料对．嗍滨羽IjcF素虾繁殪憎-Jl邑的影响注：表中的“数值4-数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”：同一列中有不同上标小写字母标记的值表示差异显著(PO．05)，但不同组的亲虾性腺增重率的差异显著(P<0．05)。其中，D组与E组、C组亲虾的性腺增重率的差异不显著差异①>0．05)，与A组或B组的差异显著口0．05)。B组与A组间的差异不显著(P>o．05)，但与E组的差异显著(P<0．05)。各组亲虾的性腺重及性腺增重率，分别如图2．5和2-6所示。Q一嘲毯趔2．502．001．501．00O．500．00匝正肌J]iiABCDE试验饵料组图2-5不同试验饵料组的亲虾性腺重Fig．2-5ThebrooOsmcbgonadweightofdifferenttrialdietgroupsABCDE试验饵料组图2-6不同试验饵料组的亲虾性腺增重率Fig．2-6Thebroodstoeksgonadweightincreaserateofdifferenttrialdietgroups∞∞∞∞∞∞∞∞∞溉雪|舭叭眦叭喜|撇仉一担一碍蚓骜琶掣 31．种饵料对凡纳滨对蛔．亲虾繁殖性IJ眨的影响3．2．2性腺指数比较各组亲虾的性腺指数，发现D组亲虾的终末性腺指数最大、性腺指数增幅也最大。C组亲虾的终末性腺指数和性腺指数增幅均比B组、A组大，稍次于E组。B组的终末性腺指数平均为2．92％、性腺指数平均增幅为2．5％，较E组小，稍比A组大。不同组亲虾的性腺指数统计分析结果，见表2．6。表2-6不同组亲虾性腺指数Tab．2-6Thebroodstocksgonadindexofdifferentgroups注：表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”Note：the"valuea：figure"ofthetablemeans“means士Standard"ofthetwoparallelIrialgroups方差分析结果表明，各组亲虾的初始性腺指数或终末性腺指数均无显著差异性(P>0．05)。不同组亲虾性腺指数的差异，如图2．7所示。ABCDE试验饵料组图2-7不同试验饵料组的亲虾性腺指数Fig．2—7ThebroodstocksgonadindexofdifferenttrialdietgroupsABCDE试验饵料组图2．8不同试验饵料组的亲虾初产时间Fig．2-8Thebroodstocksfirstspawningtimeofdifferenttrialdietgroups∞∞∞∞∞∞∞∞∞∞∞∞的O321l—q)扈鸷傲幂∞∞∞∞∞∞654321一lj6一籁颦叠掣 广西大攀硕士研究生学位论文几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁疽性能的影响3．2．3初产时间对亲虾摘除单侧眼柄后，各组的亲虾性腺成熟发育加快，但不同组亲虾性腺发育成熟的初次产卵时间，即初产时间有较大差异。亲虾初产时间最短的是D组，平均为113．67h。C组的平均初产时间是146．75h，较B组短，比E组、A组长，仅次于A组。B组的初产时间最长。各组亲虾初产时间的统计分析结果，见表2．7。表2．7不同组的亲虾初产时间和成熟率Tab．2-7Thebroodstocksfirstspawningtimeandmaturationrateofdiff朗'entgroups注：表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”；同一列中有不同上标大写字母标记的值表示差异极显著(P<0．01)Note：the"valuc士figurc”ofthetablemeans"mcans=呦dard"ofthetwoparalleltrialgroups；thedifforentcapitalletteruplabeledinthesamequeuemⅨlnsdiffergreatsignificantly(P0．05)，但均极显著小于B组(P<0．01)。各组亲虾初产时间差异，见比较图2—8。3．2．4成熟率比较各组亲虾的成熟率，发现D组亲虾每天的成熟率基本稳定在10．22％-'--10．68％，平均为10．45％，分别次于E组、A组。C组亲虾的性腺成熟率均值比B组大，在8．61％---9．63％之间波动，也次于E组、A组。B组亲虾的成熟率最小。各组亲虾成熟率的统计分析结果见表2．7。差异分析的结果表明，各组亲虾成熟率的差异没有显著性(P>o．05)。各组亲虾稳定成熟产卵期间的成熟率差异，见图2-9。21 14．∞12．oo10．00邑8．00哥壤6．00锓4．002．000．∞ABCDE试验饵料组^Ba■}^Ba■_Bbc：n。一Il门ABCDE试验饵料组图2．9不同试验饵料组的亲虾成熟率图2-10不同试验饵料组的亲虾连续产卵率diffvrvnttrialdietgroups3．3试验饵料对亲虾产卵的效果3．3．1连续产卵率ofdifferenttrialdietgroups对各组亲虾在稳定成熟产卵期间的产卵个体和连续产卵率进行统计分析，发现不同组亲虾的连续产卵个体数和连续产卵率有较大差异。D组的连续成熟产卵个体最多，连续产卵率也最大，其连续产卵率平均达到了72．08％，大幅高于其他组。C组的连续产卵率次之，较E组大，平均是62．99％。B组的连续产卵率平均只有12．50％，最小。E、A组的分别平均为56．25％、29．29。／6。各组亲虾的连续产卵率统计分析结果，见表2·8。表2．8不同组的亲虾连续产卵率Tab．2．8Thobroodstockscontinuousspawningrateofdifferentgroups———————————————————————————————————————————————一组别连续成熟产卵个体(尾)成熟产卵总个体(尾)连续产卵率(呦———————————————————————————————————————————————————一●13A组24lB组2lC组20161014341l29．29士1．01Bbc12．50士17．68c62．99士11．94A髓D组1101472．08士-0．92A————一_———————————————————————————————一—————————————一∞册∞砷绚∞加mO一96一哥器乱懿章f 几种铟斛对凡纳滨对虾亲虾曩j殪性溅的影响注：1、2分别表示各试验饵料组的两个平行组；表中的“数值土数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”；同一列中有不同上标大写字母标记的值表示差异极显著(P<0．ooNote：thenumber1and2inthesecondqueuemeansthetwotrialdietsparallelgroups；the"valuea=figure"ofthetablemeans"m蝴dard"ofthetwoparalleltrialgroups；thedifferentcapitalletteruplabeledinthesamequeuemeansdiffergreatsignificantly(P<0．oo方差分析结果表明，D、C、E组亲虾的连续产卵率差异不显著p0．os)。D组极显著大于A、B组(Po．05)。各组的回一个体产卵亲虾的产卵间期差异，如图2—11所示。2∞．∞l∞．00160．00—140．∞j垂徽器∞．00{L∞．∞40．0020．00O．∞j盲壬-2E壬ABCDE试验饵料组图2．1l不同试验饵料组的亲虾产卵问期Fig．2-llThebroodstocksspawningintelvalofdifferenttrialdietgroups3．3．3产卵量14．∞】2．∞810．∞o28．00×棚6·∞茬4．00Z∞0．∞ABCDE试验饵料组图2．12不同试验饵料组的亲虾产卵量Fig．2—12ThebroodstockseggamountofdifferenttrialdietgroupsD组亲虾的平均产卵量基本保持在9．71x104"一11．55x104粒，较E组和C组小，比A组和B组大。C组亲虾的产卵量平均为11．48x104粒，仅次于平均产卵量最大的E组。E组亲虾的产卵量基本保持在10．61x104--．14．57x104粒之间。A组产卵量平均是9．78xi04粒。B组的亲虾的最大产卵量不足10．00×104粒，平均只有5．17x104粒，产卵量最小。各组亲虾产卵量的统计分析结果，见表2-9。方差分析结果表明，D组或C组亲虾的平均产卵量极显著大于B组(P0．05)。E组产卵量最大，极显著大于B组口o．05)。A组显著大于B组(P0．os)。各组卵径的差异，见图2．14。∞∞∞∞∞∞∞∞∞∞∞∞盯盯嬲拥{皂％嬲嬲拍骆衢嬲∞∞∞∞∞的∞32l1O0一s。暑。籁憨吞钆嚣} 几种饵料对．嗍滨蝈童F亲虾■}殖挂漩的影响表2．11不同组的卵径Tab．2-11Theeggsizeofdifferentgroups注：表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”NoW：the"value士figure"ofthetablemeans“m蚴dard"ofthetwoparalleltrialgroups3．4．2无节幼体孵化率试验测定结果表明，D组的无节幼体孵化率，基本处在45．44％和71．09％之间，平均是58．26％，比C组和A组大，仅次于E组。C组的无节幼体孵化率平均为47．99％，比A组大。E组的平均为61．90％。B组由于没有成功交配的亲虾，交配率为0，有关幼体孵化率也为O，下同。各组无节幼体孵化率统计结果，见表2-12。表2．12不同组的无节幼体孵化率Tab．2．12Thenaupliushatchrateofdifferentgroups组别产卵量计数平均值无节幼体计数平均值(X104)(x104)无节幼体孵化率(％)A组C组D组E组8．799．7210．4711．5211．6911．8416．1410．033．055．293．177．578．315．389．206．7044．56土13．9547．99士25．0658．26=1=18．1461．90士6．93注：l、2分别表示各试验饵科组的两个平行组；表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均数土标准差’’26l2l212l2 广西大掣嘲页士习阳I巴生业皇位论文几种饵牵I-对R纳滨对蛔门蠢虾■}殖a幽皂的影响Note：thenumber1and2inthesecondqueueme[1nsthetwotrialdietsparallelgroups；血e‘'valued=figure'’ofthetablemcans“meansa=standard"ofthetwoparalleltrialgroups方差分析结果表明，E、D、C、A组的无节幼体孵化率差异没有显著性(P>o．05)。各组的无节幼体孵化率差异，如图2．15所示。3．4．3无节幼体变态率D组的无节幼体变态率，基本处于62．83％'～64．74％，平均是63．78％，较之E组稍小，但比C、A组大。C组的无节幼体变态率平均为56．68％，稍大于A组的54．86％。E组最大，平均为66．16％。各组的无节幼体变态率统计分析结果，见表2—1l。表2．13不同组的无节幼体变态率Tab．2-13Thenaupliusmetamorphismrateofdifferentgroups注：1、2分别表示各试验饵料组的两个平行组；表中的“数值士数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”Note：thenumber1and2inthesecondqueuem啪sthetwotrialdietsparallelgroups；the"value圭figure"ofthetablem船xl$“me蛐dard'’ofthetwoparalleltrialgroups方差分析结果表明，不同组的无节幼体变态率差异不显著(P>0．05)。各组无节幼体变态率的差异，见图2—16。 几种饵料时^，|内滨列'p囊噎：F繁殖忸■皂的影响60．00邑50．00錾40．00萋30．00霁20．00限10．00O．00ACDE试验饵料组60．00兰50．00篓40．00萎30．00寨20．00限10．000．00ACDE试验饵料组图2—15不同试验饵料组的无节幼体孵化率图2．16不同试验饵料组的无节幼体变态率Fig．2-15ThenaupliushatchrateofdifferenttrialFig．2-16Thenaupliusmetamorphismrateofdictgroups3．4．4无节幼体突入低盐海水环境的存活时间differenttrialdietgroupsD组的无节幼体突入低盐海水环境的存活时间，基本在323．00----330．OOS之间波动，平均为326．50S，比C、A组的存活时间长，较E组的短。C组的无节幼体存活时间平均是285．OOS，比A组的大。E组的无节幼体存活时间平均为365．50S，平均约比A组的多存活了100S。不同组的无节幼体突入低盐海水环境存活时间的统计分析结果，见表2．14。表2．14不同组无节幼体、蚤状幼体突入低盐海水环境存活的时间Tab．2—14Thenaupliusorzoeasurvivaltimewhichwefeimmersedabruptintolowersalinityseawaterofdifferentgroups注：表中的“数值4-数值”表示两个平行试验组的“平均数士标准差”；同一列中有不同上标小写字母标记的值表示差异显著pm05)；同一列中有不同上标大写字母标记的值表示差异极显著(PO．05)，但均极显著小于E组@o．05)，但均极显著小于E组(P0．05)，且每天的成熟率平均在10％以上，均较高。由此可以看出“水丝蚓"在促进凡纳滨对虾亲虾性腺发育方面有较好的效果，效果与“牡蛎肉+沙蚕"相当。4．3试验饵料对亲虾产卵效果的影响产卵效果主要反映了亲虾性腺再次成熟和产卵的能力，与繁殖期间亲虾体内营养积累以及持续供给的饵料有很大关系。给处于繁殖期的凡纳滨对虾投喂适当的饵料，亲虾的性腺再次成熟和产卵能力可以获得明显改善。研究表明，将沙蚕、牡蛎、鱿鱼三者混合或仅单独提供沙蚕，比仅提供牡蛎更大程度地提高了亲虾的交配率(Po．05)。由此，可以看出这两种饵料对亲虾的产卵效果相当。4．4试验饵料对受精卵质量的影响幼体的孵化、变态、生理代谢以及对环境变化的适应性调整等都需要调动及消耗大量的能量和物质，而开口前幼体在进行这些活动时所需要的物质和能量只能依赖于受精卵中的卵黄物质储备。可见，受精卵的质量对开口前幼体的孵化、变态和存活有深刻的影响。由于卵黄物质主要是亲虾在性腺发育期间合成及积累的，其合成质量和积累程度均与亲虾配子生成期间外界供给的饵料状况密切相关，因此估计受精卵质量的好坏也主要受到了繁殖期间亲虾饵料的影响。有研究表明，给亲虾投喂适当的饵料可以明显提高亲虾的受精卵质量和幼体的存活率阴删1,53,901。Wouters等【911(1999)以冻乌贼、牡蛎、贻贝和蛤肉(质量比为2．5：1．3：1：1)的混合物为基础饵料，分别添加强化和未强化卤虫做成试验饵料，观察其对凡纳滨对虾亲虾性腺发育或受精卵质量的影响。结果发现，添加了强化或未强化卤虫的试验饵料组均比对照组有更高无节幼体孵化率及变态率，且差异性显著(P<0．05)。姚卫军等Il川以沙蚕或沙蚕、牡蛎、鱿鱼三者的混合饵料投喂凡纳滨对虾，结果也获得了更大的受精卵和更高的幼体孵化率及变态率(Po．05)，表明各种饵料对亲虾促生长方面的营养水平较接近。(2)在亲虾性腺发育方面：“水丝蚓”促进亲虾性腺发育的效果最好，稍好于“牡蛎肉+沙蚕"，明显优于“亲虾饲料”和“鲢鱼肉”。(3)在亲虾产卵效果方面：“水丝蚓"对亲虾产卵的综合效果与“牡蛎肉+沙蚕”相当，优于“亲虾饲料”，且显著优于“鲢鱼肉”。(4)对受精卵质量方面：“水丝蚓"对改善受精卵的效果在整体上还不及“牡蛎肉+沙蚕”，但明显较“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵”、“亲虾饲料”好。综上，“水丝蚓”在促进亲虾体长、体重增加和性腺发育方面效果较“牡蛎肉+沙蚕’’、“鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵”、“亲虾饲料"和“鲢鱼肉”好：在改善亲虾产卵效果方面，基本与“牡蛎肉+沙蚕"相当；在改善受精卵质量方面，整体上虽不及“牡蛎肉+沙蚕"，但是均明显优于“亲虾饲料"和“鲢鱼肉"。可见，“水丝蚓”对亲虾繁殖的效果在整体上还是不错的。同时，由于水丝蚓生物安全性方面较沙蚕和牡蛎高，且来源广泛、价格低廉，具有较大的开发价值。因此，建议进一步开展水丝蚓作为亲虾饵料的利用或营养价值研究。 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几种蕾臼斗对凡纳滨列重n簧虾繁殖帽．J眨的影响[93】艾春香冲华绒螯蟹维生素营养生理研究【D】．上海：华东师范大学，2001【94】DabrowskiK,Ciereszko．Ascorbicacidandreproductioninfish：endocrineregulationandgametequality[J]．AquacultureResearch,2001，32(9)：623—638【95】CallaCL，CuzonG，QuazuguelP．Effeetofhighlyunsaturatedfattyacids，a-toeopherolandascorbicacidinbroodstockdietoneggcompositionanddevelopmentofPenaeusindicus[J]．ComparisonBiochemisityPhysiology，1995，112A(3／4)：417-424【96】王映文．斑节对虾的饵料中添加VE对促进成熟和产卵过程的影响川．养鱼世界，1999,23(8)：71．74【97]Pangantihon-KuhlmatmMP，Millamena0，ChernY．EffectofdietaryastaxanthinandvitaminAonthereproductiveperformanceofPenaeusmonodonbroodstock[J]．AquaticLivingResources,1998，11(6)：403-409【98]CavalliRO．Broodstoeknutritionandoffspringqualityofthefreshwaterprawnmacrobraehiummsenbergiideman[D]．Gent：FacultyofAgriculturalandAppliedBiologicalSciences，GhentUniversity，2000【99]AngKJ，LeeYM，LawAT．ProteinrequirementsforMacrobrachiumrosenbergii[A]．AsianFisheriesSociety．ThirdAsianFisheriesForum[C]．Singapore：AsianFisheriesSociety，1992，26-30【100]GendronLouise，FradettePiene，GodboutGuillaume．Theimportanceofrockcrab(Cancerirroratus)forgrowth,conditionandovarydevelopmentofadultAmericanlobster(Homarusamericanus)[J]．ExpendMarineBiologyEcology，2001，262(2)：221—241【101]周发林，马之明，黄建华，等．4种斑节对虾亲虾饵料蛋白质的营养价值评价【J】．湛江海洋大学学报，2005，25(4)：9．13[102】BRAYWA，LawrenceAL，LesterLJ．Reproductionofeyestalk-ablatedPenaeusstylirostrisfedvariouslevelsoftotaldietarylipid[J]．WorldAquacultureSociety,1990，21：41-52[103]BRAYWA,LawrenceAL，LeungTrujilloJR．ReproduetiveperformanceofablatedPenaeusstylirostrisfedasoylecithinsupplement[J]．WorldAquacultureSociety，1990，20：19．22 几种胡日斗对．嗍滨对虾亲虾■}殖目■眨的影响致谢回首研究生阶段一路成长的历程，得到了许多老师、同学、亲人、朋友的大力帮助和指引，心中很是感激。在此，我要借此机会一一向他们表示感谢。首先，我要感谢我的导师陈晓汉研究员。不仅要感谢他在我课题设计、论证、立项、实施、评审、毕业论文修改方面给予的系统指导及训练，感谢他在做人做事方面给我的启迪和教诲，更感谢他的宽容、理解以及给了我再学习的机会，让我的人生有了新的起点。在我心目中，陈老师是一位治学严谨、对学生要求严格、关爱学生、善于言传身教、富有创新意识、思维活跃、目光长远的学者。他严于律己、宽以待人，具有名师风度。在我们进入新学习环境之初，陈老师就已经有意识地系统指导我们加强文献学习并有计划地组织我们进行生产和科研实践，同时他也十分注意锻炼我们独立地分析问题和解决问题的能力。这使我们的理论知识得到了很好积累，也使我们科研活动结合生产的意识及能力得到了很大锻炼和强化，让我们在今后工作中受益匪浅。在此，我想衷心地说声：陈老师辛苦了!其次，我要感谢给了我课题试验和论文写作方面很多指导的蒋伟明老师。在我课题试验中，他不仅给我提出了许多富有价值的建议，还积极组织、协调各方面的人力、物力资源保障了我试验的顺利开展。同时，他在我试验设计、方案完善、论文修改等方面也做了大量指导工作，付出了许多时间和精力，让我的论文得以顺利完成。我会永远铭记蒋老师对我的循循教诲和无私帮助，一定努力工作，积极回报社会。接下来，非常感谢广西水产研究所的陈秀荔博士和赵永贞博士。他们在我试验开展和论文修改方面，给了我很多指导和帮助，并教会了我许多东西，让我少走了许多弯路。谢谢他们，祝福他们一家人永远温馨幸福!我也很感谢在我课题、工作、学习及生活中给了我许多帮助的杨彦豪大哥。感谢他不时到我的试验场地给我进行的指导，感谢他长期在我生活、学习、工作中所给予的大量支持。祝他天天开心、永远年轻!感谢广西水产研究所的谢达祥场长、彭金霞博士、熊建华博士、李咏梅主任、彭敏、何萍萍和杨春玲大姐、王大鹏和张彬大哥；同学肖群平、辛文伦、曹占旺、吴卫军、谢瑞涛；师弟崔亮、盛小伟、邵朋威、房振峰；朋友兰宗宝、李根荣、黄品文、 几种饵辑．对只纳滨网嚏F亲虾繁殖扫IJ眨的影响邓礼胜等在我试验操作、学习和生活中给予的帮助。祝他们工作顺利、学习进步、生活愉快!同时，本试验得以顺利进行和完成，离不开广西直属公益性科研院所基本科研业务项目资金(2060302GXIF．2009．03)、现代农业产业技术体系建设专项资金(nycytx-46)的资助以及广西水产研究所、广西SPF南美白对虾良种场和海水养殖中试基地等单位提供的便利条件。在此，谨致以由衷的感谢。也衷心感谢在论文评阅和答辩过程中给予指导的各位专家、教授。最后，我要感谢的是早已经给了我太多太多理解、安慰、肯定和支持的父母、姐姐和弟弟。很感激他们在我的求学历程中的巨大付出。日后，我一定会好好报答他们的恩情。本毕业论文凝聚了老师、同学、亲人、朋友的诸多关心和帮助。再次感谢和祝福他们! 广西大掌硕士研究生掌位论文几种饵料对凡纳滨对虾亲虾繁殖性能的影响攻读硕士学位期间发表的学术论文目录[1】陈泳先，陈晓汉，蒋伟明，等．饵料营养对亲虾繁殖性能及幼体质量影响研究进展阴．南方农业学报，2011,42(6)：676．679【2】陈泳先，蒋伟明，杨彦豪，等．几种饵料对南美自对虾亲虾性腺发育的影响阴．南方农业学报，2011,42(8)：987—99047