rap2b在肾透明细胞癌中的表达及其意义

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1、徐州医学院硕士学位论文Rap2B在肾透明细胞癌中的表达及其意义姓名：渠德宝申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：郑骏年2012-04徐州医学院硕士学位论文Rap2B在肾透明细胞癌中的表达及其意义中文摘要目的探讨Rap2B在肾透明细胞癌中的表达及其意义，探索其在肾透明细胞癌发生、发展和转移过程中的机制，以期为肾透明细胞癌提供新的诊断标记物及为生物治疗提供新的作用靶点。方法WesternBlot方法检测Rap2B在肾透明细胞癌细胞与正常肾细胞中的表达：收集附院泌尿外科肾透明细胞癌患者术后标本，WesternBlot方法检测Rap2B在肾透明细胞癌组织与癌旁组织中的表达；把收集到的附院肾透明

2、细胞癌患者标本制成病理组织切片，免疫组化检测Rap2B在肾透明细胞癌与癌旁组织中的表达；芯片免疫组化后检测肾透明细胞癌芯片中Rap2B的表达与病理分期、患者年龄等的相关性。构建Rap2B过表达质粒pcDNA3．Rap2B和Rap2BCAAX基序突变体质粒peDNA3一Rap2B(C180A)，分别用pcDNA3、peDNA3．Rap2B、pcDNA3-Rap2B(C180A)、对照siRNA和Rap2B—siRNA转染786-O细胞，划痕实验和Transwell迁移实验检测786．O细胞划痕愈合和迁移的差异。结果1)肾透明细胞癌细胞中Rap2B在蛋白水平的表达高于肾正常细胞，差异有统计学

3、意义(氏0．05)；2)Rap2B在肾透明细胞癌组织中表达水平明显高于癌旁组织，差异有统计学意义(尸<0．05)；3)免疫组化显示：Rap2B主要定位于癌细胞胞膜上，正常细胞中很少，在肾透明细胞癌组织和芯片中Rap2B表达高于癌旁组织，差异有统计学意义(火0．05)，组织芯片显示Rap2B表达与病理分期、患者年龄等无相关性；4)划痕实验结果显示：与转染pcDNA3对照质粒相比，转染pcDNA3一Rap2B质粒的细胞划痕愈合速度较快，而转染pcDNA3-Rap2B(C180A)突变体质粒的细胞无明显变化；与转染Rap2B．siRNA的细胞相比，转染对照siRNA的细胞划痕愈合速度较快；5)

4、Transwell迁移实验显示：与转染pcDNA3对照质粒相比，转染pcDNA3一Rap2B质粒的细胞迁移数目较徐州医学院硕士学位论丈多，而转染pcDNA3．Rap2B(Cl80A)突变体质粒的细胞无明显变化；与转染Rap2B．siRNA的细胞相比，转染对照siRNA的细胞迁移数目较多。结论肾透明细胞癌中Rap2B表达水平增高，Rap2B促进肾透明细胞癌细胞的迁移。以上结果提示，Rap2B可作为评估肾透明细胞癌生长、转移的一个有价值的标记物，有可能成为肾癌潜在的治疗靶点。关键词Rap2B；肾透明细胞癌；表达；迁移4徐州医学院硕士学位论文Theexpressionandsignifican

5、ceofRap2BinsuprarenalepitheliomaAbstractObjectiveTheobjectiveofthisstudywastoinvestigatetheexpressionandsignificanceofRap2Binhumansuprarenalepithelioma，andtoanalyzethepossiblemolecularbiologicmechanismingrowth，progressandmetastasisofthehumansuprarenalepithelioma．Wealsoaimedatprovidinganovelbio-ma

6、rkerforsuprarenalepitheliomadiagnosisandanewmethodforsuprarenalepitheliomatreatment·MethodsTheexpressionofRap2BproteininhumansuprarenalepitheliomacellsWasdetectedbyWestemBlot．Suprarenalepitheliomaandpara-cancerrenaltissues、)l^er．eobtainedintheAffiliatedhospital．ExpressionofRap2BproteinWaseX钮lined

7、byWesternBlotinsuprarenalepitheliomaandpara-cancerrenaltissues·WealsoinvestigatedtheexpressionofRap2Bbyimmunohistochemicaltechniqueinsuprarenalepitheliomatissuesandsurroundingnormaltissues，whethertherewaSsignmcantcorre