利用铁甲草水煎液的含药血清研究其体外肝细胞损伤的保护作用

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2、论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名经釜重盈论文导师签名耋组日期：纱惮年r月；p日摘要肝脏疾病是影响人类健康最为常见的的疾病之一，各种有害因素导致的肝损伤，其临床表现为：肝坏死，脂肪肝，胆汁淤积，肝纤维化，肝硬化及肝癌等。本文针对常见每种肝损伤的发病机理、常规治疗药物、中医的辨证施治和治疗效果，及在体动物肝损伤模型、离体细胞肝损伤模型的制作方法的实验研究等做一概述；目的：通过体外肝细胞损伤模型，通过铁甲草水煎液的含药血清干预，探讨铁甲草水煎液

3、对肝细胞的保护作用，为铁甲草药物在肝损伤疾病的防治提供了实验依据。方法：l、培养L0。肝细胞，以终浓度为0．6roJnol／L的过氧化氢溶液建立肝细胞损伤模型，细胞分为6组：正常对照组、模型对照组、阳性对照组、低、中、高浓度组，除了正常组外，每组造模1．5小时后终止造模，各组加入相应的血清作用1．5小时后终止干预，取肝细胞的匀浆液酶标仪检测ALT、AST、GSH的含量，紫外分光光度计检测MI)A、GSH—px的含量，取细胞MTT法测细胞的活力，同时进行肝细胞形态学观察；2、培养L0。肝细胞，以终浓度为8mmol／L的四氯化碳溶液建立肝细胞损伤模型

4、，细胞分为6组：正常对照组、模型对照组、阳性对照组、低、中、高剂量组，除了正常组外，每组造模6小时后终止造模，各组加入相应的血清作用1．5小时后终止干预，取肝细胞的匀浆液酶标仪检测ALT、AST、GSH的含量，紫外分光光度计检测MDA、GSH—px的含量，取细胞MTT法测细胞的存活率，同时进行肝细胞形态学观察。结果：MTT法结果显示：高剂量组细胞存活率明显增加，与模型组比较，有显著性差异，低、中剂量组与模型组比较，没有统计意义，高浓度组与阳性对照比较，差异不显著；ALT、AST测定结果显示：给予含药血清干预后，中、高剂量组ALT、AST明显降低，

5、与模型组比较，有显著差异。低剂量组与模型组比较，没有统计意义；MDA测定结果显示，给予含药血清干预后，高剂量组的MDA含量明显降低，与模型组比较，有统计学意义，低、中剂量组与模型组比较，没有统计学意义，高剂量组与阳性对照组比较，差异不显著；6SIt、GSHpx测定结果显示：给予含药血清干预后，高剂量组的GStt、GSHpx的含量明显增加，与模型组比较，有统计学意义，低、中剂量组与模型组比较，无统计学意义，高剂量组与阳性对照组比较，差异不显著。肝细胞形态学观察结果显示：正常组的肝细胞数量较多、表面光滑、透亮度强、细胞膜完整、边缘清晰、轮廓清楚，而模

6、型组肝细胞表面皱褶、细胞膜不完整，透亮度较暗，数量较正常组少，边缘不清晰，轮廓模糊：低、中剂量组细胞表面光滑度欠佳，数量较少，透亮度暗淡，边缘模糊，轮廓不清；高剂量组细胞表面光滑，边缘、轮廓可见、透亮度较模型组亮，数量较正常组少；阳性对照组，细胞表面光滑，边缘、轮廓可见、透亮度较模型组亮，数量较正常组少。提示了高剂量的铁甲草水煎液的含药血清具有改善肝细胞的形态与结构。结论：建立了体外肝细胞模型，确定了铁甲草水煎液的含药血清对体外肝细胞具有一定的保护作用，提高肝细胞的存活率、减少肝细胞释放ALT、AST，增加了胞内GSH、GSHDx的含量，降低MD

7、A的含量，这可能与铁甲草水煎液的含药血清具有清除自由基、抗氧化作用有关，有待深入的进一步研究与探讨。关键词：四氯化碳；过氧化氢；铁甲草；肝细胞：IICassiamimosoidesLinnwaterdecoctionofmedicatedserumoninVitroIiverceIdamageofprotectionSpeciaIty：BasiCDiSCiPIinoofChineseandWesternIntegratiMeMediciReAuthor：YunshunFuTutor：LingLiAbstractLiverdiseaseiSoneo

8、fthemostCommondiseasesaffectinghumanhealth，variousharmfulliverinjury