赤藓糖醇高产菌株的选育及发酵条件的研究

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1、山东农业大学硕士学位论文赤藓糖醇高产菌株的选育及发酵条件的研究姓名：叶娴申请学位级别：硕士专业：农产品加工及贮藏工程指导教师：董海洲20080610关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或

2、部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签导师签日山东农业人学硕士学位论文中文摘要赤藓糖醇是一种食用安全的填充性甜味剂，味类似于蔗糖，具有热量低、稳定性高、甜昧协调、无吸湿性、无致龋齿性、耐受性高等优点，可作为低热量功能性保健食品配料，应用前景十分广泛。本文从产赤藓糖醇菌株的筛选开始，对菌株的选育以及赤藓糖醇发酵工艺条件进行了系统的研究，主要研究内容如下：1．由泰山养蜂场上采集的蜂蜜、花粉、蜂巢里采样、富集培养后进行平板涂布分离，然后分别进行摇瓶

3、初筛及复筛，筛选出7株赤藓糖醇产量高于209／L菌株。其中菌株K．23在含20％葡萄糖，1％酵母膏，0．1％尿素的发酵培养基中培养132h后赤藓糖醇的浓度达46．89／L。2．建立了一种简便、高效的薄层层析法检测发酵液中的赤藓糖醇，即以正丁醇：乙酸：水=4：1：5为展层剂，以高碘酸钠．联苯胺溶液为显色剂，通过标准样品的梯度定量点样，制作出一张标准薄层板，在试验中样品只需将薄层板层析结果与标准板对照，就可以对样品中的赤藓糖醇进行初步定性、定量分析。这样极大方便了选育菌株时高产赤藓糖醇菌株的检出。3．以K．23作为出发菌株，对其进行紫外

4、线和光复活交替诱变处理，得到一支性能稳定的高产赤藓糖醇突变株ERY237，传接十代赤藓糖醇产量保持在70∥L以上，表明该菌株是二支比较理想的、具有开发应用前景的赤藓糖醇发酵生产菌株。4．通过单因素试验和正交试验对菌株ERY237的产赤藓糖醇培养基组分、发酵工艺条件进行了研究，确定了菌株ERY237发酵产赤藓糖醇的最佳培养基(eeL)：葡萄糖300，玉米浆8，CuS04"5H200．5，MnS04-4H205；最佳培养条件：接种量9％，初始pH值6．0，温度32℃，装液量55mL／250mL，转速200r／min，在此条件下培养120

5、h赤藓糖醇产量达91．79m。关键词：赤藓糖醇，菌种选育，发酵BreedingofHigh--ProducingErythritolStrainandOptimizationofFermentationConditionAbstractErythritolisakindofaddingsweetenerwithediblesafetyandflayorlikesucrose．Thereareseveralvirtuesinerythritol，suchaslowcalory，highstability,appropriateswee

6、ttaste，non‘cariogenic，non—hygroscopic．hightolerabilityand、SOon．Ithasgreatpotentialforapplicationinfoodasanidealassistantmaterialforhygienicalfood．Erythritolproducedbyfermentationismorepromisingcomparedtochemicalsynthesismethod．Inthispaper，wecarriedOutaseriesofexperimen

7、ts，includingscreening，strainsultroviolating．andoptimizingfermentationprocess．Themainresultsareasfoilows：1．7strainswerehigherythritol-producerswiththeproductivityhigherthan209／Lwereisolatedfrompollen，honeyandhoneycombcollectedinapiaryinMountainTai．Amongst7erythrit01．pro

8、ducingstrains．StrainK一23produced46．89／Lerythritolafter132handbasedonglucoseinamediumcontaining20％glucose，1％yeastextra