期促进卵泡发育和血管生成作用的研究

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1、温州医学院硕士学位论文论文题目：丹参对冻融小鼠卵巢组织移植早期促进卵泡发育和血管生成作用的研究论文评阅人：答辩委员会主席：答辩委员会成员：论文答辩日期：2010年5月27日温州医学院硕士学位论文目录4IIIiltIIIitlIIIItlIIY1745439缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9结jg：⋯．．．．．．．．．一．．一一一一一．

2、．．⋯一一一一．．．．．．．．．．一⋯一一．一．一．一一．一．一⋯一．．一．一．一14讨i{}⋯一．．．一一．一一．一一一．一．一．一。⋯一．一一．．⋯一．．．．一⋯．．一一．一．一一．一⋯．．．．一．．一．一25，j、结⋯一．．一⋯．．一一．一一一一．．．．⋯一．．．．一．．．一．一一一一⋯．．．一．一．一．．．⋯一⋯一一一一一一29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．一30附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一一35致谢．．．一．一一．一．一．．．．一．一．．．．．⋯一一一一一一．．一一．．．．一．．．．．．．．．．．．．．⋯一．

3、一一一．．一．一36综述卵巢组织冷冻和移植的历时回顾及研究现状⋯⋯．．37综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一43论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45温州医学院硕士学位论文缩略词表墓玄绽星芸塞全益虫塞逄名VEGFVascularEndothelialGrowthFactor血管内皮生长因子FSHFollicle—stimulatingHormone卵泡雌激素LHLuteotrop(h)icHormone促黄体激素vWFAnti．vonWillibrandFactor血管性血友病因子TGF．131TransformingGrow

4、thFactor-131转化生长因子一13FBSFetalBovineSerum胎牛血清DMSODimethylSulphoxide二甲基亚砜PBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲盐水FGFFibroblastGrowthFactor成纤维细胞生长因子TEMTransmissionelectronmicroscopy透射电子镜hCGHumanchorionicgonadotrophin人绒毛膜促性腺激素温州医学院硕士学位论文丹参对冻融小鼠卵巢组织移植早期促进卵泡发育和血管生成作用的研究中文摘要【目的】探讨丹参对冻融小鼠卵巢组织移植早期促

5、进卵泡发育和血管生成作用的研究。【方法】实验一：收集C57BL／6j雌鼠和BALB／c雄鼠杂交后的F1代第一天(d1)小鼠卵巢慢冻速融后移植至8～12周龄的雄鼠肾脏被膜下，移植后小鼠按给药不同分为生理盐水组和低(0．4ml／kg)、中(4ml／kg)、高(40ml／kg)齐U量丹参干预组，分别于移植后第二天(2d)、第七天(7d)和第十四天(14d)回收卵巢移植物。光镜和电镜技术观察卵巢组织冻融前后和移植前后的组织形态学改变、计数卵泡数量、免疫组织化学技术检测细胞凋亡、血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor，VEGF)

6、的表达和计数微血管密度。实验---．收集C57BL／6j雌鼠和BALB／c雄鼠杂交的F1代4周龄小鼠卵巢，慢冻速融后移植至F1代8～12周龄的雄鼠肾脏被膜下，移植后小鼠按给药不同分为丹参组(4ml／kg)和生理盐水组，分别于移植后ld(24h)，2d(48h)和7d回收卵巢移植物，将冻融以及移植后不同时间段的卵巢组织HE染色后行卵泡计数、免疫组织化学分析及RT-PCR法检测血管相关基因VEGF的表达。【结果】实验一：1、小鼠卵巢经冻融后原始卵泡的存活率为88．8％。2、光、电镜观察卵巢组织移植后7d卵泡细胞和颗粒细胞结构欠完整，移植后14d卵泡结构恢复正常。3

7、、移植后14d丹参组各级卵泡数及卵泡存活率多于生理盐水组(12．7％)，尤以高、中剂量丹参组(31．2％、24．2％)差异显著(P<0．05)；移植后VEGF蛋白表达呈上升趋势，至14d仍维持较高水平，尤以高、中剂量丹参组差异显著(尸<0．05)；移植卵巢组织后各时间段细胞凋亡指数逐渐下降，移植后14d高、中剂量丹参组细胞凋亡指数最低(2．53±0．03％、3．25±O．02％)。实验二：l、移植卵巢组织各时间段丹参组的卵巢卵泡计数及卵泡存活率均高于生理盐水2温州医学院硕士学位论文对照组，P<0．05。2、移植小鼠卵巢组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达

8、有上升趋势，第7d达最高峰，两组之间无