富氢盐水对大鼠脊髓损伤保护作用的实验研究

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1、中图分类号R651．2UDC610硕士学位论文学校代码!Q53三密级公开富氢盐水对大鼠脊髓损伤保护作用的实验研究Theexperimentalstudyonprotectiveeffectsofhydrogen—richsalineonspinalcordinjuryinrats作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：孙建锋临床医学外科学湘雅三医院王剑龙副教授论文答辩固期丝[3：查!彳答辩委员会中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰

2、写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：日期：丝年』月么日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：善未垒彩导师签l嗍：粤《严日富氢盐水对大鼠脊髓损伤保护作用的实验研究摘

3、要：目的：探讨蛛网膜下腔局部灌注富氢盐水对脊髓损伤(SCI)的保护作用及其可能的机制。本研究为富氢盐水治疗脊髓损伤提供实验证据，也为富氢盐水今后用于脊髓损伤的药物治疗提供一定的理论依据。方法：取SD大鼠75只(重量200—2509)，采用完全随机法将SD大鼠随机分为三组：A组；B组(SCI后氢水干预组)；C组(SCI后生理盐水对照组)，每组25只。又根据不同观察时间6h、24h、48h、1w、2w把A、B组和C组随机各分为A1、A2、A3、A4、A5；B1、B2、B3、B4、B5和C1、C2、C3、C4、C5组，每小组5只。B、C组采用改良Allen’S撞击法建立脊髓损伤模型并置硬膜内导管。A

4、组打开椎板后不损伤脊髓，行蛛网膜下腔导管置管。各组大鼠术后相应时间点行BBB评分后，取相应脊髓组织行HE染色病理学观察、行降钙素基因相关肽(CGRP)免疫组化染色对平均OD(opticaldensity)值进行统计分析；并通过免疫组化法对含半胱氨酸的门冬氨酸特异水解酶一3(Caspase、3)进行检测，对阳性细胞计数，各组大鼠各时间点处死前行心脏抽血查丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)进行统计学分析。结果：1．运动功能评定(BBB评分法)：A组各组评分均为正常的21分；术后24h、48h、1w、2w，B组在相应时间点的评分高于C组(P<0．05)。2．HE染色：A组细胞结构完整，脊髓组

5、织结构致密，细胞核显染且居中，核仁显染。SCI后C1较B1组炎症反应严重；C2组较B2组炎症反应严重，B3组神经元萎缩且炎性反应较C3组轻；B4组较C4组神经元萎缩轻；B5组较C5组疤痕形成少。3．CGRPOD值：术后24h、48h、1w、2w，B组在相应时间点的0D值高于C组(P<0．05)。4．MDA水平检测：术后24h、48h、1w、2w，C组在相应时间点的MDA水平高于B组(P<0．05)，且B组在相应时间点的MDA水平高于A组(P<0．05)。5．SOD水平检测：术后24h、48h、1w、2w，B组在相应时间点的SOD水平高于C组fP

6、术后24h、48h、1w、2w，C组在相应时间点Caspase．3的阳性细胞数目高于B组(P<0．05)，且B组在相应时间点Caspase一3的阳性细胞数日高于A组(P<0．051。结论：1．富氢水通过减轻脊髓损伤早期氧化应激反应和炎症反应，后期通过增强机体抗氧化能力，进而抑制细胞凋亡，促进肢体运动功能恢复。2．富氢水早期通过减轻ScI神经细胞内CGRP的下降，后期上调CGRP的表达进而保护神经细胞。图2l幅，表7个，参考文献6l篇。关键词：脊髓损伤；富氢盐水；Caspase一3；降钙素基因相关肽；丙二醛；超氧化物歧化酶分类号：R651．2Theexperimentalstudyonprote

7、ctiveeffectsofhydrogen—richsalineOilspinalcordinjuryinratsAbstract：Objectives：ToexploretheprotectiveeffectsoflocalsubarachnoidinfusionwithHydrogenSaline(HS)onspinalcordinjury(SCI)atrats，andanalyzethep