水稻光温敏核不育系对南方水稻黑条矮缩病毒的抗性反应研究

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1、分类号UDCS511学学校代码10593学号1117401006密级公珏彦商犬挚位论文专业名称作物栽培学与耕作学学院名称农学院指导教师周瑞阳(教授)申请学位级别博士论文提交日期2013年6月论文答辩日期2013年5月学位授予日期2013年6月答辩委员会主席唐湘如教授论文评阅人双盲评审论文评阅人双盲评审广西大掌博士掌位论文水稻哭j鼠敏核不育系对南方水稻黑条矮缩痨毒的抗性反应研究水稻光温敏核不育系对南方水稻黑条矮缩病毒的抗性反应研究摘要本研究以19个水稻光温敏核不育系为材料，对南方水稻黑条矮缩病毒(Southernriceblack-streakeddwarfvirus，

2、SRBSDV)的鉴定方法、不育系对SRBSDV的抗性、受SRBSDV侵染后的生理变化、抗性遗传规律、NBS类抗病基因进行研究，得出如下主要结果：1、SRBSDV的鉴定方法及19个水稻不育系对SRBSDV的抗性评价：根据已公布的SRBSDVS10(EU523360)基因序列，设计1对检测SRBSDV的特异引物，利用分子生物学与田间调查相结合的方法，参照广东省生物防治实验站关于南方水稻黑条矮缩病发生规律与防治技术调查研究方案中的标准进行病株分级，对生产上常用的19个水稻不育系进行株高调查、病级划分，统计计算其发病率、病情指数、相对发病率。以病情指数类平均法(UPGMA)聚

3、类分析，聚类结果将19个不育系划分为4个抗性等级：(1)高抗：164S；(2)中抗：福3s、蜀光1268S、长广占63S；(3)中感：马S、95S、6201S：(4)高感：华莫m207S、华莫103S、中华38S、安S、FSA、6303S、25S、116S、华师wy-2S、安徽195S、培矮64S、春S。尚未发现免疫的材料。2、SRBSDV侵染水稻的生理生化变化：(1)SRBSDV感染的再生稻根系形态和根系活力变化以经鉴定为高抗、中抗、高感的水稻光温敏核不育系各1个为材料，每种不育系选取发病等级为0级、1级、2级、3级的材料，采取水培的方法进行再生繁殖，研究SRBSD

4、V感染对不育系再生稻根系生长的形态变化和根系活力变化。结果表明，在没有SRBSDV侵染(0级)时，高抗和中抗不育系的根长分别是感病不育系的1．53和1．43倍，根表面积分别是感病不育系的1，66和1．27倍，根体积分别是1．78倍和1．13倍，根系活力分别是1．45倍和2．27倍，但是三者的根尖数没有显著差异。高抗与高感不育系的上述指标之间差异显著，高抗和中抗不育系差异不显著。受到SRBSDV侵染时，不育系内不同发病等级间随着发病程度的增高，各指标呈现明显下降趋势，除了高抗不育系的根尖数，其余各基因型内各指标均随着发病等级的增加而表现出显著差异。SRBSDV感染对根系

5、的影响主要表现为根系的粗细不同。水稻光温敏核不育系对南方水稻黑条矮缩病毒的抗性反应研究(2)水稻光温敏不育系对SRBSDV的抗性与内源激素的关系分析利用人工接种SRBSDV和采用高效液相色谱技术(Hii曲PerformanceLiquidChromatography，HPLC){贝g定内源激素的研究方法，对SRBSDV胁迫下高抗SRBSDV164S和高感SRBSDV培矮64S两个不同抗性不育系水稻幼苗植株内源激素赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、水杨酸(SA)和脱落酸(ABA)的动态变化进行了研究。结果表明：1)人工接种SRBSDV后，促进生长明类的激素GA3、IA

6、A在培矮64S处理植株中含量平均值显著低于其对照植株，在第5和第6天感病症状开始出现时达到最低值；在164S处理植株中IAA含量平均值显著低于其对照植株，GA3含量平均值也低于对照植株，但未达到5％显著水平。2)抗御信号分子SA在处理植株中含量平均值显著高于对照植株，在感病症状开始出现时，其含量都达到最高值，但培矮64S在最高值后开始较快下降，而164S的SA含量则保持显著高于对照植株的水平。3)与衰老、死亡有关的内源激素ABA在处理植株中含量高于对照植株，培矮64S的ABA含量显著高于164S，与其对照植株差异显著；164S与其对照差异不显著。4)SRBSDV胁迫改

7、变了植株体内IAA／ABA和GA3／ABA的平衡。(3)SRBSDV实时荧光定量PCR检测方法的建立及其各病级的病毒含量针对SRBSDVCP基因设计了1对特异性引物，以水稻UBC为内参基因，建立SRBSDVCP两步法realtimePCR绝对定量检测方法。对感SRBSDV的0级、1级、2级、3级水稻植株叶片SRBSDVCP基因的拷贝数进行绝对定量，结果显示，通过内参UBC校正后，病级之间SRBSDVCP基因拷贝数差异显著。3、不育系对SRBSDV的抗性遗传分析：以经鉴定为中抗和高抗SRBSDV的水稻光温敏核不育系及感病对照TNl为材料，应用经典遗传学