检测禽白血病病毒(alv)的间接免疫荧光试验建立及我国蛋鸡群中alv感染的分子流行病学调查

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1、检测禽白血病病毒(ALV)的间接免疫荧光试验建立及我国蛋鸡群中ALV感染的分子流行病学调查EstablishmentofanIndirectImmunofluorescenceAssayforAvianLeukosisVirus(ALV)DetectionandMolecularEpidemiologicalInvestigationofALVInfectioninLayerFlocksinChina研究生：秦乐学科：预防兽医学导师：吴艳涛教授扬州大学兽医学院2013年6月秦乐：检测ALv的IFA建立及我国蚩鸡群中ALV感染的分予流行病学调查检测禽白血病病

2、毒(ALV)的间接免疫荧光试验建立及我国蛋鸡群中ALV感染的分子流行病学调查研究生：秦乐I掣IIIIl2II14IIIllIl9IIi2III掣II炒导师：吴艳涛教授摘要禽白血病是由禽白血病病毒(avianleukosisvires，ALV)引起的禽类多种组织器官发生肿瘤的一类传染性疾病，除造成禽类致瘤性死亡外，其最大的危害表现为免疫抑制、生产性能下降等亚临床症状。ALV可在鸡群中垂直传播，亦能水平传播，种群净化是目前最有效的禽白血病防治措施。近年来，我国蛋鸡群中除感染致病性较强的J亚群ALV(ALv-J)毒株外，A亚群ALV(创ⅣA)毒株和B亚群ALV(

3、ALV-B)毒株的感染情况也比较严重。因此，有必要建立检测ALV的方法，以及对我国蛋鸡群中ALV的感染开展分子流行病学调查。本研究从本室保存的5株针对ALV群特异抗原p27的单克隆抗体中，筛选出一株特异性强、敏感性高的单克隆抗体4C7，继而以4C7单抗建立了检测ALVp27抗原的间接免疫荧光试验(IFA)方法。结果显示，该方法能有效检出A、B、J亚群ALV感染，且与禽类其它致瘤性病毒(I也V、MDV)无交叉反应；以10TCID50的ALV感染DFl细胞后24h即可检出，ALV感染DFl细胞后5d的最小病毒检出量为1TCID50，表明所建立的IFA方法特异性

4、强、敏感性高。本研究从我国蛋鸡群中分离到ALV15株，分离株gp85基因核苷酸序列同源性比对显示，其中3株为ALV-A、4株为ALV-B、8株为ALV-J。分离株囊膜糖蛋白gp85基因的序列分析发现，其中ALv-A、ALV-B的遗传进化较为稳定，与原型株具有很高的同源性，但ALv-J的变异却较大。AL、u分离株与原型株HPRS一103以及近年来的蛋鸡分离株亲缘关系均较远，但与美国早期的肉鸡分离株ADOL．Hcl、ADOL．7501，以及我国1999年～2003年间肉鸡中的分离株的亲缘关系却很近；ALv-J分离株WX—J1216和JS—J1210与我国201

5、1年的肉鸡分离株SCAUI1．H位于同一分支，表明近年来出现于我国蛋鸡群中的ALV-J可能来源于肉鸡。4株ALV-J分离株(SQ—J1211、CZ—J1212、WX—J1214、WX—J1215)与来自扬州人学硕士学位论文我国地方品系鸡中的川ⅣJ分离株HR332有很高的亲缘关系，说明ALv-J的感染范围扩大、对地方品系鸡也造成了很大的危害。关键词：禽白血病病毒；间接免疫荧光试验；分子流行病学调查；蛋鸡群2秦乐：检测ALV的IFA建立及我国蛋鸡群中ALv感染的分子流行病学调查三Establishmentof矩IndirectImmunofluorescenc

6、eAssayforAvianLeukosisVirus(ALV)DetectionandMolecularEpidemiologicalInvestigationofALVInfectioninLayerFlocksinChinaM．S．Candidate：LeQinAdvisors：Prof．Yantao渐zAbstractAvianleukosisISavarietyoftissuesandorganstumordiseasecausedbyavianleukosisvirus(ALV)．Besidestumorigenicdeath，thegreat

7、estharmofALVissubclinicalsymptoms，includingimmunesuppression，productionperformancedecreaseandSOon．ALVhasacapacityofverticalandhorizontaltransmission；thepopulationcleaningisthemosteffectivewaytopreventitbynow．Inrecentyears，theinfectionofsubgroupJALV(ALV—J)whichhashighpathogenicityi

8、nChineselayerflocksisserious，subg