甘青乌头生物碱的提取、分离和药理活性研究

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1、:乂一密级:论文编号:;卜..、.:...jT'-f’.......厂，:*^•.■■,.国农亚科学院；>-：学位论文':寒:甘青乌头生物碱的提取、分离和药理活性研究■.-••'llExtraction,SeparationandPharmacologicalActivitiesofAlkaloidsinAconitumTanguticum-；>%：-m博士研究生：吴国泰.指导教师:梁剑平研究员j'.'r一..、y……V'—:y:设起；;申请学位类别：农学博士、/h；：r1:v?专业:兽药学路..IK爲)乂二研究方向：天然药物化学培养单位：兰州畜牧与兽药研究所、1%V>.''、、■}、•.

2、W......-齡繼0...If,〔■s-■屬年5月rV-X'J■.m赛'、(sf、.呀、誠.必嚴si：m；/.;V''.'二：1杰'l独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证15而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文

3、被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表密级:论文编号:中国农业科学院学位论文甘青乌头生物碱的提取、分离和药理活性研究Extraction,SeparationandPharmacologicalActivitiesofAlkaloidsinAconitumTanguticum博士研究生：吴国泰指导教师：梁剑平研究员申请学位类别：农学博士专业：兽药学研究方向：天然药物化学培养单位：兰州畜牧与兽药研究所2015年5月Secrecy:No.

4、ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationExtraction,SeparationandPharmacologicalActivitiesofAlkaloidsinAconitumTanguticumPh.D.Candidate：WuGuotaiSupervisor：Prof.LiangJianpingMajor：AnimalPharmacySpecialty:NaturalMedicinalChemistryMay2015摘要甘青乌头为毛茛科乌头属植物唐古特乌头Aconitumtanguticum(Maxim.)Stapf的干燥全草，

5、为高山珍稀药材，性凉味苦，具有清热解毒，生肌燥湿的功效，其主要药效成分为生物碱、苷类、挥发油等，其中生物碱具有广泛的药理活性。采用90%乙醇对甘青乌头进行提取，得率为17.65%，并用不同极性有机溶剂进行萃取分离，用药效学技术方法观察测定甘青乌头醇提物（EE）、石油醚萃取部分（PE）、乙酸乙酯萃取部分（EA）、氯仿萃取部分（CH）、正丁醇萃取部分（BU）和水溶性部分（WA）对非特异性急、慢性炎症反应的影响，测定EE、PE、EA、CH、BU和WA对冰醋酸致小鼠扭体反应和热刺激痛阈的影响，比较分析其抗炎镇痛作用；研究发现甘青乌头具有一定的抗炎镇痛作用，醇提物具有较强的抗炎镇痛活性，初步筛选发现氯

6、仿萃取部位是抗炎镇痛的主要药效物质群，其他部位亦具有一定的抗炎镇痛活性，相对较弱。根据甘青乌头抗炎镇痛作用的药效物质主要集中在醇提物的氯仿萃取部位，并且发现含有生物碱，于是对甘青乌头的总生物碱（TAA）进行提取，并对TAA进行定性定量分析和质量评价结果显示含生物碱（以乌头碱计）为0.3323%，建立了比较稳定的TAA含量测定方法，并采用Box-BehnkenDesign设计实验方案，以总生物碱和酯型生物碱含量为指标，在单因素试验基础上，优选TAA的提取工艺，获得最佳工艺条件为提取温度85℃，提取时间1.5h，乙醇质量分数90%，液料比15:1，该工艺条件下TAA和酯型生物碱含量分别为0.53

7、60g/100g提取物和0.5030μg/mg总碱，且重现性好，可作为TAA提取的新工艺。选择两种给药途径研究TAA对小鼠灌胃和腹腔注射时的急性毒性，并测定LD50，初步评价其安全性，研究发现TAA灌胃给药的LD50为0.7456g/kg，TAA腹腔注射给药的LD50为0.3358g/kg，研究证实TAA经灌胃和腹腔注射对小鼠均具有一定的急性毒性，初步判断TAA急性中毒的靶器官为植物神经系统和运动神经系统，中