芍药苷对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及生物学行为的影响

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1、暨南大学硕士学位论文芍药苷对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及生物学行为的影响Effectsofpaeoniflorinonproliferationandbiologicalbehaviorofhypertrophicscarfibroblastsinvitro作者姓名：赵元元指导教师姓名及学位、职称：张志博士主任医师学科、专业名称：外科学（烧伤整形）学位类型：专业学位论文提交日期：2015-05论文答辩日期：2015-06答辩委员会主席：王甲汉教授论文评阅人：学位授予单位和日期：暨南大学2015-07独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中

2、特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签

3、名：签字日期：年月日签字日期：年月日学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：通讯地址：邮编：暨南大学硕士学位论文芍药苷对增生性瘢痕成纤维细胞中增殖及生物学行为的影响中文摘要研究背景增生性瘢痕是深度烧伤常见的并发症，病理表现为大量的成纤维细胞增殖及细胞外基质(ECM)的异常沉积。转化生长因子β1（Transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1）是一种具有多种功能的细胞因子，通过细胞内信号转导发挥作用,在增生性瘢痕的形成过程中扮演重要角色：它一方面能调节成纤维细胞生长、分化、迁移凋亡；另一方面促进成纤维细胞合成、分泌胶原蛋白，抑制基质金属蛋白酶（MMPs）合成，减少胶原纤

4、维降解。芍药苷（Paeoniflorin）是传统中药芍药（Paeonialactiflorapall）干燥根中的提取物，也是芍药的主要单体活性成分。研究发现，芍药苷在肝、肾、肺中表现出抗纤维化的作用，其主要机制为减少组织内TGF-β1的含量，抑制细胞内TGF-β1的自分泌，使胶原等细胞外基质的合成明显减少。增生性瘢痕是皮肤创伤后发生在真皮的纤维增生性疾病，而芍药苷对增生性瘢痕的形成的影响，尚未见报道。目的探讨芍药苷对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及其生物学行为的影响。方法收集增生性瘢痕组织及来自同一个体的正常皮肤组织，采用组织块法分离培养增生性瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞，分别加入不同浓

5、度（0，200，400，800µM）的芍药苷：（1）培养24h、48h、72h，MTS法检测细胞增殖速度；（2）培养48h，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡；（3）培养48h，收集细胞培养上清液，酶联免疫吸附分析方法（ELISA）检测TGF-β1、I型胶原含量；（4）培养48h，蛋白质印迹法（WesternBlot）检测细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果（1）浓度为400µM、800µM的芍药苷能明显抑制各时相点（24h、48h、72h）增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞的增殖。（2）200µM、400µM、800µM的芍药苷能明显增加两种成纤维细胞处于G2期的百分比，各组中未

6、检测到细胞凋亡。（3）400µM、800µM的芍药苷能明显减少增生性瘢痕成纤维细胞培养上清液中TGF-β1含量，但不影响正常皮肤成纤维细胞培养上清液中TGF-β1含量。（4）200µM、400µM、800µM的芍药苷能明显减少增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞上清液中I型胶原含量。（5）200µM、400µM、800µM的芍药苷能明显减少增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞中α-SMA蛋白的表达。结论一定浓度的芍药苷可抑制增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞的增殖，减少I型胶原的分泌及α-SMA的表达；芍药苷可以减少增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1的自分I暨南大学硕士学位论文芍药苷对增生性瘢痕成纤维细胞

7、中增殖及生物学行为的影响泌，但是对正常皮肤成纤维细胞TGF-β1的自分泌却没有明显的影响，提示芍药苷可能对于增生性瘢痕的形成有抑制作用。关键词增生性瘢痕；转化生长因子β1；芍药苷；细胞增殖II暨南大学硕士学位论文芍药苷对增生性瘢痕成纤维细胞中增殖及生物学行为的影响Effectsofpaeoniflorinonproliferationandbiologicalbehaviorofhypertrophicscarfibroblasts