枸杞多糖对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用

《枸杞多糖对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R77单位代码：10752密级：公开学号：201200225宁夏医科大学硕士研究生学位论文枸杞多糖对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用EffectsoflyciumbarbarumpolysaccharidesonOxidativestress-inducedRetinalganglioncellsapoptosis学位申请人：李贞指导教师：马雅玲教授申请学位门类级别：医学专业名称：眼科学研究方向：青光眼所在学院：临床医学院论文完成日期：二〇一五年四月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’s

2、DegreeEffectsoflyciumbarbarumpolysaccharidesonOxidativestress-inducedRetinalganglioncellsapoptosisStudent’sName:LiZhenSupervisor：MaYalingSubjectCategory:MedicineMajor:OphthalmologySpecialty:GlaucomaCollege:NingXiaMedicalUniverisityCompletionDate:April2015宁夏医科大学硕士学位论文中文摘要枸杞多糖对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用摘要目

3、的观察枸杞多糖(lyciumbarbarumpolysaccharides，LBP)对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用，并探讨其可能的机制。为青光眼视神经的保护提供新的思路。方法体外培养大鼠视网膜神经节细胞株RGC-5，应用不同浓度（50、-1100、200、400μmol·L）H2O2诱导RGC-5氧化应激损伤，终浓度为200-1μmol·LH2O2作用24h可导致RGC-5细胞活性降低为49.68%，本研究选-1用此浓度H2O2建立RGC-5氧化应激损伤模型。不同浓度(10mg·L，20mg·L-1-1，40mg·L)LBP对H2O2诱导损伤的RGC-5干预24h，通过四甲基偶氮

4、唑盐-1(MTT)比色法检测细胞存活率，本实验选用40mg·LLBP进行后续的研究。实验分为四组，即正常对照组、LBP组、H2O2组和H2O2+LBP组，通过DAPI染色、AnnexinV-FITC/PI流式细胞术观察LBP对H2O2诱导RGC-5细胞凋亡的形态学变化以及凋亡率的影响。同时应用实时荧光定量PCR和westernblot检测大鼠RGC-5细胞c-Myc、caspase3、Bcl-2和Bax的动态表达。结果H2O2可显著降低RGC-5细胞的存活率，不同浓度H2O2组细胞存活率分别为91.33±10.0、87.67±8.78、49.68±7.48、26.50±4.89；H2O2对

5、RGC-5细胞的生长抑制率在一定的范围内随着浓度升高逐渐增加，差异-1具有统计学意义（P＜0.05）。MTT结果显示，不同浓度(10mg·L，20mg·L-1-1，40mg·L)LBP对H2O2诱导损伤的RGC-5干预后细胞存活率分别为52.53±10.10、62.88±10.20、68.62±5.39，与H2O2组的49.68±7.48相比细胞存活率明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。DAPI染色结果显示：I宁夏医科大学硕士学位论文中文摘要H2O2处理后RGC-5细胞可见染色质凝聚，边缘化，呈现出显著细胞凋亡的-1形态学变化；40mg·LLBP进行干预后可改善H2O2所致的细胞凋

6、亡的形态学变化。Annexin-V/PI双染流式细胞术检测结果表明：正常对照组、LBP组、H2O2组、H2O2+LBP组细胞凋亡率分别为4.90%、4.25%、32.35%和24.21%。正常对照组、H2O2组、H2O2+LBP组组间比较具有统计学差异(P＜0.05)。实时荧光定量PCR以及WesternBlot结果显示：与正常对照组比较，H2O2组Caspase-3、c-Myc、BaxmRNA和蛋白表达水平明显上调，而Bcl-2mRNA和蛋白水平则明显下调，差异具有统计学意义(P<0.05)；与H2O2组比较，H2O2+LBP组可明显抑制Caspase-3、c-Myc、BaxmRNA和蛋

7、白的表达，增强Bcl-2mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论1.枸杞多糖对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞氧化应激损伤具有保护作用。2.枸杞多糖对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用可能与抑制c-Myc、Caspase-3和Bax的表达，增强Bcl-2表达，从而发挥抗凋亡作用有关。关键词枸杞多糖，视网膜神经节细胞，氧化应激，细胞凋亡，神经保护II宁夏医科大学硕士学位论文英文摘要Effectsoflyciumbarb