野生和养殖对虾ihhnv和wssv共感染调查及其对凡纳滨对虾的影响研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M120150333上海海洋大学硕士学位论文野生和养殖对虾IHHNV和WSSV共题目：感染调查及其对凡纳滨对虾的影响研究Investigationoftheco-infectionofIHHNVandWSSVinwildand英文题目：culturedshrimpandItseffectsonPenaeusvannamei专业：渔业研究方向：水产动物病害姓名：胡文娟指导教师：房文红（研究员）二O一五年五月三十日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：

2、我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论

3、文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注研究员主席教授委员研究员委员研究员委员研究员委员研究员委员秘书答辩地点答辩日期上海海洋大学硕士学位论文野生和养殖对虾IHHNV和WSSV共感染调查及其对凡纳滨对虾的影响研究摘要为了解IHHNV和WSSV共感染在野生和养殖

4、对虾中的流行情况，本研究在2013年5月～2014年8月东海区流行病学调查中，对东海区江浙沪海域采集的野生对虾进行了WSSV和IHHNV的检测，并于2014年5～9月对部分养殖凡纳滨对虾(Penaeusvannamei)进行了这两种病毒的跟踪检测。检测结果显示江浙沪海域野生对虾中WSSV和IHHNV的平均检出率分别为21.38%和19.20%，共感染率约为6.88%；相比之下养殖凡纳滨对虾WSSV和IHHNV的平均检出率均较高，分别为42.6%和38.5%，而且IHHNV和WSSV的共感染率达20.5%。分析

5、显示，IHHNV和WSSV的共感染率与WSSV感染率呈正相关。调查过程中本研究首次在野生长毛对虾（P.penicillatus）中检测到IHHNV，并将此分离毒株命名为PPD1301。通过重叠PCR，T/A克隆等方法，本研究获得了PPD1301的全部cDNA序列。序列相似性比较结果显示，PPD1301全cDNA序列与分离自亚洲和美洲的IHHNV毒株有很高的相似性，高达99.31%，但是与分离自马达加斯的type3A型和坦桑尼亚type3B型IHHNV毒株相似性较低，分别为86.12%和91.95%；同源分析结

6、果表明，PPD1301与分离自美洲和亚洲尤其是分离自我国养殖对虾的IHHNV毒株同源性很高。近年来IHHNV和WSSV共感染的报道逐渐增多，虽然有报道指出对虾体内IHHNV对WSSV的增殖有一定的抵制作用，但是IHHNV和WSSV共感染对对虾的组织损伤及免疫反应的影响还未见报道，本研究以凡纳滨对虾为受试动物，通过感染IHHNV（PPD1301）和WSSV（分离自发病养殖对虾），探究了这两种病毒共感染对凡纳滨对虾的致病性和免疫相关酶—超氧化物歧化酶和酸性磷酸酶活性的影响。累计死亡率分析显示，IHHNV和WSSV

7、共感染组和WSSV单感染组的累计死亡率都随着时间的延长而升高，而且WSSV感染组的累计死亡率始终略高于IHHNV和WSSV共感染组，WSSV感染144h后，WSSV单感染组的死亡率为（83.3%±6.8%）约是IHHNV和WSSV共感染组（62.5%±3.4%）的1.3倍；病上海海洋大学硕士学位论文理分析表明，两组濒死对虾鳃丝细胞的病变都很严重，但是病变程度没有显著差异；免疫相关酶活性分析表明，IHHNV和WSSV共感染可以更高、更快地激活机体的免疫应答，但是，随着感染时间的延长，IHHNV和WSSV共感染表

8、现出比WSSV单感染更长时间的免疫抑制。研究表明，虽然IHHNV和WSSV共感染可在一定时间范围和一定程度内降低对虾累计死亡率，但是共感染可造成病毒致病性的叠加，从而导致宿主免疫保护在更长时间内处于较低水平，由此可以推测IHHNV和WSSV共感染导致的经济损失比单病毒感染更大。综上所述，东海区江浙沪海域野生对虾存在IHHNV和WSSV单感染和共感染现象，共感染率较低为6.88%，在野生长毛对虾中首次