多种谷物豆组合膳食纤维的特性及其对细胞糖代谢的作用

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1、分类号学号Ｍ１２０８３３ＵＤＣ密级＾竣叫义葦ＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕：ｔ学位论文，（学术型）南．Ｖ，多种谷物豆组合膳食纤维的特性及；争／；？？？－＜＇其对细胞糖化谢的作用＇‘，－叶变良指导教师姓名：路新国（教授）．扬州大学．江茨扬州．２２５００９埋成凯（教挽）．东南大学．江苏南京．２１００００申请学位级别：医学硕去学科专业名称：营养与食品卫生学论文提交日期：２０１５年０６巧论文答辩日期：２０１Ｓ年０５月２６

2、曰学位授予单位：扬州大学学位授予日期：２０１５年０６巧３０曰答辩委员会主席：化丽莲（教娩）■淮阴师范举化．．？．＿＿＇＿户？■；２（Ｕ５年０６月户；Ｖ爲心一．片叮＾：：：＾—Ｊ－ｒ．？？？．＊＇？？？－？．？＊一．．．；？＂？－一、－一．＾－—＇一■？片户，－．．＇乂诗；＇＇Ｖ乂古＇心、－．、＇．；‘，？＾ｒ．－Ｖ－叶变良：多种谷物豆组合膳食纤维的特性及其对细胞糖代谢的作用摘要目的：（１）

3、分别提取多种谷物豆姐合（简称谷豆组合）与全小麦（简称小麦）中的膳食纤维和类黄丽，掌握其含量、理化和体外抗氧化特性的差异；２－－（）熟悉谷豆组合与小麦中膳食纤维和类黄丽对Ｃａｃｏ２细胞模型和酶抑制剂模型＋＋－－上ａ－葡萄糖昔酶活性、对肠葡萄糖转运起关键作用的ＮａＫＡＴＰ酶活性、对肠葡萄糖转－葡萄糖昔酶及厥葡萄糖转运载体ＳＧＬＴ２运、葡萄糖生成中ａ１、ＧＬＵＴ的基因和蛋白的调控水平的影响；（３）了解谷豆组合与小麦中膳食纤维和类黄丽对膜岛素诱导的ＨｅｐＧ２细胞膜岛素抵抗模型的影响，来源不同的膳食纤维Ｈｅ

4、Ｇ２、类黄厕对ｐ细胞族岛素抵抗的改善作用及差ｅ（ＨＫ）异，对膜岛素抵抗ＨｐＧ２细胞模型肝糖原合成、己糖激酶活力、丙丽酸激酶（ＰＫ）活力的改善作用，Ｗ及对族岛素抵抗ＨｅｐＧ２细胞糖代谢过程中ＡＭＰＫｃｕＡＫＴ蛋白稱酸－化水平、ＩＲＳ１蛋白表达的调控作用。方法：－（０用酶化学法提取谷豆组合与小麦中膳食纤维，按国标法测定其含量，用浸提回流＾法提取谷豆组合与小麦中类黄丽，用可见光分光光度法，１＾芦了标准品为对照，测定其含量，；按国标法测定谷豆组合与小麦中膳食纤维膨胀率、持水力、葡萄糖透析延返指数并通过

5、ＤＰＰＨ自由基清除率和总抗氧化能力Ｔ－ＡＯＣ法测定其体外抗氧化能力；（）Ｃ－２－－（２）用葡萄糖测定试剂盒测定并计算各姐对ａｃｏ细胞模型和酶抑制剂模型上ａ葡＋＋ＥＬａ－Ｋ－ＡＴＰ酶萄糖巧酶活性的抑制作用，同时用ＩＳＡ法测得其对Ｎ活性的影响，用葡萄Ｒ－糖测定试剂盒测定并计算其对葡萄糖转运的抑制作用ｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ，最后运用法测定－－ＳＧＬＴ１ＬＵＴ２ｍＲＮＡ达ｓｔｅｒｎｏｔｎＩ、ＳＧＬＴ１ＬＵＴ２ＳＩ、、Ｇ的表，运用Ｗｅｂｌｉｇ法测定Ｓ、Ｇ蛋白水平的表达对其机制进行探讨；（３）用族岛素诱导

6、ＨｅｐＧ２细胞建立膀岛素抵抗模型，通过葡萄糖消耗量的测定，确定建立体外膀岛素抵抗模型的最佳时间和最佳浓度及其稳定性的检测；（４）用葡萄糖测定试剂盒测得并计算各组在膜岛素抵抗ＨｅｐＧ２细胞葡萄糖消耗的含量．－Ｇ２细、Ｗ及用ＭＴＴＴ法测千预物对ＩＲＨｅｐ胞活性的影响，用总蛋白定量试剂盒肝糖元、丙丽酸激酶（ＰＫ）、己糖激酶（ＨＫ）分别测定干预物对膜岛素抵抗ＨｅｐＧ２细胞肝糖元Ｗｔｔｉｎ合成、ＰＫ活力、ＨＫ活力的影响，最后运用ｅｓｅｒｎｂｌｏｇ法测定对族岛素抵抗ＨｅｐＧ２扬州大学硕±学位论文也ＡＭＰＫ

7、ＡＫＴ蛋白磯酸化水平民Ｓ－细胞糖代谢过種中ｃｕ及Ｉ１蛋白水平的影响其机制进行探讨。结果：（１）谷豆组合与小麦中膳食纤维和类黄丽的理化和抗氧化特性检测结果表明，谷豆组合的膨胀为、持水力，葡萄糖透析延迟能力，体外抗氧化能力巧优于小麦；２－（）谷豆组合与小麦中膳食纤维和类黄丽对ａ葡萄糖巧酶抑制作用在６０ｍｉｎ达到最大抑１〇〇１／－１１止〔２制作用，且浓度均为＾８时，在３〇〇细胞模型上，抑制率从大到小为谷豆组合膳食纤维－、小麦膳食纤维、谷豆组合类黄醜、小麦类黄厕：在酶抑制剂模型上，抑制率从大到小为谷

8、豆组合膳食纤维、小麦膳食纤维、谷豆沮合类黄丽、小麦类黄丽；四种干预物均不＋＋Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶活性影响；在３０、６０、９０、１２０ｍｉｎ四个时间点，对葡萄糖转运的抑制最佳浓度为１００帖／ｍＬ，谷豆组合膳食纤维的抑制作用优于其它Ｈ组；谷豆组合膳食纤维、小麦膳食纤维