高危型HPV检测在提高宫颈癌前病变及宫颈癌筛查阳性率的研究

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1、中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意．申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任．论文作者签名：避日期：出煎!√吵中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论

2、文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阗。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：连高危型HPV检测在提高宫颈癌前病变及宫颈癌筛查阳性率的研究实验目的宫颈癌的发病率居女性恶性肿瘤的第二位，在世界范围内统计，每年大约有50万左右的富颈癌新发病例，占所有癌症新发病例的5

3、％，在人乳头瘤病毒(HPV)疫苗尚未在人群中应用之前，筛查仍然是预防和控制宫颈癌的主要手段。细胞学筛查为降低富颈癌的发病率和死亡率做出了极大的贡献，但宫颈癌的病因学研究显示，高危型人乳头瘸病毒感染与宫颈癌前病变——宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌的发生有密切的因果关系。HPV感染为宫颈癌前病变和浸润性宫颈癌发生的必要生物学条件，且其检出率随宫颈病变程度加重呈趋势性增高，由此推断根据高危型HPV感染状况可预测受检者的发病风险度。随着HPV检测方法的不断改进，HPV检测已成为富颈癌筛查的重要组成部分。本研究拟在探讨高危型HPV感染在正常

4、宫颈、良性病变、CIN及宫颈癌中的表达，并与薄层液基细胞学检查联合筛查，评价高危型HPV检测在提高宫颈癌前病变及富颈癌筛查阳性率上的意义。实验方法1．研究对象：以2004年1月-2005年5月在辽宁省肿瘤医院妇科门诊就诊的宫颈病变患者为研究对象，以阴道镜下活检病理为诊断标准，共计357例。2．用杂交捕获的方法检测HPVDNA：采用Digene公司提供的杂交捕获Ⅱ代(HC—lI)HPVDNA检测系统进行检测，试剂采用Digene公司提供的高危型I-IPVDNA试剂盒，检测探针包括13种离危型HPV亚型，即16、18、3l、33、35、39

5、、45、51、52、56、58、59、68型。主要步骤包括：(1)裂解；(2)·1．杂交；(3)捕获；(4)反应；(5)冲洗；(6)收集信号；(7)结果判定：HPVDNA含量超过1ps／ml即RLU／CO比值大于1为阳性。3．薄层液基细胞学检测方法：专用采样器采集宫颈脱落细胞，将标本保存盛有细胞保存液的小瓶中，标本经系统处理后制成薄层涂片，95％酒精固定，巴氏染色，请有经验的病理医生阅片，依据TBS细胞分类法做出判断，结果判定：结果是ASCUS以上者为阳性。4．阴道镜下病理检查：对阴道镜下有白色病变、镶嵌、腺体开口、异型血管等可疑病变部

6、位进行定点活检，对镜下正常者行常规移行带区4点活检，活检组织送病理。5．统计学方法：实验数据中各检出率的差异分析采用x2检验，显著性差异界限为a=0。05，实验数据采用SPSSll．5统计软件进行统计学分析。实验结果1。高危型HPVDNA在CINI、CINII、CINnl及宫颈癌组的检出率分别为49．1％、57．9％、92．5％和98．3％，与对照组比较有统计学意义(P<0．05)，并呈现上升趋势，说明高危型HPV感染与CIN及宫颈癌的发生发展密切相关。2．高危型HPVDNA检测筛查CINIII以上病变(CINⅢ+病变)灵敏度为96．o

7、％，特异度为59．3％，阳性预测值为48．o％，阴性预测值为97．5％，说明高危型HPV筛查在CINⅢ+病变中有较高的灵敏度和阴性预测值。3．高危型HPV和细胞学联合检查在CINⅢ+病变筛查中的灵敏度为97．7％，特异度为38．7％，阳性预测值为39．8％，阴性预测值为97．6％，结果提示联合筛查有更高的灵敏度和阴性预测值，能够显著提高CINⅢ+病变诊断的阳性率，尽可能的减少漏诊。4．CINlll+病变在<30岁组和I>30岁组的检出率分别为13．6％和52．2％，经统计学检验两组的检出率有显著性差异(X2=10．2，P<0．01)。结

8、论1．高危型HPV感染率随着宫颈病变程度的加重而逐渐升高，其差异有显著性。·2·2．高危型HPVDNA检测对诊断CINⅢ+病变有较高的灵敏度及阴性预测值。3．高危型HPV与细胞学的联合检查可以提高宫颈癌前病