黄芪多糖对牙龈成纤维细胞在创伤修复中生物学行为的影响

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1、分类号：R783.1单位代码：10183研究生学号：2015764032密级：公开黄芪多糖对牙龈成纤维吉林大学细胞在硕士学位论文创伤修（专业学位）复中黄芪多糖对牙龈成纤维细胞在创伤修复中生物学行为的影响生物学EffectsofAstragalusPolysaccharidesonBiologicalBehaviorof行为HumanGingivalFibroblastsintheHealingProcessofWound的影响作者姓名：邹净亭专业：口腔医学邹净研究方向：口腔种植学亭指导教师：周延民教授培养单位：吉林大学口腔医学院吉林大学201

2、8年4月黄芪多糖对牙龈成纤维细胞在创伤修复中生物学行为的影响EffectsofAstragalusPolysaccharidesonBiologicalBehaviorofHumanGingivalFibroblastsintheHealingProcessofWound作者姓名：邹净亭专业名称：口腔医学指导教师：周延民教授学位类别：口腔医学硕士答辩日期：年月日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（

3、单纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿声明研究生院：本人同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》出版章程的内容，愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘版）

4、电子杂志社的《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿，希望《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕士学位论文评价数据库》和CNKI系列数据库中使用，同意按章程规定享受相关权益。论文级别：■硕士□博士学科专业：论文题目：黄芪多糖对牙龈成纤维细胞在创伤修复中生物学行为的影响作者签名：指导教师签名：年月日作者联系地址：吉林省长春市朝阳区清华路1500号邮编：130000作者联系电话：13756672732摘要黄芪多糖对牙龈成纤维细胞在创伤修复中生物学行为的影响实验目的：本文就黄芪多糖（AstragalusPolysaccha

5、rides，APS）对人牙龈成纤维细胞（HumanGingivalFibroblast，HGF）生物活性作用进行讨论，探讨其对成纤维细胞增殖、迁移及胶原分泌的影响,并与表皮生长因子（EpidermalGrowthFactor，EGF）进行比较，为如何促进牙龈软组织增量及加速创口愈合开辟一种中西医结合的新研究方法。实验方法：1.取临床患者种植手术环切下的的牙龈组织，提取原代牙龈成纤维细胞，传代培养，细胞冻存及复苏。2.采取免疫组化及免疫荧光方法鉴定细胞来源。3.绘制牙龈成纤维细胞生长曲线，观察其生长周期规律。4.采用CCK-8方法分别于24h、

6、48h、72h时检测不同浓度黄芪多糖对牙龈成纤维细胞增殖能力的影响。(黄芪多糖浓度分组依次为A组0μg/ml，B组12.5μg/ml,C组25μg/ml,D组50μg/ml,E组100μg/ml,F组200μg/ml,G组400μg/ml)。5.采用考马斯亮蓝方法于72h时检测不同浓度黄芪多糖对牙龈成纤维细胞分泌总蛋白量的影响。6.采用CCK-8方法分别于24h、48h、72h时检测不同浓度表皮生长因子对牙龈成纤维细胞增殖能力的影响。7.划痕实验分别于24h、48h、72h时检测黄芪多糖和表皮生长因子对牙龈成纤维细胞向创口迁移移行愈合率的影响

7、。8.黄芪多糖和表皮生长因子处理成纤维细胞24h、48h、72h时，ELISA方法检测Ⅰ胶原的表达。9.实验结果采用SPSS17.0软件统计，单因素方差分析法分析。实验结果：I1.采用组织块培养法提取原代牙龈成纤维细胞，细胞呈长梭形，角形或星形，细胞核呈圆形或卵圆形，位于细胞中央，细胞状态良好。2.免疫组化及免疫荧光染色结果表明抗波形蛋白抗体呈阳性表达，抗角蛋白抗体呈阴性表达。证明提取细胞为间充质来源细胞，无上皮源性细胞混杂。3.绘制牙龈成纤维细胞生长曲线，细胞生长曲线大致呈“S”型，第1-2天生长缓慢，第3-5天呈对数生长，第6-7天趋于平

8、稳，符合一般细胞增殖规律。4.CCK-8结果表明，实验组和对照组均能促进HGF增殖，B组与对照组比较无统计学差异（P>0.05），C组和D组在培养48h和72h时促