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1、基础理论降解纤维素菌株的筛选!"#1*,%&’1,2,()*1(1.广西工学院生物与化学工程系,柳州545006;2.广西大学化学化工学院,南宁530004)+,:通过羧甲基纤维素琼脂平板、滤纸条培养基从自然环境中筛选到4株高效纤维素降解菌,其中木霉2株,青霉2株,分别记为T-1、T-2和P-1、P-2。他们都能利用羧甲基纤维素,在羧甲基纤维素平板上长势良好,而且能使滤纸条较快的崩溃。然后将T-1、T-2和P-1、P-2以及一株康氏木霉13022分别接种至以甘蔗渣为主要碳源的发酵培养基上,于28℃恒温培养
2、,从84h开始每隔24h分别测定各相应发酵产物的纤维素酶活。结果显示T-1、T-2和P-1、P-2具有较高的产纤维素酶能力,其中T-1具有较高的羧甲基纤维素酶活力和滤纸酶活力,而P-1、P-2具有较高的产β-葡萄糖苷酶的能力。./0:筛选;纤维素酶;滤纸酶;羧甲基纤维素酶;β-葡萄糖苷酶23456:TS201.389:;<:B8=>6:1005-9989(2006)08-0050-03StudyonscreeningofcellulosedegradationstrainsWUShi-hua1*,XUYa
3、-fei1,2,HUANGCui-ji1(1.DepartmentofBiologicalandChemicalEngineering,GuangxiUniversityofTechnology,Liuzhou545006;2.SchoolofChemistryandChemicalEngineering,GuangxiUniversity,Nanning530004)Abstract:4speciesoffungiincluding2speciesofTrichodermaT-1,T-2and2spec
4、iesofPenicilliumP-1,P-2wereselectedfromnatureenvironmentviacarboxymethylcelluloseagarplateandfilterpapermedium.T-1,T-2,P-1,P-2andaspeciesofTrichodermakoningii13022wereinoculatedtothefermentationmediumwhichusethesugarcanebagasseasthemaincarbonsourceafter84
5、hoursofcultureatthetemperatureof28℃,thecellulaseactivityofeveryfermentedproductsweredetermined.ItwasfoundthatT-1,T-2,P-1,P-2ownhighcellulaseproductivity,butT-1havehighercarboxymethyl-cellulaseactivityandfilterpaperenzymeactivity,andP-1,P-2hashigherβ-gluco
6、saccharaseactivity.Keywords:screen;cellulase;filterpaperenzyme;carboxymethyl-cellulase;β-glucosaccharase纤维素是自然界中存在的最廉价、最丰富的天浪费资源又会对环境造成极大的污染。因此如何合然可再生资源,全世界平均每年能产生近千亿吨的理开发利用纤维素类资源是目前摆在我们面前的一纤维素类物质。但是由于纤维素中存在许多高能氢个亟待解决的问题。键,因此其水解、利用较困难,目前只利用了其中很本文通过在自然环境中采
7、集的样品,经过反覆小的一部分,大部分的纤维素类物质都被弃置,既筛选后得到4种优良菌株,并进行以甘蔗渣为主要碳?@AB:2006-04-28CDEF:广西科学基金项目(桂科自0481027)。GHIJ:伍时华(1963-),男,广西岑溪人,博士,副教授,主要从事微生物育种与代谢控制发酵的研究工作。50No.8.2006基础理论源的培养基上产酶性能的研究,与已知菌种康氏木于沸水浴中放置5min,冷却定容后于540nm处测定其霉13022产酶性能比较,发现在以甘蔗渣为主要碳源吸光度值,按DNS法测定还原糖。在上
8、述条件下,定的发酵培养基上他们具有较高的产纤维素酶能力。义每小时催化水解底物生成1μmol葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活单位U[4-5];1!"#$%(4)滤纸酶活测定:取pH4.5,0.05mol/L柠檬酸缓1.1&’("冲液0.75mL,加入新华定量滤纸(50+5)mg,再加入粗1.1.1样品采集腐木、腐土、腐叶样品5份;酶液0.25mL,50℃恒温水浴保持1h,加入DNS试剂于1.1.2原料康氏木霉13022:中国工业微
