《吸光光度法》课件

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1、第8章吸光光度法8.1概述8.2光吸收的基本定律8.3光度计的基本部件8.4显色反应与分析条件的选择8.5吸光度测量条件的选择8.6吸光光度法的应用2021/8/30化学分析：常量组分(>1%),Er:0.1%～0.2%依据化学反应,使用玻璃仪器化学分析与仪器分析方法比较仪器分析：微量组分(<1%),Er:1%～5%依据物理或物理化学性质,需要特殊的仪器例:含Fe约0.05%的样品,称0.2g,则m(Fe)≈0.1mg容量法V(K2Cr2O7)≈0.02mL,测不准光度法结果0.048%～0.052%,满足要求准确度

2、高灵敏度高2021/8/302.电化学分析法:依据物质的电化学性质及其变化3.色谱法:气相色谱,液相色谱4.质谱法、热分析法、放射化学法等非光谱法（折射法，浊度法，旋光法）（不以光的波长为特征讯号）光谱法分子光谱法UV/Vis,IR原子光谱法AAS,AES（以光的吸收、发射等作用而建立的分析方法，通过检测光谱的波长和强度来进行定性和定量的方法）光学分析法1.光学分析法:基于电磁辐射与物质的相互作用.2021/8/30吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光度法，属于分子吸收光谱分析方法基于外层电子跃迁吸收光谱发射

3、光谱散射光谱分子光谱原子光谱2021/8/308.1概述一.特点灵敏度高：测定下限可达10-5～10-6mol·L-1,(10-8mol·L-1)准确度高:能够满足微量组分的测定要求：相对误差2～5％（1～2％）操作简便快速应用广泛2021/8/30包括：比色法、可见分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法等。2021/8/30结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低.二、光的基本性质光是一种电磁波，它具有波粒二象性，光具有一定的能量。E=hν=hc/λ2021/8/301吸收光谱产生的

4、原因光:一种电磁波,波粒二象性光谱名称波长范围X射线0.1~10nm远紫外光10~200nm近紫外光200~400nm可见光400~750nm近红外光0.75~2.5um中红外光2.5~5.0um远红外光5.0~1000um微波0.1~100cm无线电波1～1000m当光子的能量与分子的E匹配时，就会吸收光子E=hu=hc/l2021/8/30光学光谱区远紫外近紫外可见近红外中红外远红外（真空紫外）10nm~200nm200nm~400nm400nm~780nm780nm~2.5m2.5m~50m50m~

5、300m2021/8/30三、物质对光的选择性吸收单色光：具有相同能量(相同波长)的光.复合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在一起.例如白光.互补光：把两种适当颜色的光按一定的强度比例混合，成为白光，称为互补色光。2021/8/30/nm颜色互补光400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-780红蓝绿不同颜色的可见光波长及其互补光2021/8/30物质的颜色与光的关系完全吸收完全透过吸收黄

6、色光光谱示意表观现象示意复合光2021/8/30吸收曲线：测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，得到的一条吸收光谱曲线。用途：①进行定性分析；②进行定量分析；③选择吸收波长；④判断干扰情况。2021/8/30吸收曲线的讨论：（1）不同物质,曲线形状不同，最大吸收波长λmax不同，可用作定性鉴定各种物质（2）同一种物质，浓度不同，其吸收曲线形状相似，λmax不变。2021/8/30（3）同一种物质，浓度不同，在某一定波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定

7、最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。（4）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。2021/8/30苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱苯(254nm)甲苯(262nm)A2302502702021/8/308-2光的吸收定律──朗伯-比耳（Larnbert-Beer）定律吸光度与物质浓度A∝c吸光度与液层厚度A∝b①②2021/8/30朗伯定律:(1760)A=lg(I0/It)=k1b当入射光的,吸光物质的c一定时,溶液的吸光度A与液层厚度b成正比.比尔定律(1852)A=lg

8、(I0/It)=k2c当入射光的,液层厚度b一定时,溶液的吸光度A与吸光物质的c成正比.2021/8/30一.朗伯-比尔定律意义:当一束平行单色光通过均匀、透明的吸光介质时，其吸光度与吸光质点的浓度和吸收层厚度的乘积成正比.A=lg(I0/It)=kbc2021/8/30透光率(透射比）T（Transmittance）A=—lgT=lg(1/