资源描述：
《高考生物二轮复习专题十四现代生物科技专题专题能力提升练（b）》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、专题14 现代生物科技专题(45分钟 100分)1.(12分)(2018·江苏高考)为生产具有特定性能的α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因工程大量制备α-淀粉酶,实验流程见图。请回答下列问题:(1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的________。 (2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的________端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是_______________________________________。 (3)进行扩增时,反应的温度和时
2、间需根据具体情况进行设定,下列选项中__________的设定与引物有关,________的设定与扩增片段的长度有关。(填序号) ①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度④变性时间 ⑤退火时间 ⑥延伸时间(4)如图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:5'-AUGCCAUCAACAAAUACUAACACUU……-3'图中虚线框内mRNA片段包含______个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有______种。 (5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如下:缓冲液
3、50mmol/LNa2HPO4-KH2PO450mmol/LTris-HCl50mmol/LGly-NaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相对活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为__________________________________________________________。 【解析】(1)在提取目的基因时,需获得细菌的全部基因,所以应获得它的基因组DNA。(2)在PCR技术中,在耐高温的
4、DNA聚合酶的作用下,从引物的3'端延伸DNA链,限制性酶切位点相关序列应加在引物的5'端,而且两种引物的5'端加的限制性酶切位点是不同的,这样可以保证通过PCR技术获得的目的基因两端具有限制酶切割的序列,将来切割后形成的黏性末端不同,优点是保证DNA片段能定向插入表达载体,并减少自连和自身环化现象。(3)进行扩增时,退火温度的设定与引物有关,引物中C、G碱基比例越高,退火温度越高;延伸时间的设定与扩增片段的长度有关,因为扩增片段越长,复制的时间越长。(4)图中虚线框内mRNA片段从起始密码子AUG开始计数,相邻的3个碱基为一个密码子,其中应有8个密码子,虚线框后的第一个密码子
5、以U开头,根据其后两个碱基计算得16种,但除去3种终止密码,则最多有13种密码子,因为虚线框后不可能为终止密码。(5)分析可知,酶活力最高的环境条件是pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTris-HCl。答案:(1)基因组DNA(2)5' 使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连(3)② ⑥ (4)8 13(5)pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTris-HCl2.(16分)(新题预测)“紫薯”外观艳丽、富含花青素,有清除体内自由基、抗癌防老等保健功效。研究人员通过现代分子技术手段,克隆了控制紫薯的着色基因BL。回答下列问题:(1)获取基因BL的方法之一是利用PCR技术扩
6、增大量的DNA。此方法使用的DNA聚合酶与生物体内的DNA聚合酶相比,最主要的特点是______________。PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是_________________________________________________________________________________________。 (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。如表为根据模板设计的两对引物序列,如图为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度:________________。理由是_____________
7、___________________________________________________________________。 引物对序列表引物对AP1 AACTGAAATGTAGCTATCP2 TTAAGTCCATTACTCTAC引物对BS1 GTCCGACTAGTGGCTGTGS2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG(3)若想将着色基因导入另一植物中获得红色果实,可将获取的BL基因插入Ti质粒________________上,通过农杆菌的转化作用将目的基因导入植物的体细胞,
