血小板凝集功能试验

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1、【名称】血小板凝集功能试验【英文名】plateletagglutinationtest【别名】血小板聚集试验；PAgT【概述】生理情况下，血小板与血小板之间具有黏附成血小板粒或块的功能称血小板聚集功能，测定血小板聚集功能的方法称血小板聚集试验(PAgT)，常用比浊法。【原理】在特定的连续搅拌条件下，在含血小板血浆(PRP)内加入诱导剂，由于血小板发生聚集，悬液的浊度减低，透光度增加。光电池将光浊度的变化转换为电讯号的变化，在记录仪上予以记录。根据描记曲线即可计算出血小板聚集的程度和速度。【试剂】(1)血小板诱导剂，包括腺

2、苷二磷酸(ADP)、肾上腺素、凝血酶、胶原等。(2)含血小板血浆(PRP)及贫血小板血浆(PPP)。(3)血小板聚集仪和记录仪。【操作方法】(1)用硅化或塑料注射器从肘静脉顺利取血4.5ml，注入含0.129mol/L枸橼酸钠0.5ml的硅化离心管中。(2)以1000r/min，离心10min，小心取出上层血浆(PRP)，计数血小板并调至250×10/L。(3)将剩余血液以3000r/min，离心20min，上层较为透明的液体即为PPP，调节血小板至(10～20)×10/L。(4)将PRP标本放入测定孔调节透光度为1

3、0%，并加搅拌磁棒，在37℃预热3min。(5)在PRP中加入诱导剂，同时开始搅拌(1000r/min)，记录聚集波型(图1)。【正常值】见下表(表1)。【临床意义】(1)血小板聚集率减低：血小板无力症、巨大血小板综合征、贮藏池病、May-Hegglin异常以及低(无)纤维蛋白原血症；尿毒症、肝硬化、维生素B
缺乏症、血小板抑制药等。(2)血小板聚集率增高：高凝状态和血栓性疾病，如急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管疾病、深静脉血栓形成、先天性紫癜性心脏病、高β脂蛋白血症、抗原-抗体复合物反应、人工瓣膜、口服避孕药、吸

4、烟等。【附注】2′A：2min幅度；4′A：4min幅度；MA：最大幅度；TMA：达到最大幅度的时间；T50%：达到1/2最大幅度的时间，Dt(延滞时间)：指第一波末到第二波起始的时间；S(斜率)：第一波上升弧度切线与水平基线的夹角。(1)采血：采血要顺利，避免反复穿刺而将组织液抽到注射器内，或混入气泡。(2)时间：实验应在采血后3～4h内完成，时间过长会降低血小板的聚集强度和速度。(3)温度：采血后的标本应放在15～25℃室温下为宜，低温会致使血小板激活。(4)血浆pH值：血浆pH值6.8～8.5可获得最佳聚集效果，p

5、H值小于6.4或大于10.0，聚集受到抑制或消失。(5)抗凝剂：聚集作用随血浆枸橼酸钠浓度的降低而增高，故贫血时应加入较正常者为多的抗凝剂。乙二胺四乙酸和肝素不宜作抗凝剂。(6)药物：阿司匹林、双嘧达莫、肝素和口服抗凝剂均可抑制血小板聚集，阿司匹林作用可持续1w。(7)PRP中混有其他物质：混有红细胞、溶血、血脂过高等因素可降低透光度，掩盖血小板聚集变化。(8)接触表面：用未涂硅的普通试管或吸管，可影响血小板聚集，甚至使原来正常者出现异常结果。(9)诱导剂：ADP配制成溶液后宜在－20℃冰箱贮藏，一般半年内不会降低活性；

6、应用肾上腺素时应避光。