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1、卵胞浆内单精子注射64个周期临床分析作者：金锐，王莹，包俊华，杨芳单位：银川市妇幼保健院生殖中心，银川750001【摘要】目的回顾我中心卵胞浆内显微单精子注射技术(ICSI)治疗男性严重少弱精症的临床治疗效果，比较女方年龄和不同精液参数对ICSI结局的影响。方法以2004年8月—2008年4月接受ICSI治疗的64个周期57对不育患者为研究对象，分析女方不同年龄组(≤30岁组、31〜35岁组、36〜40岁组)和男方不同精液参数(正常精液组、严重少弱畸精子组、附睾睾丸穿刺取精组)患者
2、ICSI后的受精率、卵裂率、优胚率、临床妊娠率的比较。结果(1)64个周期屮获卵数为817个，其屮成熟卵母细胞(MII)661个，受精率为82.75%,卵裂率为89.76%,优胚率为68.63%,临床妊娠率为39.06%。(2)女方≤30岁组、31〜35岁组、36〜40岁组ICSI的受精率分别为83.9%.85.5%、72.4%,三组比较差异有统计学意义(P<0.01);三组卵裂率分别为91.4%、91.2%、76.4%,优胚率分别为73.8%、67.1%、54.8%,三组妊娠率分别为3
3、5%、53.1%、10%,三组的卵裂率、优胚率、妊娠率比较差异均有统计学意义(P<0.05)o(3)男方正常精液组、严重少弱畸精子症组、附睾睾丸穿刺取精组患者受精率分别为83.3%、83.1%、75.0%,卵裂率分别为96%、95.1%、91.7%,优胚率分别为70.8%、65.6%.68.2%,三组受精率、卵裂率、优胚率比较差异均无统计学意义(P>0.05)o结仑女方年龄因素对ICSI妊娠结局有显著影响，男方精液参数的不同对ICSI结果无显著影响。【关键词】成熟卵母细胞;单精子显微注射
4、;受精率；卵裂率；妊娠率常规体外受精—胚胎移植(IVF-ET)对于治疗严重少弱精子症或梗阻性无精子症所致不育的患者疗效较差，结果常以成熟卵不能受精而失败。卵胞浆内单精子注射技术(IntracytoplasmicSpermInjection,ICSI)是将整个精子或精子头直接注射到卵母细胞质内，此法使用的精子不需在体外获能[1],是目前广泛应用的显微注射技术。现将我院生殖中心自2004年8月起采用ICSI技术治疗常规体外受精—胚胎移植(IVF-ET)中受精失败、严重少弱畸精子症
5、、梗阻性无精子症所致不育症64个周期报告如下。1资料与方法1.1治疗对象57对不育患者2004年8月—2008年4月在我院生殖中心接受ICSI治疗共64个周期。女方年龄23〜40岁,平均(31.24±3.94)岁。ICSI适应征严格按照卫生部176号文件规定的标准。1.2方法1.2.1超排卵方案和卵细胞处理女方均采用常规长、短超排卵方案。当主导卵泡直径≥18mm时，肌肉注射绒毛膜促性腺激素（hCG）5000〜10000UI/mL,36h后B超引导下取卵。将获取卵子放在
6、37°C、5%C02培养箱内孵育4〜6h后，用含80IU/L透明质酸酶（Quinn's,美国）的受精培养液（ART-1020,Quinn's美国）消化颗粒细胞，反复吹吸卵-冠-丘复合物（OCCC）,以去除卵子上的颗粒细胞。将卵子移入装有ART-1020的培养皿中培养30〜60mine按女方年龄不同分为三组，≤30岁组、31〜35岁组、36〜40岁组。1.2.2精子采集IVF受精失败（精液正常）和严重少弱畸精子症患者（精子密度<lifetimes:106/mL和（或）活率<20%,活力
7、<1%或活动精子≤l×106/mL,正常形态精子<15%）禁欲3〜5cl在取卵后lh内手淫取精，室温下完全液化后，采用密度梯度离心法处理。梗阻性无精子症患者，采用附睾抽吸或者睾丸穿刺法获得精子，用直接离心法处理。按精液参数不同分为三组，正常精液组、严重少弱畸精子组、睾丸附睾穿刺取精组。1.2.3受精用显微注射针制动精子尾部屮上1/3处，确认精子已被制动后，将制动的精子抽吸入显微注射针内;将卵子置于相差显微镜下，选择MII卵子，用显微固定针固定卵子，使第一极体位于6点或1
8、2点的位置，将吸入精子的显微注射针从3点方位穿过透明带刺入卵母细胞内，回抽部分胞质，确认胞膜破裂后将回抽的部分胞质和精子注入卵胞浆内，然后缓慢退针。1.2.4胚胎质量评估和胚胎移植显微注射后16〜19h观察受精情况，将胚胎移至卵裂液培养基中继续培养。移植前对胚胎进行评分，胚胎评分标准［1］：卵裂球大小一致、对称、碎片≤5%、胞浆饱满、质地均匀的为4分；卵裂球大小程度不一致、不对称、碎片6%〜20%、胞浆饱满度、质地均匀度稍差为3分;卵裂球大小不一致、不对称、碎片
