常用pGEX载体图谱

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1、Rosetta系列的表达菌株可以提供T7RNA聚合酶，它能表达PET系列载体上的外源基因。。。pGEX系列载体上的外源基因不需要T7RNA聚合酶，普通的大肠杆菌经IPTG诱导即可表达Tac启动子是一组由Lac和trp启动子人工构建的杂合启动子，受Lac阻遏蛋白的负调节，它的启动能力比Lac和trp都强。其中Tac1是由Trp启动子的－35区加上一个合成的46bpDNA片段(包括Pribnow盒)和Lac操纵基因构成，Tac12是由Trp的启动子-35区和Lac启动子的-10区，加上Lac操纵子中的操纵基因部分和SD序列融合而成蛋白标签：

2、Amyctagisapolypeptide proteintag derivedfromthe c-myc geneproductthatcanbeaddedtoaproteinusing recombinantDNA technology.Itcanbeusedfor affinitychromatography,thenusedtoseparaterecombinant,overexpressedproteinfromwildtypeproteinexpressedbythehostorganism.Itcanalsobeusedi

3、ntheisolationofproteincomplexeswithmultiplesubunits.Amyctagcanbeusedinmanydifferentassaysthatrequirerecognitionbyan antibody.Ifthereisnoantibodyagainstthestudiedprotein,addingamyc-tagallowsonetofollowtheproteinwithanantibodyagainsttheMycepitope.Examplesarecellularlocaliz

4、ationstudiesbyimmunofluorescenceordetectionby Westernblotting.Thepeptidesequenceofthemyc-tagis(in1-and3-lettercodes,respectively):N-EQKLISEEDL-C,N-Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu-C,whereNstandsfor Amino-terminus andCstandsfor Carboxyterminus.Thetagisapproximately

5、1202 Daltons inatomicmassandhas10aminoacids.Itcanbefusedtothe C-terminus andthe N-terminus ofaprotein.Itisadvisablenottofusethetagdirectlybehindthesignalpeptideofasecretoryprotein,sinceitcaninterferewithtranslocationintothe secretorypathway.Amonoclonalantibodyagainstthem

6、yc epitope,named9E10,isavailablefromthenon-commercial DevelopmentalStudiesHybridomaBankpGEX4T1载体基本信息出品公司:GE别名:pGEX-4T-1,pGEX4T1,pGEX4T1质粒类型:大肠杆菌蛋白表达载体表达水平:高拷贝启动子:Tac克隆方法:多克隆位点，限制性内切酶载体大小:4969bp5'测序引物及序列:pGEX5': GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG3'测序引物及序列:pGEX3':CCGGGAGCTGCATGTGTCAG

7、AGG载体标签:N-GST载体抗性:Ampicillin氨苄备注:复制子是pMB1产品目录号:27-4580-01稳定性:瞬时表达Transient组成型:诱导表达病毒/非病毒:非病毒pGEX4T1载体质粒图谱和多克隆位点信息原核生物DNA复制起始点，是DNA链上独特的具有起始DNA复制功能的碱基序列。大肠杆菌的复制起点包括OriC和OriHThrombin凝血酶pGEX4T1载体简介pGEX4T1载体序列LOCUSpGEX-4T-14969bpDNAcircularSYNDEFINITIONpGEX-4T-1ACCESSIONKEYW

8、ORDSSOURCEORGANISMothersequences;artificialsequences;vectors.COMMENT    ThisfileiscreatedbyVectorNTI