四种壳色马氏珠母贝群体遗传多样性分析和分子标记研究.pdf

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5、要马氏珠母贝(PinctadamartensiiDunker)又称合浦珠母贝,是我国生产海水珍珠的重要经济贝类之一,既可作肉贝又可用于生产海水珍珠,生产的南海珍珠享誉世界。而近年来,由于环境条件恶化及不科学的养殖繁育方式等导致种质资源严重退化,珍珠产量及质量下降,企业经济受损严重,因此迫切需要对马氏珠母贝进行遗传多样性分析,优化选育、遗传改良、分子标记选育及保护其种质资源等方面的研究。本研究采用EST-SSR微卫星标记技术、相关序列扩增多态性标记技术(SRAP-cDNA)、单核苷酸多态性标记(SNP)技术

6、等分析了四种壳色马氏珠母贝群体的遗传多样性、筛选出壳色相关分子标记和壳色相关基因酪氨酸酶基因的SNP位点及在四种壳色群体中的表达量差异。旨在为经过8代的群体继代选育获得的四种壳色马氏珠母贝群体的种质鉴定和壳色选育提供分子理论依据。主要研究结果如下:1、本研究采用10对微卫星引物,对四种壳色马氏珠母贝群体的遗传多样性和群体结构进行了研究,结果显示:(1)10个位点共检测到45个等位基因,各位点平均等位基因数4.5个,四种壳色马氏珠母贝群体的平均等位基因(Na)为3.5~4.0,平均有效等位基因数(Ne)为2

7、.288~2.730,平均观测杂合度(Ho)为0.445~0.627,平均期望杂合度(He)范围是:0.479~0.580,平均多态信息含量(PIC)为0.423-0.509,四种壳色马氏珠母贝群体遗传多样性大小依次是红壳色>白壳色>黑壳色>黄壳色;(2)有3个位点极显著偏离哈迪温伯格平衡(P<0.01),2个位点显著偏离哈迪温伯格平衡(P<0.05),其余位点在在不同壳色群体中发生不同程度的偏离,平均遗传分化指数(Fst)值为1.206,平均基因流(Nm)指数1.8825,遗传分化程度中等,没有发生基因

8、流动。遗传距离(Dxy)值范围为0.1742~0.3415,遗传相似度(Nei’s)范围0.7107~0.8418,与F3代和F5代壳色选育系的相比,四种壳色马氏珠母贝群体遗传多样性降低,遗传变异程度和遗传距离增大,遗传结构发生改变,群体趋于纯化,形成四种壳色马氏珠母贝新品系。2、采用SRAP-cDNA技术对四种壳色马氏珠母贝群体的外套膜基因的表达差异进行分析。研究结果表明:100对SRAP引物组合,共筛选到5条差异条带,克隆

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