纤维素分解菌剖析ppt课件.ppt

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1、课题背景1.纤维素是植物细胞中的多糖还是动物细胞中的多糖?2.土壤中的一些微生物能够分解纤维素并利用,为什么?3.人类为什么要从土壤中分离这些微生物,有什么意义?1一、基础知识二、实验设计流程三、操作提示四、课题延伸主要内容2是自然界中纤维素含量最高的天然产物,纤维素的分解需要在的催化作用下完成,请完成下列过程:一、基础知识(一)纤维素与纤维素酶棉花纤维素酶纤维二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶纤维素3滤纸崩溃法纤维素酶活性的测定实验:4下列生物能分解纤维素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A.①②

2、③④⑤B.②③⑤C.②③④⑤D.③⑤C5(二)纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色62、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,我们可以通过____________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈78练一练:1.下列关于纤维素酶的说法

3、,错误的是A.纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖∨92.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈,则说明已筛  选出了纤维素分解菌∨10土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落二、实验设计11纤维素分解菌大多分布在

4、__________的环境中,所以采集土样时,应选择富含纤维素的环境。(一)土壤取样富含纤维素12〖旁栏思考题〗根据生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌?13将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?人工设置适宜环境,使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。〖旁栏思考题〗141、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,

5、原因是____________________。(二)选择培养阅读资料二“选择培养基”,回答以下几个问题:液体没有添加琼脂成分152、该培养基对微生物________(具有,不具有)选择作用。以纤维素粉为唯一碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖具有如果具有,其选择机制是。16若设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是将__________改为_________。3、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?葡萄糖纤维素粉174.实验流程中“选择培养”的目的是什么?其目的是增加纤维素分

6、解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。18〖旁栏思考题〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物?在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。19(三)梯度稀释按照课题1的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行等比稀释,稀释最大倍数到10620(四)样品涂布1.制备培养基:参照旁栏中的比例2.涂布平板:   将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上,30℃倒置培养21

7、(五)挑选产生透明圈的菌落挑取产生明显的透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。接种到纤维素分解菌的选择培养基上,在300C-370C培养,可获得纯培养。22【资料三】刚果红染色法方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红23染色法优点缺点方法一方法二颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐,刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便,不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。思考:这两种方法各有哪些优点与不足24选择培

8、养的操作方法将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。三、操作提示25为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行_____________实验,纤维素酶的发酵方法有______发酵和______发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________含量进行定量测定。发酵产纤维素酶液体固体葡萄糖四、课题延伸26分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用刚果红染

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