欢迎来到天天文库
浏览记录
ID：51086362
大小：556.00 KB
页数：9页
时间：2020-03-18
《实验三、血清中总胆固醇的测定.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、血清中总胆固醇的测定实验三（胆固醇氧化酶法）一、实验目的学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。（1）（3）H2O2+4-氨基安替吡啉（4-AAP）＋苯酚游离胆固醇＋FAA胆固醇酯酶H2O＋红色醌类物质过氧化物酶（POD）510nm光吸收法测定相对血清总胆固醇浓度二、实验原理血清总胆固醇游离胆固醇胆固醇酯胆固醇氧化酶胆甾烯酮+H2O2（2）游离胆固醇三、实验器材材料：人血清试剂：总胆固醇测定试剂盒用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅（1）取3支试管，按下表加入试剂:试剂试剂空白管标准管样品管1样品管2样
2、品管3工作试剂(mL)1.01.01.01.01.0标准液(uL)–10.0–––血清样品(uL)––10.010.010.0四、实验步骤充分混匀，37℃水浴中保温15min；冷却至室温后，510nm处比色比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。（2）计算：依据朗伯-比尔定律：A=KLC标准管胆固醇浓度：5.17mmol/L样品管胆固醇浓度(mmol/L)＝样品管光密度值标准管光密度值×5.17C样=A样A标×C标参考值胆固醇血清参考值：3.0~5.20mmol/L危险阈值：5.20~6.20mmol/L高胆固醇血症：>6.20mmol/L正确使用
3、比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。测定胆固醇所用的试剂应防止被葡萄糖和甘油三酯污染。微量移液枪的正确使用注意事项思考题1、简述胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本原理？2、分析影响实验结果的因素有哪些？如何克服？
此文档下载收益归作者所有
