猪FcγRIIb介导PRRSV抗体依赖增强作用研究.pdf

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1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterPorcineFc),RIIbMediatesAntibody—dependentEnhancementofPRRSVInfectionByZhizhengJiang一Supervisor：AipingWangZoologyDepartmentofBioengineeringMay2012原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除

2、文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：蔼。尊影L日期：矽脏年∥月1日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他

3、复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：藕寄攻日期：红f≯年多月1日摘要猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的严重影响养猪业的最主要传染病，给全世界养猪业带来了重大损失。该病毒具有抗体依赖增强作用(ADE)、持续性感染、亚型多、临床症状不明显以及爆发突然等特点，给临床防控带来很大困难。抗体依赖增强作用(ADE)是指亚中和滴度的特异性抗体能够增强病毒

4、的复制和感染。ADE给疫苗的研发造成了重大障碍。ADE主要由免疫细胞表面的Fc受体(FcR)介导。Fc受体是能与免疫球蛋白(Ig)的Fc段特异结合的一类细胞表面分子，通过与IgFc段相结合，参与机体多种免疫学效应。猪IgGFc受体主要可以分为Fcl'RI(CD64)、FcTRII(CD32)以及FcTRIII(CDl6)=种。其中FcyRI和FcTRIII的丫链含有ITAM基序，为活化型受体；Fc丫RII因为胞内区所含有的相对保守的ITIM基序，属于抑制型受体。关于登革热病毒侵染人巨噬细胞的实验已经证明，活化型受体Fc

5、),RI和FC丫RIIa可以介导ADE作用，但抑制型Fc受体能否介导ADE尚未报道。本研究的目的在于探讨猪Fc),RIIb作为一种抑制型受体，能否介导ADE作用。在前期已经建立表达猪Fc),RIIb的Marc．145细胞系的基础上，研究了细胞系表达Fc受体和复制PRRSV特性。RT．PCR和流式细胞术证明了转染F吖RIIb的Mare．145细胞系中Fc),RIIb可以稳定表达；在无PRRSV抗体存在的情况下PRRSV在转染细胞系和未转染细胞系中感染率、复制效率一致，但在亚中和滴度抗PRRSV抗体存在的情况下，PRRSV

6、感染后转染细胞系子代病毒量显著提高，野生型Marc．145细胞则无此效应。抗PRRSV特异抗体的F(ab’)2片段和PRRSV阴性猪血清均不能增强PRRSV感染。抗猪FC丫RII多抗能够阻断PRRSV抗体介导的增强作用。这些结果证明猪FcTRIIb能够特异介导PRRSVADE作用。为进一步研究抑制型IgGFe受体介导ADE特性，研究了PRRSVADE途径和正常途径感染表达猪FeyRIIb细胞的感染率差异。在PRRSV感染初期，ADE感染和非ADE感染在感染率方面没有明显不同，而在感染24小时后，ADE感染组的感染率明显

7、高于非ADE感染对照组，这意味着PRRSV感染后胞内机制可能发生了促进病毒感染的变化。猪Fm／RIIb在PRRSVADE感染中的作用研究摘要对进一步了解PRRSV与感染细胞间的相互作用以及PRRSV的发病机理具有重要意义。关键词：抗体依赖增强作用(ADE)；IgGFc受体；猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ⅡAbstractPorcinereproductiveandrespiratorysyndrome(PRRS)，causedbytheporcinereproductiveandrespiratorysyndro

8、mevirus(PRRSV)，isoneofthemostimportantinfectiousdiseasesthataffectingpigfarms，andithascausedhugelossestoswineindustryallovertheworld．Becauseoftheantibody-dependentenh