猪胞内劳森氏菌GXNN株4个抗原性候选基因抗原性分析.pdf

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1、广西农业科学2010，41(1)：62-65GuangxiAgriculturalSciences猪胞内劳森氏菌GXNN株4个抗原性候选基因抗原性分析肖爱欢1，谢丽华2，廖承球-，兰家暖-，李茂宁-，侯韶毅1，陆仕勇3，黄伟坚”(1广西大学动物科学技术学院。南宁530005；2梧州市动物疫病预防控制中心，广西捂州543002；3广西农垦国有金光农场，南宁530042)摘要：参考GenBank上已发表的胞内劳森氏菌相关蛋白序列，设计了4对引物，分别扩增了4个抗原性候选基因(3个外膜蛋白基因和1个表面脂蛋白基因)，并将4个抗原性

2、候选基因构建好原核表达载体后进行原核表达、SDS—PAGE电泳和Westernblotting分析。SDS-PAGE电泳检测初步确定重组融合蛋白pET32a—L10902、pET32a—L11022能够进行表达，分别得到53、37kDa的条带；Westernblotting分析则初步确定pET32a—U1022具有抗原性。研究结果首次验证胞内劳森氏菌外膜蛋白基因是否具有抗原性，为诊断试剂盒及基因工程疫苗的研制提供理论基础。关键词：胞内劳森氏菌；抗原性；候选基因；SDS-PAGE电泳；Westernblotting；猪中图分类

3、号：$858．28文献标识码：A文章编号：1002—8161(2010)01--0062--04AnalysisofantigenicityinfourantigeniccandidategenesofLawsoniaintracellularisGXNNstrainXIAOAi-huanl，XIELi—hua2，LIAOCheng—qiul，LANJia-nuanl，LIMao-nin91，HOUShao-yil，LUShi—yongs，HUANGWei-jianl+(1CollegeofAnimalScienceandT

4、echnology，GuangxiUniversity，Nanning530005，China；2WuzhouPreventionandControlCenterofAnimalEpidemicDisease，Wuzhou，Gnangxi543002，China；3Gu哪,iJingnangStateFarm，Nanning530042，China)Abstraet：AccordingtotheassociatedproteinsequencesofLawson函intracellularispubhshedinC,enBa

5、nk。fourpairsofpfimemweredesignedandthegenesofthreeoutermembraneproteinsandoneectallipoproteinwereamplified．Afterconstructingtheprokaryoticexpressionvectorsforfourantigeniccandidategenes，theprokaryoticexpression，SDS-PAGEeleetrophoresisandWesternblottinganalysiswe弛pe

6、rformed．Theresultsshowedthattworecombinationfusionpro-reinspET32a-L10902andpET32a-L11022couldbeexpressedand57kDaand37kDabandWasobtainedbySDS-PAGEelectrophoresis，respectively．TheWesternblottinganalysisresultsshowedthatpET32a-L11022hadantigenieity．Thesere-suitsforthe

7、firsttimeprovedthatwhetherouternlembrsneproteinsofLawsoniaintraeellularishadantigenieityornot，andwouldprovidetheoreticalbasisfordevelopingdiagnostickitandgeneticallyengineeredvaccine．Keywords：Lawson／aintrace]lularis；antigenicity；candidategene；SDS-PAGEelectrophoresi

8、s；Westernblotting猪增生性肠炎(Porcineproliferativeentempathy。PPE)又称猪回肠炎(Porcineileitis)，是由胞内劳森氏菌(Lawson／aIna'aceIlularis。LI)引起的一种接触性传染病。以回肠及结盲处近端的结肠、盲肠