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《自噬基因Beclin1在喉鳞癌患者中表达和临床意义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、自噬基因Beclinl在喉鳞癌患者中表达和临【摘要】目的：探讨自噬基因Beclinl在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测77例喉鳞癌组织和22例正常组织中Beclinl的表达,分析Beclinl的表达与喉鳞癌生物学行为的关系。结果：Beclinl表达主要位于细胞浆，与正常组织比较，喉鳞癌组织中Beclinl的蛋白表达阳性率明显降低（P0.05）,与喉癌的T分期、分化程度及淋巴结转移相关（P0.05）,具有可比性。1.2主要试剂Beclinl和p-PKB为多克隆兔抗人抗体，购自SantaCruz公司，多
2、克隆兔抗人pllOa及hvps34抗体购自Abgent公司。过氧化物酶标记的链霉卵白素试剂盒和DAB试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3检测方法免疫组化采用S-P法，依据说明书进行操作。Beclinl稀释倍数为1：20。结果的判断所有切片采用盲法由两位病理科医生独立阅片，细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性细胞。结果采用两种方法：（1）染色结果判定：每例标本以400倍光镜下随意选取10个视野，计数每个视野中100个肿瘤细胞中的阳性细胞数，取其平均数求其阳性百分率作为结果。平均阳性细胞所占比例5%判定为阳性。（2）在X100下观察
3、全片，选择5个阳性物质丰富的视野，然后采用Image-ProPlus4.5分析软件在X400下测定阳性物质的积分光密度值（integratedopticaldensity,I0D）,计算平均IOD值。1.4统计学处理采用SPSS16.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x土s）表示，比较采用t检验，计数资料采用字2检验，理论频数小于5时采用Fisher确切概率法。以P0.05）；在组织学分化分组中，与低分化的喉癌比较，Beclinl在高、中分化的喉癌组织中的量及阳性率均明显增高表达（P自噬不仅在调控肿瘤的生成有重要的作用，并
4、且与肿瘤的生长和转移有关。在临床上，肿瘤的临床分期、组织学分级以及淋巴结转移等因素是喉癌恶性程度以及预后的重要指标［9-10］。患者临床分期越晚，组织学分化越差，其侵袭与转移能力也越强，预后越差［11］。本研究发现Beclinl的蛋白表达与喉癌的临床分型无相关性，但是T1+T2中Beclinl蛋白表达高于T3+T4组，表明Beclinl的蛋白表达与喉癌的T分期有显著相关性，表明Beclinl的表达与喉癌的临床进展有关。在不同分化喉癌组的比较中，高、中分化组与低分化组的比较时，Beclinl表达明显增高,表明肿瘤细胞分化程度越低，恶
5、性程度越高，自噬能力也减弱地更加明显，提不Beclinl表达降低和喉癌的预后相关。喉癌患者淋巴结转移是其重要转移途径，本研究发现淋巴结转移组和非转移组相比，Beclinl表达降低，提示Beclinl表达降低与淋巴结转移相关。有研究表明，自噬可能是抑制肿瘤血管形成和分布的一种方式[12]o综上所述，自噬基因Beclinl在喉癌中的表达明显低于正常喉组织，Beclinl的缺失与喉癌的发生有关。自噬基因Beclin1阳性表达率与喉癌的T分期、分化程度及淋巴结转移相关，当Beclinl表达下调时肿瘤的恶性程度更高，更容易发生进展和转移。进
6、一步研究自噬基因Beclinl对喉癌细胞生物学行为的影响，对进一步探索喉癌的治疗有积极意义。参考文献[1]WoodardTD,OplatekA,PetruzzelliGJ.Lifeaftertotallaryngectomy:ameasureofIong-termsurvival,function，andqualityoflife[J]・ArchOtolaryngolHeadNeckSurg,2007,133(6)：526-532.[2]ChuEA,KimYJ.Laryngealcancer：diagnosisandpreoper
7、ativework-up[J]・OtolaryngolClinNorthAm,2008,41(4)：673-695.[3]LockshinRA,ZakeriZ.Apoptosis，autophagy,andmore[J].IntJBiochemCellBiol,2004,36(12)：2405-2419.[4]AitaVM,LiangXH,MurtyV，etal.CloningandgenomicorganizationofBeclinl，acandidatetumorsuppressorgeneonchromosome17q21
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