不同来源嗜水气单胞菌溶血素基因检测及序列分析

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1、第44卷第1期淡水渔业2014年1月Vo1.44No.1FreshwaterFisheriesJan.2014不同来源嗜水气单胞茵溶血素基因检测及序列分析靳晓敏,葛慕湘,张艳英,房海,陈翠珍(河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室,河北昌黎066600)摘要:对分离自发病宽体金线蛭(Whitmaniapigra)、中国林蛙(Ranachensinensis)、牙鲆(Paralichthysolivaceus)、草鱼(Cterwpharyngodonidellna)、青鱼(Mylopharyngodonpi

2、ceus)、鲤(Cyprinuscarpio)的42株致病性嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)采用PCR方法,进行了溶血素(Ahh)基因的检测,并将代表菌株的Ahh基因片段通过Blast与GenBank中报道的相似性较高的10株嗜水气单胞菌参考菌株进行了核苷酸同源性分析。结果显示,所检不同来源的嗜水气单胞菌均携带Ahh基因;所测代表菌株Ahh基因片段与10株嗜水气单胞菌参考菌株的同源性为94.1%一98.9%;供试不同来源嗜水气单胞菌株间Ahh基因的同源性为97.1%~100%,其中分离自

3、草鱼的HC960715-5与分离自宽体金线蛭的HTQ010505—3之间同源性高达100%,分离自青鱼的HL060811—3与分离自林蛙的HQO70610B-3同源性也高达100%。关键词:嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila);溶血素基因;序列分析中图分类号:s917.1文献标识码:A文章编号:1000-6907一(2014)01-0003-05DetectionandsequenceanalysisofhemolysingeneinAeromonashydrophilastrainsJIN

4、Xiao—min,GEMu-xiang,ZHANGYan—ying,FANGHal,CHENCui—zhen(KeyLaboratoryPreventiveVeterinaryMedicineinHebeiProvince,HebeiNormalUniversityofScienceandTechnology,Chaagli066600,Hebei,China)Abstract:F0ny—twopathogenicAeromonashydrophilastrainsisolatedfromWhitmaniap

5、igra,Ranachensinemis,Parali—chthysolivaceus,Ctenopharyngodonidellua,MylopharyngodonpiceusandCyprinuscarpiowereinvestigatedforthepres—enceofhemolysin(Ahh)geneusingPCRmethod,andthehomologyofAhhgenesequencesfromdiverserepresentativeA.hydrophilastrainswerecompa

6、redwithavailablesequencesintheNCBIGenBankusingthesoft—wareDNAStar.Ther℃一sultsshowedthatallthedetectedstrainswerepositiveforAhhgene.TheAhhgenesofrepresentativestrainswhichwerei-solatedfromdiferenthostsshared94.1%一98.9%nucleotidesequencehomologywiththereferen

7、cestrains.TheAhhgenesof7representativestrainsshowedahJgherpercentageofsimilarity(97.1%~100%).Amongthem,Ahhgenese—quencehomologiesofrepresentativestrainsHC960715—5isolatedfromC.idelluaandHTQ010505—3isolatedfrompigra.aswellasHL060811—3isolatedfrompiceusandHQO

8、70610B一3isolatedfromR.chensinensis,wereashighas100%.Keywords:Aeromonashydrophila;hemolysin(Ahh)gene;sequenceanalysis嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)是一种革泻的病原菌,属于一种比较典型的人一兽一鱼共染的兰氏阴性的短杆菌,广泛存在于水环境、土壤和水条件性致病菌,在预

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