不同激素对蝴蝶兰原球茎诱导与增殖的影响.pdf

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1、中国园艺文摘2014年第7期不同激素对蝴蝶兰原球茎诱导与增殖的影响杨艳梅，李国树。范树国，徐成东(1．楚雄师范学院化学与生命科学系，云南楚雄6750002．滇中高原生物资源开发与利用研究所，云南楚雄675000)摘要：以生长健壮的蝴蝶兰无茵苗幼叶为外植体，采用正交设计试验研究不同激素配比(6-BA、NAA)、培养基蔗糖含量和原球茎大小对蝴蝶兰愈伤诱导和增殖的影响。结果表明：适量的6-BA、NAA有利于蝴蝶兰原球茎诱导；培养基中蔗糖含量高及暗处理促进愈伤生长与增殖；接种原球茎大小影响蝴蝶兰继代增殖；在添加6-BA4．0mg／L+NAA0．5mg

2、／L+蔗糖20g／L+15％椰乳的培养基中蝴蝶兰原球茎诱导效果最好，诱导率达4O％。在添加6-BA5．0mg／L+NAA0．2mg／L+15％椰乳的培养基中蝴蝶兰原球茎增殖最好，增殖系数达5．5；原球茎直径大小在1．0士0．05cm左右对蝴蝶兰继代增殖效果较好，可为蝴蝶兰原球茎诱导与增殖研究提供参考依据。关键词：蝴蝶兰；原球茎；诱导；增殖；激素；无茵幼叶蝴蝶兰(Phalaenopsisamabilis)是兰科(Orchidaceae)1材料与方法多年生常绿草本，原产于热带、亚热带地区。目前主要分1．1材料布在中国、泰国、菲律马来西亚、印度尼西

3、亚等地，蝴蝶兰无菌苗幼叶(品种为：Dtps．CoralGleamXP．其株型美观、姿态高雅，花大如蝶、形态美妙，花色艳丽、zumaRose-SamsonDXf001(1296)即：V31巨宝红玫瑰，色泽丰富，观赏期长，1朵花可开放4～6个月，享有“洋由楚雄师范学院李国树老师提供)。兰皇后”的美誉川。既是著名的切花种类，也可用于家庭1．2方法摆设，还可制作花篮、花束、胸花、捧花等，因而深受世1．2．1原球茎诱导(1)原球茎诱导培养基的配制：以界各国人民的喜爱，消费量不断增加。1／2MS为基本培养基，添加琼脂10g／L、椰乳15％，采国外对蝴蝶兰

4、的组织快繁研究较早，1949年前后，以用正交试验设计添加不同浓度的激素及蔗糖，pH值5．8，花梗休眠芽在无菌条件下发育成完整的植株为主要繁殖每组10瓶，高压蒸汽灭菌后备用。培养基设计情况见表方式，但因限于外植体数量繁殖系数难以提高，1974年1。(2)取材及接种：取蝴蝶兰无菌苗幼嫩叶片将其切成Intuwong等利用蝴蝶兰茎尖诱导出原球茎状体后分化成植0．5cmx0．5cm左右的小块，顺着其生长方向将其接种株，1975年日本学者田中以兰花实生苗叶片为外植体诱导于培养基中。每瓶接种3块，叶片背面向上。(3)培养条出原球茎形成再生苗I1992年Kn

5、udson首次使兰花种子在件：温度25±2℃l连续光照时间：12h／d，光照强度为无菌条件下发芽并良好生长】。20世纪80年代，国内开始2500b【lRH：60％～80％。以蝴蝶兰的茎尖、花梗、叶片、根尖等外植体进行组培快繁[3-51,但快繁过程中还存在一些缺陷。表1蝴蝶兰原球茎诱导正交试验设计方案目前，蝴蝶兰快繁途径主要有：一是通过无菌播种蝴蝶兰种子，人工培养后在短时间内获得大量幼苗，这是现阶段经济有效的快速繁殖方法和工厂化育苗的重要途径·种子萌发成原球茎(Proto-CO1T11likebody，简称：PLB)后可产生丛生苗，但以种子为外

6、植体获得的组培苗会发生性状分离，且材料来源受限制，不适合商业化生产。二是利用各种外植体诱导类原球茎，进而诱导分生苗实现快繁【4．，不经愈伤组织直接诱导丛生芽。近年来也有通过诱导愈伤组织途径进行植株再生的研究u”，但应用正交试验设计不同浓度的激素、蔗糖、琼脂组合对蝴蝶兰原球茎诱导与增殖研究尚未见报道，希望通过此研究为蝴蝶兰原球茎再生提供参考依据。1．2．2原球茎增殖(1)材料：诱导出的原球茎。(2)不同浓度的蔗糖、激素组合对蝴蝶兰原球茎增殖的影响研究：第一作者简介：杨艳梅(1992一)，女，本科生；就读于楚雄师范采用正交试验方法配制培养基，将诱

7、导出来的原球茎切成学院化学与生命科学系生物技术专业。大小一致的小块，接种于以1／2MS培养基为基础的培养通讯作者：李国树，高级实验师。E-mail：hsxlgs@cxtc．edu．cn基，添加琼脂10g／L、椰乳15％。每组5瓶，每瓶按种原项目来源：云南省大学生创新性实验项目(资金31260095)；云球茎3个。接种后培养于光照强度2500lX、连续光照时南省植物学重点学科项目资助。-29-CHINESEH0RTICULTUREABSTRACTS间12h／d、温度25士2℃的组培室内。接种后每隔1d观从表3可见，培养基：1／2MS+6-BA4

8、．0mg／L+察1次，30d后统计结果，统计蝴蝶兰原球茎增殖系数指NAA0．5mg／L+蔗糖20g／L诱导原球茎效果最好，诱标，蝴蝶兰原球茎增殖培养方案见表2。(3