苦豆子内生细菌的分离、筛选及活性鉴定-论文.pdf

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1、2013~g第7期闯粗铼哥卅CHINAPLANTPROTECTION2013，Vo1．33．No．7苦豆子内生细菌的分离、筛选及活性鉴定顾沛雯，胡美娟，周星辰(宁夏大学农学院，宁夏银川750021)摘要：对苦豆子健康植株和种子内的内生细菌进行分离，共获得41株内生细菌。同一植株分离内生细菌的数量：种子和根部最多，茎和叶部较少。采用平板对峙培养方法筛选出3株对植物病原菌有明显体外颉颃活性的菌株XKGKDBl9、NDZKDB∞和NDZKDB25。其中NDZKDB29菌株表现广谱抗茵活性。经16SrRNA基因序列分析鉴定，3株高活性菌株分属

2、于黄芪叶瘤杆菌(Phyllobaeteriumifriqlye船e)、弯曲假单胞菌(Pseudomonasgeniculata)和固氮阴沟肠细菌(Enterobactercloacae)。关键词：苦豆子；内生细菌；抑菌活性；16SrRNA序列分析中图分类号：$476文献标识码：A文章编号：1672—6820(2013)07—0009—04Isolation，screeningandactivityidentificationofendophyticbacteriainSophoraalopecuroidesL．GuPeiwen，HuM

3、e~uan，ZhouXingchen(AgriculturalCollege，NingxiaUniversity，YinchuanNingxia750021，China)Abstract：41strainsofendophyticbacteriawereisolatedfromhealthplantandseedofSophoraalopecuroidesL．．Quantityofendophyticbacteriafromdiferentpansof＆alopecuroidesvariedandthatinseedsandroots

4、wasmorethanthoseinstemsandleavesofsingleplant．3strains，XKGKDBl9，NDZKDB~andNDZKDB25withantagonisticactivityagainstpathogenwereselectedbyplateoppositionculturemethod，andNDZKDB~hadbroad-specificityantagonisticactivity，andthose3strainswereidentifiedasPhyllobocterium}幻瑚e，Pse

5、udomonasgeniculataandEnterobactercloacaerespectivelyby16SrRNAgenesequencesanalysis．Keywords：SophoraalopecuroidesL．；endophyticbacteria；antagonisticactivity；16SrRNAsequenceanalysis使用化学杀菌剂是控制植物病害的有效方法，酰藤黄酚、吩嗪羧酸、藤黄绿脓素、吡咯菌素、脂多肽但化学杀菌剂污染环境，诱导病菌抗药性增强，破坏类抗生素等口．4]，显示出良好的研究和应用前景。生

6、态平衡．其残毒问题也令人担忧。因此，植物病害苦豆子(SophoraalopecuroidesL．)属豆科槐属，的生物防治研究越来越受到重视[I]。近年来不少研是宁夏的重要药用植物资源和自然植被组成部分。究表明．植物体内尤其是药用植物体内存在大量对野生资源分布面积广，蕴藏量大，种群优势突出[5]。植物病原菌具有颉颃作用的内生细菌。这些内生细生物碱、黄酮和三萜类化合物等是其主要的生物活菌由于存在于植物体内而不易受外界环境条件的影性成分[s，具有抗菌杀虫、抗肿瘤、免疫等功效。响，可较好地发挥生物学作用，是植物病害生物防治国内从苦豆子中获得活

7、性物质的方法主要是通过的天然资源菌]。目前已从近30种药用植物中分离刈苦豆子直接从植物中提取]。由于苦豆子野生资到60多属的内生细菌．不仅从中分离鉴定出一些细源有限，滥采滥用导致其资源濒临枯竭，大量野生菌新种．而且从中获得了多种新型抗生素[3J。如双乙草场沙化．其资源也难以满足市场的需要[9】。因此，收稿151期：2013—03—01基金项目：宁夏自然科学基金(nzl002)；国家自然科学基金(30960228)作者简介：顾沛雯，博士，教授，主要从事生物防治及微生物资源利用教学和科研。E-mail：gupeiwen20l3@126．c

8、om。·9·⑩CH,1I3N担AP锞LA哥N叫TPR2O01T3E年CT第IO7N期2013，Vo1．33．No．7苦豆子资源的合理保护与开发利用引起了人们的1000r／min离心5min。其上清液为待测样品。重视[，引