中空纤维测试法简介

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1、纤维测试抗肿瘤药物高通量体内筛选SPECTRUMLABORATORIES,INC.仅供spectrum及其经销商参考使用抗肿瘤药物药效学筛选通常需要通过体外细胞实验、动物体内实验和人体临床实验3个步骤。动物体内实验旨在分析药物体内活性和/或毒性，常采用一种或多种肿瘤模型，是药物筛选的关键步骤，但往往需要大量的时间、成本和精力。中空纤维药物筛选模型有效地解决了快速体内筛选的方法学问题。中空纤维测试法（HollowFiberAssay：HFA）HFA是将一定数量的某种肿瘤细胞装入中空纤维管，再将中空纤维手术植入裸鼠体内，然后给予受试药物，治疗结束后取出中空纤维管，用各种方法（如MTT

2、）分析肿瘤细胞活性，从而得出药物体内抗肿瘤活性的方法。中空纤维规格：▫材料：改良的聚偏二氟乙烯（mPVDF）▫MWCO：500kD▫良好的生物相容性和稳定性▫耐有机溶剂、酸、碱和高温▫可高压灭菌和热密封处理▫内腔适于细胞生长中空纤维测试法（HollowFiberAssay：HFA）HFA优势：▫提供全真体内环境，考量药物受体内转运、代谢的影响。▫节约成本、提高效率▫扩大筛选肿瘤的种类▫可用于细菌、霉菌、病毒感染细胞检测NCI标准抗肿瘤筛选细胞株：▫人乳腺癌细胞株MDA-MB-231/MDA-MB-435▫人胶质瘤细胞株SF-295/U251▫人卵巢癌细胞株OVCAR-3/OVCA

3、R-5▫人结肠癌细胞株COLO-205/SW-620▫人黑色素瘤细胞株LOX-IMVI/UACC-62▫人肺癌细胞株NCI-H23/NCI-H522中空纤维测试法（HollowFiberAssay：HFA）HFA操作步骤：1.细胞培养2.细胞封装3.纤维植入4.给药处理5.细胞回收6.细胞检测与移植瘤法相比：▫低风险▫高通量（一次筛选3-4个细胞株）▫实验周期短▫所用实验动物/受试药量少▫假阴性率低▫各细胞株间无干扰HFA应用实例：抗肿瘤活性研究通过HFA检测茚并异喹啉TopⅠ抑制剂衍生物的抗肿瘤活性。通过HFA评估三肽化合物酪丝亮肽（YSL）对肝癌的治疗效应。HFA应用实例：抗

4、肿瘤活性研究通过HFA研究阿霉素治疗ESFT的可信性和可重复性。双吲哚类衍生物抗肿瘤活性体内筛选。HFA应用实例：针对其它细胞的药物活性研究使用HFA和32D-mpl细胞系，研究非肽小分子TPOR激动剂的体内活性，发现其可刺激细胞增殖，抑制凋亡，同时有助于细胞信号传导和转录激活子的磷酸化。说明是HFA是一种特异、高效的体内活性评估模型。HFA应用实例：使用HFA，收集LNCap细胞向雄激素非依赖性发展过程不同阶段的“纯”细胞，收集的细胞无宿主源性干扰，可提取无污染的RNA和蛋白质等，以进行基因组学、蛋白组学分析，包括基因转录调节分析，以及建立针对不同激素的细胞亚系。HFA应用实例

5、：机制研究使用HFA和A549肺癌细胞系，验证紫杉醇和康普力停A1对微管和细胞周期的干扰作用。说明HFA可用于除药效之外的药理机制研究。HFA应用实例：机制研究使用体内/外HFA技术，分析DNA插入剂和烷化剂对各肿瘤细胞的药效特性，在分子水平上监测药物对DNA双链断裂的诱导作用。说明HFA可用于药物-靶标作用机制的分析。HFA应用前景和限制前景：▫抗病原体（细菌、病毒等）药物的体内筛选▫天然药物（多成分协同、多靶点、代谢复杂）的评价，促进提取工艺和药效的结合▫基于基因组学、蛋白组学的药物分子机制研究限制：尚不能完全替代移植瘤模型▫不适用长效药物、免疫调节药物研究▫不能模拟肿瘤细胞

6、与宿主基质的相互作用▫不能准确反映肿瘤的血管生成，造成药物输送和细胞营养供给差异