叶黄颗粒对视网膜光损伤大鼠及血清游离氨基酸的作用

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1、叶黄颗粒对视网膜光损伤大鼠及血清游离氨基酸的作用　　光化学损伤是视X膜光损伤中最普遍的一种损伤，其病理过程与年龄相关性黄斑变性等视X膜变性疾病有许多相似之处，主要表现为视X膜光感受器细胞的凋亡，是一个退行性变性过程。氨基酸也是视X膜中一类重要的神经递质。研究发现，视X膜兴奋性氨基酸的过量可导致兴奋毒性作用，引起视X膜神经元的死亡。光损伤可以引起视X膜多种游离氨基酸含量增高，故检测氨基酸类神经递质含量的变化对于了解视X膜光损伤的发病机制有重要的参考价值。目前研究发现，叶黄素与玉米黄质共同构成视X膜黄斑色素，且存在于整个视X膜，是人眼中唯一存在的两种胡萝卜素。国内外研究表明:叶黄素与玉米黄质均能够

2、预防眼睛光损伤。本研究通过建立大鼠视X膜光损伤模型，在前期重点研究叶黄颗粒(主要含叶黄素和玉米黄质，叶黄素与玉米黄质的比例为5:1)对视X膜光损伤的防护作用及作用机制基础上，进一步了解叶黄颗粒对光损伤大鼠视X膜及血清游离氨基酸水平的影响，为将来研制开发更加安全、有效、方便的防治视X模光损伤的新制剂，提供新的研究思路及一定的理论依据。　　　　1材料与方法　　　　1．1实验　　　　动物雄性SD大鼠48只，体重190g～230g，8周龄，清洁级，由浙江中医药大学实验动物中心提供(许可证号:SYXK(浙)2008－0115)。　　　　1．2实验药品　　　　叶黄颗粒由荷兰帝斯曼(DSM)公司提供，叶黄颗

3、粒含叶黄素(lutein)含量为10%，玉米黄质(zeaxanthin)含量为2%(lutein:zeaxanthin的比例为5:1)，制剂辅料主要为淀粉。　　　　1．3实验分组及给药　　　　将48只大鼠随机分为6组，每组8只，分别为:空白对照组;模型对照组;阳性对照组;叶黄颗粒低剂量组;叶黄颗粒中剂量组;叶黄颗粒高剂量组。试验前将叶黄颗粒制剂采用蒸馏水配置，灌胃剂量1ml/200gBet、Ile、Leu、Phe、Lys、His、Arg、Ser、Ala、Cit、Cys、Tyr及Orn15种必需和非必需氨基酸，模型对照组及各治疗组大鼠视X膜中其含量也均升高，模型对照组与空白对照组比较，差异具有统

4、计学意义(P＜0．05或P＜0．01);与模型对照组比较，叶黄素颗粒高、中剂量组及阳性对照组中上述15种氨基酸(Orn除外)含量有不同程度降低，大部分差异均具有统计学意义(P＜0．05或P＜0．01)，低剂量组有降低趋势，但大部分无统计学意义(P＜0．05);各治疗组与模型对照组比较，Orn含量差异无统计学意义(P＜0．05)(表1，表2)。　　　　2．2叶黄颗粒对大鼠血清游离氨基酸含量的影响　　　　光照后7d，本实验同时还检测分析了大鼠血清中上述20种游离氨基酸。统计结果表明，各组间20种氨基酸含量差异无统计学意义(P＞0．05)(表3，表4)。　　　　3讨论　　　　氨基酸不仅是生物体中的营

5、养物质和代谢产物，它们在神经系统中还发挥着某些重要的生理功能，氨基酸是视X膜中一类重要的神经递质。根据其对中枢神经元的不同可分为:兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸。Glu、Asp、GABA、Gly均为经典神经递质，且属氨基酸类神经递质。Glu、Asp是主要的兴奋性神经递质，GABA、Gly则是主要的抑制性神经递质。研究证实，Glu是包括光感受器细胞、双极细胞和神经节细胞在内的视信号传导通路的主要兴奋性神经递质，Asp在中枢神经系统中也是主要的兴奋性神经递质，在神经元损伤等生理病理过程中起关键作用。GABA是中枢神经系统的主要抑制性神经递质，调节和控制正常的生理功能。正常情况下，视X膜中GABA刺激G

6、ABA受体而阻断Glu的兴奋毒性，使视X膜的抑制性神经递质和兴奋性神经递质保持平衡。Tau是视X膜中含量最高的氨基酸，几乎占视X膜中游离氨基酸的50%，Tau在维护视X膜的结构和功能上具有重要作用。其中之一就是保护视X膜感光细胞免受光化学损伤，其次Tau对Glu诱发的去极化现象有抑制作用，并在一定程度上拮抗谷氨酸引起的钙离子内流。故测定这些氨基酸类神经递质含量变化对于视X膜系统疾病的发病机理有极其重要的参考价值。　　　　本实验中发现光损伤后视X膜神经递质类游离氨基酸含量升高，其余的氨基酸如苏氨酸，丝氨酸等15种被检测的视X膜游离氨基酸含量也有不同程度的升高。同时发现在急性的光损伤下，血清中的游

7、离氨基酸含量未见明显升高，各组间比较未见显著性差异。叶黄颗粒可以降低光损伤后视X膜神经递质类游离氨基酸水平，高剂量组更明显。叶黄颗粒中叶黄素和玉米黄质在结构上互为同分异构体，分子结构中的含有40个碳原子的长链，其中有多个共轭双键，使其具有较强的还原性和清除自由基的能力，具有较强的抗氧化作用。Bone等的研究表明，人体内的视X膜和脉络膜等处还存在一种玉米黄质的同分异构体称为内消旋玉米黄质(meso－