冬凌草渗漉提取工艺研究

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1、冬凌草渗漉提取工艺研究　　关键词：渗漉提取；冬凌草；正交实验；冬凌草甲素　　Abstract：ObjectiveTostudythepercolationextractionprocessofRabdosiarubescensbyorthogongaltexts.MethodsSoakingtime,floeofcollectionsolutionizetheextractionprocess.ResultsThebestprocessl.eachkilogrammateriamedicaeachminiteis3andtentimesthevolumeofperco

2、lationsolutionsl为唇形科香茶菜属多年生草本植物，主产于我国黄河流域及其以南各地区。具有清热解毒、消炎止痛等功效。其主要成分冬凌草甲素具有很强的抗肿瘤活性［1］。对于冬凌草中有效成分的提取，一般选用95%乙醇为溶剂，采用回流法、冷浸法、渗漉法、破碎法等进行提取。研究结果表明［2］,由于有效成分冬凌草甲素为一热敏性成分，故提取不宜采用热回流法，而室温提取法中的破碎提取仅限于实验室小规模，离工业化生产尚有距离。对于大规模工业化生产，最适合的提取方法应为渗漉提取或冷浸提取。为了确定出渗漉提取法的最佳工艺条件，本文采用正交实验法进行研究，优选出了最佳工艺条件。　

3、　1器材　　Agilent1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；自动进样器；HP1100化学工作站；R201B旋转蒸发仪（上海申胜生物技术有限公司），渗漉筒（用8cm×12cm层析柱代替），微量分析天平（EETTLERAE240瑞士）。冬凌草于200310购自河南省济源市药材公司。冬凌草甲素对照品：自制，含量99.22%。色谱纯甲醇，双蒸水，其它试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1色谱条件色谱柱为ODSC18柱，流动相为甲醇水(55∶45)，柱温25℃，检测波长λ=242nm。　　2.2标准曲线的绘制精密称取冬凌草甲素对照品10.00mg，加甲醇定容至25

4、ml量瓶中，摇匀后得到浓度为400μg/ml的对照品溶液。分别进样上述浓度为400μg/ml的冬凌草甲素对照品溶液0.2，0.4，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0μl，记录峰面积。结果冬凌草甲素进样量在0.08～1.32μg之间，峰面积与冬凌草甲素进样量呈良好线性关系，回归方程：Y=1464.41036X+30.61838，r=0.99997。　　2.3样品溶液的制备分别精密称取冬凌草全草粗粉9份，每份500g，用95%EtOH500ml拌匀，密闭使其溶胀3h，分别装入渗漉筒中，按正交实验表中所选取的3因素3水平进行渗漉提取，吸取渗漉液5

5、ml用甲醇定容至100ml量瓶中，测定时分别吸取10μl进样，记录峰面积，计算冬凌草甲素的含量。　　表3方差分析（略）　　3讨论　　在正交实验中选取冬凌草中的主要有效成分冬凌草甲素的含量作为优选正交方案的指标，方差分析结果表明，因素A和因素B对冬凌草甲素的含量均有显著的影响，因素C有极显著性影响。根据表2直观分析结果，最佳组合应为A2B1C3。因此，优选出渗漉提取的最佳工艺为：将冬凌草全草粗粉用95%乙醇溶胀3h后装入渗漉柱中，用95%乙醇浸泡12h后，以每公斤药材每分钟3ml流速渗漉，收集10倍量渗漉液。与冷浸法相比，渗漉提取由于始终保持一定的浓度差，所以提取效率有

6、所提高，且提取液中有效成分的含量高于冷浸法［3］，并具有设备简单、操作方便、溶剂用量适中、不需加热，有利于不耐热成分不被破坏等特点。该工艺可进行放大供工业化生产参考。　　参考文献：　　［1］刘晨江,赵志鸿.冬凌草的研究进展［J］.中国药学杂志,1998,33(10)：577.　　［2］袁珂,胡润淮,张庆岭,等.冬凌草不同提取工艺的研究［J］.中草药,1997，28(7)：405.　　［3］袁珂,胡润淮,翟剑波.正交试验法优选冬凌草的提取工艺［J］.中国现代应用药学,1998,15(5):14.