高效液相色谱法测定诃子中鞣花酸的含量的论文

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时间:2018-05-08

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1、高效液相色谱法测定诃子中鞣花酸的含量的论文作者:贝玉祥,杨阳,郭英,李正全,高云涛【摘要】目的建立诃子提取物中鞣花酸含量的高效液相色谱(hplc)测定方法。方法色谱条件shim-packclc-ods色谱柱(150mm×6mm,5μm),柱温30℃,用ch3oh-etoac-kh2po4/h3po4(0.05mol/l)(体积比30∶2∶68)作为流动相,检测波长为254nm。结果鞣花酸在0.268~5.36μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率为98.42%,rsd为1.13%(n=5)。结论该方法快

2、速、简便、准确,可用于诃子中鞣花酸的含量测定。【关键词】诃子;鞣花酸;高效液相色谱  abstract:objectivetodevelopanhplcmethodforthedeterminationofellagicacidintheextractofterminalia.methodshplcseparation-packclc-odscolumm(150mm×6mm,5μm)obilephaseconsistedofmethanolethylacetate,0.05mol/lkh2po4-h3po4(34∶

3、2∶64)ataflol/min.thedetection.resultsthelinearrangelforellagicacid.theaveragerecoveryethodisrapid,accurateandreproduciblefordeterminationofellagicacidintheextractofterminalia.  keyinalia;ellagicacid;hplc  诃子terminaliachebularotz.又名诃黎、诃黎勒、随风子,为使君子科植物的果实[1]。.诃子作

4、为中药在中医临床上广泛使用,用于油脂抗氧化方面的研究在国内已见有专门报道[2]。诃子果实中含丰富的鞣质和多元酚类,约为30%~40%[3]已有文献报道,鞣质和多元酚类具有较好的抗氧化性[4]。  鞣花酸(2,3,7,8-tetrahydroxybenzopyrano[5,4,3-cde]benzopyran-5,10-dione)是一种植物多酚类化合物[5](如图1),为诃子中主要的活性成分之一,广泛存在于各种自然的软果、坚果等植物果实中。它对化学物质诱导癌变及其他多种癌变有明显的抑制作用,它能与人体内有害自由基结

5、合,具有强力祛癌变功效,可以抗衰老、增加机体免疫,还具有降压、镇静作用,对多种细菌、病毒有很好的抑制作用[6]。因此鞣花酸有“克癌之星”“致癌物清除剂”之美称。从机理上讲,鞣花酸是一种抗氧化剂[7],它可作为保健食品添加剂,研究、开发本品具有较高的经济价值和广泛的应用范围。  本实验建立了hplc法测定诃子中鞣花酸含量的方法,并对文献报道的多种色谱条件进行了比较[8~10],表明本文方法精确可行。  1仪器与试剂  日本岛津spd-10at高效液相色谱仪;spd-10avp检测器;sil-10ap自动进样器;超纯水

6、器(arium611uf,sartorius);超声波清洗器(as3120a,天津瑞森特);电子天平(adventurertm,ar2140,上海奥豪斯公司);旋转蒸发仪(r-200,瑞士buchi)。岛津uv2100型,甲醇为色谱纯;实验用水为超纯水,蒸馏水自制,其它试剂均为国产分析纯试剂。  鞣花酸对照品(购自购自成都普瑞法科技开发有限公司),纯度≥98%。诃子(产自云南临仓和缅甸)。  图1鞣花酸的结构  2方法  2.1色谱条件色谱柱为岛津shim-packclc-ods柱(150mm×6mm,5μm),柱

7、温30℃,用ch3oh-etoac-kh2po4/h3po4(0.05mol/l)(体积比34∶2∶64)作为流动相,检测波长为254nm。  2.2对照品溶液的制备精密称取鞣花酸对照品6.7mg,加甲醇25ml制成每毫升含0.268mg的对照品溶液。  2.3供试品溶液的制备精密称取诃子粉(均过60目筛)约1g,置于100ml具塞三角烧瓶中,加60%乙醇25ml,超声提取60min,过滤,用60%洗涤滤渣,合并滤液和洗涤液,50℃旋转蒸干,加甲醇定容至10ml,以0.45μm微孔滤膜滤过,滤液作为样品供试液,进样

8、10μl。  2.4标准曲线制备精密吸取对照品溶液1.0,2.0,5.0,10.0,15.0,20.0μl进样,测定峰面积,并以色谱峰峰面积(a)对对照品的量(m)回归(包括原点),得回归方程为a=7.5777e+06m+9.6700e+05(r=0.9999)。鞣花酸0.268~5.36μg范围内,线性关系良好。  2.5精密度和样品重复性实验重复进对照品

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