硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响论文

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1、硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响论文.freelg·kg-1·d-1)和FeSO4低剂量组(50mg·kg-1·d-1)、中剂量组(100mg·kg-1·d-1)和高剂量组(300mg·kg-1·d-1),给药2周后分别观察大鼠的一般状态、组织病理学变化、组织及血清超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)水平。结果FeSO4中、高剂量组大鼠体质量减轻,腹泻动物数增加,结肠组织损伤加重,血清与结肠组织SOD活性降低、MDA水平升高(P0.05)。结论UC模型大鼠体内存在氧化应激,口服补充FeSO4可能会进一步加

2、剧其体内氧化应激状态及结肠组织病理学损伤。【关键词】硫酸亚铁;溃疡性结肠炎;三硝基苯磺酸;氧化应激;大鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)是一种病因不明的直肠和结肠慢性非特异性炎症,临床主要表现为反复发作的腹痛、腹泻及黏液脓血便,重症或病情持续活动的患者可出现缺铁性贫血。临床观察发现,给予UC患者口服铁剂不能很好地被耐受,甚至会加重胃肠道症状或促进疾病活动[1]。硫酸亚铁(ferroussulfate,FeSO4)是临床最为常用的铁剂之一,同时也是一种强氧化剂,可能会因产生自由基(oxygen-deriv

3、edfreeradicals,OFR)而加重组织损伤[2]。本实验利用三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonicacid,TN-BS)复制UC模型,观察FeSO4对UC模型大鼠氧化应激状态的影响,为临床治疗提供依据。1材料和方法1.1药物和试剂TNBS购于Sigma公司,5%(DA)、超氧化物歧化酶(SOD)、考马斯亮兰蛋白检测试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品,批号为20060323。1.2动物雄性SD大鼠60只,体质量200~220g,由安徽医科大学实验动物中心提供,普通级。1.3仪器756

4、MC紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),TGL-16H高速离心机(珠海黑马医学仪器有限公司),可控式硅恒温水浴锅(上海锦屏仪器仪表有限公司),QL-901漩涡混合器(江苏海门麒麟医用仪表厂),电子分析天平(上海天平仪器厂),DIAX-900内切式组织匀浆机(德国Heidolph公司)。1.4大鼠UC模型制备[3]健康大鼠60只,随机分为6组。留2组作正常对照组与FeSO4对照组,余4组均制备模型,禁食不禁水24h后,腹腔注射3%戊巴比妥钠(1ml·kg-1)使大鼠轻微麻醉后,将直径2mm的乳胶管经肛门轻轻插入大鼠体内大

5、约8cm处,将TNBS(125mg·kg-1)的50%乙醇溶液缓缓注入到大鼠肠腔内,提起大鼠尾部,倒置30s,使造模剂充分渗入大鼠肠腔。1.5分组及给药将正常大鼠随机分为正常对照组与FeSO4对照组,每组10只;将造模大鼠随机分为模型对照组,Fe-SO4给药高、中、低剂量组,每组10只。FeSO4对照组大鼠,按照100mg·kg-1·d-1灌胃FeSO4混悬液;Fe-SO4高、中、低剂量组大鼠,分别按照300mg·kg-1·d-1、100mg·kg-1·d-1、50mg·kg-1·d-1灌胃FeSO4混悬液;正常对照组及模型对

6、照组大鼠每天灌胃同体积生理盐水,各组大鼠均在造模后6h开始给药,连续给药2周。1.6症状观察每天对各组大鼠进行称重,观察体质量变化并记录;观察大鼠粪便形状,记录大鼠发生腹泻、血便的数量。1.7结肠黏膜组织损伤评分各组大鼠给药2周后,3%戊巴比妥钠过量麻醉,腹主动脉取血2ml,离心后置-80℃冰箱保存备用。将肛门以上10cm肠段取出,沿肠系膜纵行切开,用冰生理盐水冲洗,并称量。将黏膜向上展开,观察黏膜损伤并按照DA、SOD均按照检测试剂盒说明书进行操作。1.10统计学处理计量指标以x-±s表示,多组间比较行方差分析,各组间两两比

7、较行LSD检验,采用SPSS12.0软件进行统计分析。2结果2.1一般状态及大便性状的变化见表1。正常组与FeSO4对照组大鼠活动如常,反应机警,毛发有光泽,饮食正常,体质量增长较多,无腹泻及便血;制模大鼠精神萎靡,毛发无光泽,饮食减少,均出现不同程度的腹泻、便血。正常对照组与FeSO4对照组大鼠体质量增加、腹泻及便血无显著性差异;与正常对照组比较,模型对照组大鼠体质量增加明显减少(P0.01);FeSO4中、高剂量组大鼠体质量增加显著低于模型对照组(P0.05),发生腹泻、便血动物只数明显增多。表1各组大鼠发生腹泻数及体质量

8、变化(略)2.2结肠损伤评分及生化指标改变见表2。观察大鼠结肠外观及黏膜表面发现,正常对照组与FeSO4对照组大鼠结肠黏膜无明显充血水肿,未见糜烂及溃疡灶;模型对照组大鼠的结肠多数与相邻脏器有轻度的粘连,结肠充血水肿,在距肛门8cm的肠段有较大的溃疡病灶,病灶处结肠壁增厚,肠

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