卷柏对大鼠胰岛素抵抗治疗作用的活性部位筛选

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1、卷柏对大鼠胰岛素抵抗治疗作用的活性部位筛选作者：付雪艳董琳马学琴丁晓丽【摘要】目的筛选卷柏对胰岛素抵抗治疗作用的活性部位。方法AB-8大孔树脂柱色谱法制备不同极性的洗脱部位(水洗部分组、50%乙醇洗部分组、95%乙醇洗部分组)及水提液组，以高脂饮食大鼠胰岛素抵抗动物模型，检测血糖、空腹胰岛素，计算胰岛素敏感性指数，进行卷柏活性部位筛选。结果卷柏水提液及大孔树脂50%乙醇洗脱部分均能降低空腹胰岛素(P＜0.01)，提高ISI(P＜0.05)。结论卷柏水提液及大孔树脂50%乙醇洗脱部分均对大鼠胰岛素抵抗有明显的缓解作用。【关键词】卷柏胰岛素抵抗活性部位卷柏为卷柏科植物卷柏Se

2、laginellatamariscina(Beauv.)Spring及垫状卷柏S.pulvinata(Hook.etGrev.)Maxim.的全草，该属植物我国约有60～707种。具有活血通经之功效，用于经闭痛经，症瘕痞块，跌扑损伤；炒炭后可化癖止血，用于吐血、崩漏、便血、脱肛［1］。文献报道［2］卷柏水提液对多果糖餐大鼠胰岛素抵抗动物模型有明显的改善作用，但未见其作用物质基础的相关报道。本实验以活性部位对胰岛素敏感性指数影响为指标，筛选了卷柏治疗胰岛素抵抗的活性部位，为进一步的成分分离及机制研究提供实验依据。　　1材料与方法　　1.1实验动物清洁级SD大鼠，雄性，体重1

3、80～220g，购自宁夏医科大学实验动物中心，动物生产许可证编号：SCXR(宁)2005-001，自由摄食和饮水，室温保持在(20±2)℃，湿度(50±1)%。适应性喂养1周实验。　　1.2药材卷柏购自毫州药材市场，经宁夏药检所鉴定为卷柏。　　1.3试剂与材料盐酸二甲双胍片，批号20070915，规格0.5g/片，杭州中美华东制药有限公司生产；血糖试剂盒(葡萄糖氧化酶法)，购自保定长城临床试剂有限公司；胰岛素放射免疫分析试剂盒购自北京普尔伟业生物科技有限公司；AB-8型大孔吸附树脂，购自南开大学化工厂。　　1.4仪器HH-501二联可调电热器(江苏省丹阳县医疗器械二厂)；

4、RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；GC-1200γ放射免疫计数器(科大创新有限公司中佳分公司)。7　　1.5样品制备取卷柏2kg，粉碎，水煎煮3次，每次1h，滤过，合并提取液，浓缩得水提液(1mg/mL)。所得水提液经大孔树脂柱层析(树脂与生药质量比为1∶1)，分别经水、50%乙醇、95%乙醇洗脱，得各个洗脱部位，浓缩后备用。　　1.6实验方法大鼠70只，随机分为7组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、盐酸二甲双胍组(阳性药组)、卷柏水提液组、大孔树脂水洗脱组分(简称水组分)、大孔树脂50%乙醇洗脱组分(简称50%组分)、大孔树脂95%乙醇洗脱组分(简称9

5、5%组分)。正常对照组给予普通饲料喂养，其余组给予高热量饲料(饲料组成：猪油15%，花生10%，蛋黄粉及糖、盐等，其余为基础饲料［3］)喂养12周。自10周始，正常对照组和模型组灌胃(ig)给予等体积生理盐水，阳性药物组给予盐酸二甲双胍(0.33g/kg·d)，ig；治疗组分别给予卷柏水提液(0.08g/kg·d)，水组分(0.039g/kg·d)；50%组分(0.028g/kg·d)；95%组分(0.012g/kg·d)，ig，共给药2周(以临床剂量为依据，由人鼠换算公式及提取分离转化率换算而得)。末次给药2h后，大鼠眼眶静脉取血，分离血清，置-20℃冰箱保存，备用。血

6、糖、空腹胰岛素水平测定，按试剂盒说明进行操作。胰岛素敏感性指数，按公式ISI＝Ln［1/(FINS×FBG)］计算［4］。　　1.7统计学方法采用t检验，实验结果以(±s)表示，数据用SPSS12.0软件处理。P＜0.05为差异有统计学意义。7　　2结果　　2.1卷柏各组分对胰岛素抵抗大鼠一般状态的影响与正常对照组比较，模型组体毛松散，行动迟缓。给药后，大鼠精神状态有明显的改善。　　2.2卷柏各组分对胰岛素抵抗大鼠血糖、空腹胰岛素，胰岛素敏感性指数的影晌　　2.2.1对血糖的影响　　与正常对照组比较，模型组能够显著升高血糖(P＜0.05)，与模型组比较，阳性药组和卷柏水提

7、液组对血糖有降低作用(P＜0.05)，其余组分无统计学意义(P＞0.05)。　　2.2.2对空腹胰岛素的影响　　与正常对照组比较，模型组显著升高空腹胰岛素水平(P＜0.05)；与模型组比较，阳性药组、卷柏水提液组和50%对空腹胰岛素水平有降低作用(P＜0.05)，其余组分差异无统计学意义(P＞0.05)。7　　2.2.3对胰岛素敏感性指数的影响　　与正常对照组比较，模型组能显著降低胰岛素敏感性指数(P＜0.05)；与模型组比较，阳性药组、卷柏水提液组和50%乙醇组对胰岛素敏感性指数有升高作用(P＜0.05)，其余组分无统计学意