枯草芽孢杆菌培养条件的优化研究

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1、毕业设计(论文)课题名称枯草芽孢杆菌培养条件的优化研究2014年5月15日目录摘要2Abstract31前言42材料与方法72.1实验试剂与材料72.2主要仪器与设备72.3试验方法83结果与分析83.1枯草芽孢杆菌的标准曲93.2单因素试验结果103.3正交试验结果分析134结论和讨论155参考文献166致谢1718枯草芽孢杆菌培养条件的优化研究摘要本文通过单因素实验和正交试验研究枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的发酵条件（PH、温度、时间、接种量）对枯草芽孢杆菌生长量的影响。本实验的枯草

2、芽孢杆菌在BPG液体培养基上培养，通过单因实验及正交试验得到最佳的发酵培养条件为：初始pH7.0；温度35℃；时间20h；接种量为5%。在此培养条件下的活菌液量为3.785×107CFU/ml，相比在LB培养基下培养时的活菌液量3.2×106CFU/ml提高了10倍左右。关键字：枯草芽孢杆菌；正交试验；生长量18OptimizationstudyofbacillussubtiliscultureconditionsAbstractInthispaper,westudyBacillussubtilis(Bac

3、illussubtilis)fermentationconditions(PH,temperature,time,quantityof)theimpactonthegrowthofBacillussubtilis.Theexperimentofbacillussubtilisincombinedcultivatedinliquidmedium,isobtainedbysingleforexperimentandtheorthogonalexperimentthebestfermentationculture

4、conditionsasfollows:theinitialPH7.0.Temperature35℃;Time20h;Inoculationquantitywas5%.Undertheconditionofthecultivationofthebestamountofbacteriumfluidis3.785x107cfu/ml,comparedtowhenculturedinLBmediumunderthemicrobialquantity:3.231x107cfu/mlbyabout10times.Ke

5、ywords:Bacillussubtilis;Cultureconditions;increment181前言枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)是一种好氧性产芽孢杆状细菌(G+)[1]，其基本特征：杆菌：一般0.7-0.8×2.0-3.0µm，电子显微镜测量为0.5-0.6×1.1-3.5µm，着色均匀，无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时

6、，常形成皱醭。由于枯草芽孢杆菌是需氧菌在水质净化[2]、工业发酵中发挥着重要的作用，人们开始致力于研究枯草芽孢杆菌应用于这些方面的研究。关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史，早期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功能发掘及防治等方面。近年来，对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物学领域，研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆菌生产菌进行遗传改造等。但目前对该菌种的研究仍然处于实验室的初始阶段的水平。但是枯草研报杆菌有一系列的优

7、良性状吸引这一些的科学家的目光，他们相信随着经济的发展，枯草芽抱杆菌资源对在工、农、医等方面有重大应用价值，开发利用更具有重要意义。枯草芽孢杆菌是一类广泛分布于各种不同生活环境中的革兰氏阳性杆状好养型细菌，可以产生内生芽孢，耐热抗逆性强[3]，在土壤和植物的表面普遍存在，同时还是植物体内常见的一种内生菌，对人畜无毒无害，不污染环境。由于枯草芽孢杆菌生长速度快，营养需求简单，易于存活，定殖与繁殖，无致病性，并可以分泌多种酶和抗生素[4,5]，而且还具有良好的发酵基础，用途十分广泛，国内外有众多研究单位和学者对

8、此菌进行了大量研究，也积累了丰富的研究资料。通过对枯草芽孢杆菌系列的研究，一方积累枯草芽孢杆菌规律信息为以后开发提供依据；另一方面也可了解芽孢杆菌与生态环境间的相互关系，为芽孢杆菌资源的利用奠定基础[6]。现在对于枯草芽孢杆菌的主要运用方面：（1）在水产养殖中的应用18随着水产养殖业的迅猛发展和集约化经营程度的不断提高，养殖水体污染日趋严重，许多养殖池中有害藻类及病菌大量繁殖，水质条件不断恶化，其后果影响到了水产