第七章食品微生物自动化仪器检测2015068

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1、第七章食品微生物自动化仪器检测第一节全自动微生物鉴定仪器1第二节全自动微生物总数和大肠杆菌快速测定仪器2第三节其他快速测定仪器3章节安排6[目的与要求]（1）熟悉微生物自动化仪器检测原理；（2）熟悉全自动微生物鉴定仪检测原理；（3）熟悉微生物总数测定仪检测原理；（4）熟悉全自动大肠杆菌快速测定仪检测原理。[难点与重点]难点：微生物自动化仪器检测原理；全自动微生物鉴定仪检测原理；微生物总数测定仪检测原理；全自动大肠杆菌快速测定仪检测原理。重点：全自动微生物鉴定仪检测原理；微生物总数测定仪检测原理检测和鉴定细菌的标准方法是什

2、么？课堂提问：传统的微生物学鉴定方法分离培养染色镜检药物敏感实验生理生化反应传统的微生物学鉴定方法过程烦琐费时费力易发生主观片面错误质量控制难微生物学技术方法快速、准确、简易和自动化?微电子学化学计算机学分子生物学物理学渗透交叉微生物学自动化检测系统一、ATBExpression细菌鉴定智能系统第一节全自动微生物鉴定仪器用于细菌的快速鉴定，细菌的鉴定是细菌分类的实验过程，即将未知细菌按分类原则放入某系统中的适当位置与已知细菌比较，如果相同就采用已知细菌的名称；不同则按命名原则，确定一个新的名称。第一节全自动微生物鉴定仪器

3、一、ATBExpression细菌鉴定智能系统第一节全自动微生物鉴定仪器一、ATBExpression细菌鉴定智能系统ATBExpression是自动化微生物鉴定和药敏分析系统，它是从API系统发展而来，由法国生物--梅里埃研制生产。以API试剂条为基础，测试品种齐全，共有750种反应，电脑数据库不断地完善和补充，鉴定能力强，可鉴定近700多种细菌。各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之

4、为细菌的生理生化反应。1.糖（醇）类发酵试验API鉴定原理常见的生理生化反应包括：（1）糖（醇）类发酵实验；（2）甲基红试验（M.R试验）；（3）Voges-Proskauer试验（伏-普试验，V.P.试验）；（4）靛基质试验（吲哚实验）；（5）硫化氢产生试验（三糖铁实验）；（6）明胶液化实验；（7）柠檬酸盐利用试验；（8）淀粉水解实验（9）尿酶；（10）氧化酶；（11）赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶；（12）半乳糖酶；（13）触酶实验（过氧化氢酶）甲基红实验（MR实验）糖（醇）类发酵实验V.P.实验﹢﹣﹣﹢溴甲酚紫［PH5.2（

5、黄色）-6.8（紫色）]甲基红pH4.4（红色-pH6.2（黄色）甲基红试验是检测由葡萄糖产生的有机酸。当细菌代谢糖产生酸时，培养基变酸，培养基中甲基红指示剂由橘黄色变为红色。VP试验是测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力﹣﹢吲哚实验﹢﹣柠檬酸盐利用试验：有的细菌如产气杆菌，能利用柠檬酸钠为碳源，能在柠檬酸盐培养基上生长，并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐，使培养基变为碱性。此时培养基中的溴麝香草酚蓝（变色范围pH6.0(黄)～7.6(蓝)）指示剂由绿色变为深蓝色。对二甲基氨基苯甲醛硫化氢产生试验淀粉水解实验某些

6、细菌能分解含硫的氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸等)，产生硫化氢，与乙酸铅试纸条反应，产生黑色物质。微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解成小分子物质才能被微生物吸收利用。胞外酶主要是水解酶，通过加水裂解大分子物质为较小的化合物，使其能被运输到细胞内。Microbact生化鉴定试剂盒（18-24h出结果，约200种细菌。）第一节全自动微生物鉴定仪器一、ATBExpression细菌鉴定智能系统API细菌鉴定系统（生物梅里埃）鉴定产品包括试剂条和数据库，试剂条通常包含20个微量生化试验。

7、目前系列提供的16个产品鉴定范围涵盖几乎所有的细菌群，超过550个不同的种。第一节全自动微生物鉴定仪器一、ATBExpression细菌鉴定智能系统API细菌鉴定系统（生物梅里埃）将操作繁琐、解释冗长的传统方法微量化和标准化，将生化试验试剂条和数据库结合起来，使鉴定工作变得容易、快速和安全。这一创新得益于数值鉴定法的发展。API细菌鉴定系统ATCC成立于1925年，是世界上最大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向全球发布其获取、鉴定、保存

8、及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步。（一）系统原理1．微生物数值编码鉴定技术?细菌的编码鉴定法采用21项生化指标，每3项一组，共7组。每组3项生化试验，阳性结果数值分别记为1、2、4，反应阴性者记为0，尔后，分别将各组数值相加，依次组成一组7位数值的编码，即代表所鉴定的菌株的相应菌名。查《革兰氏阴性杆