tsg101在食管癌、胃癌及大肠癌中的表达及义

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1、TSG101在食管癌、胃癌及大肠癌中的表达及义【关键词】食管肿瘤；胃肿瘤；大肠肿瘤；免疫组织化学ExpressionandSignificanceofTheTumorSusceptibilityGeneTSG101inCarcinomaofEsophagusandGastrointestinalTractKeya；Gastriccarcinoma；Colorectalcarcinoma；Immunohistochemistry肿瘤易感基因101(Tumorsusceptibilitygene101,TSG101)由Li等［1］应用随机纯合子敲除技术(randomh

2、omozygousknockout，RHKO)于1996年发现，TSG101功能失活可引起小鼠NIH3T3成纤维细胞的恶性转化,给裸鼠皮下注射该转化细胞可形成肿瘤并发生转移；恢复TSG101功能可逆转部分细胞的恶性表型,因此它被认为是一个肿瘤抑制基因。随后,Li等［2］克隆到了人的TSG101基因(hTSG101),定位于染色体11p15.1-p15.2区。已有研究认为TSG101基因的表达异常可能与乳腺癌的发生有关，TSG101在人消化道恶性上皮性肿瘤发生、发展过程中的可能作用国内仅见个别报道，我们应用免疫组化的方法检测TSG101蛋白在食管癌、胃癌及大肠癌共9

3、7例石蜡包埋标本中的表达。1材料与方法1.1标本收集暨南大学第一附属医院（广州市华侨医院）病理科2002年～2004年，及暨南大学第四附属医院（广州市红十字会医院）病理科2004年9月～12月经手术切除的食管癌、胃癌及大肠癌石蜡包埋标本。所有标本经病理确诊，资料完整，手术前均未行放、化疗或生物治疗。根据中国肿瘤病理学分类［3］对所有标本进行组织学分型、分级。食管癌标本共25例：均为鳞状细胞癌，其中Ⅰ级3例，Ⅱ级12例，Ⅲ级10例。胃癌标本共32例：管状腺癌10例（其中高分化1例，中分化9例），黏液腺癌（高分化型）4例，低分化腺癌15例，未分化癌3例。大肠癌标本共4

4、0例：乳头状腺癌5例，管状腺癌30例（Ⅰ级7例，Ⅱ级15例，Ⅲ级8例），黏液腺癌5例。1.2主要试剂与方法免疫组化所用的TSG101一抗为Dako公司的鼠抗人单克隆抗体，即用型非生物素免疫组化试剂盒，以及DAB酶底物显色试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司。所有标本均经10%中性甲醛固定，石蜡包埋，4μm连续切片，行HE常规及免疫组化染色。免疫组化染色采用二步法，TSG101抗原经高压修复，一抗工作浓度是1:100，实验步骤按照试剂盒说明书操作，以TBS代替一抗作为阴性对照。1.3免疫组化结果判断TSG101蛋白定位于癌细胞胞浆内，呈细或稍粗的棕黄色颗粒状。以着色强

5、度高于背景非特异性染色者为阳性表达。每张切片随机选取5个高倍视野，首先按阳性细胞所占百分比评分：阴性为0分，阳性细胞数≤10%为1分，11%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分；再按染色强度评分：无色为0，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；最后按二者乘积分数分为4个等级：“-”（0，1，2），“+”（3，4），“++”（6，8），“+++”（9，12）。我们将分数≥3定为阳性，<3为阴性［4］（图1，2）。1.4统计学方法采用SPSS10.0统计软件处理,四格表资料的χ2检验以及多个样本比较的秩和检验（KruskalWalli

6、s法），检验水准α＝0.05。2结果2.1TSG101蛋白在食管癌中的表达与其组织分化程度的关系(见表1)25例食管鳞状细胞癌的高、中、低分化组中，TSG101表达的阳性率分别为100%（3/3例），66.7%（8/12例），20%（2/10例）。经统计学分析，高分化组和中分化组的TSG101阳性率差异无显著性，P＝0.516；高、中分化组与低分化组之间P＝0.015（P<0.05），差异有统计学意义。2.2TSG101蛋白在胃癌中的表达与其组织分型及分化程度的关系(见表1)TSG101在32例胃癌组织中表达的阳性率分别为：管状腺癌50%（5/10例），黏液

7、腺癌（高分化型）75%（3/4例），低分化腺癌6.7%（1/15例），未分化癌为0。经统计学分析后分为高、中分化组与低、未分化组,进行Fisher'sExactTest，P＝0.004（P<0.05），差异有显著性。2.4TSG101蛋白在食管癌、胃癌及大肠癌组织中表达的比较（见表2）表2TSG101在食管癌、胃癌及大肠癌中表达的比较TSG101在食管癌、胃癌及大肠癌中表达的阳性率分别为52.0%（13/25），28.1%（9/32），62.5%（25/40），经统计学分析，χ2＝1.861，P＝0.172（P>0.05），认为各组之间差异无显著性。3

8、讨论既往的