柑桔皮总黄酮的提取及鉴别论文

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1、柑桔皮总黄酮的提取及鉴别论文黄锁义，罗燕，张婧萱，王三艳，陆辉宇【关键词】柑桔皮；,,总黄酮；,,提取；,,鉴别摘要：目的为充分利用柑桔植物资源，避免资源的浪费，探讨柑桔皮中总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用纯物理的工艺流程和分光光度法从柑桔皮中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证。结果测得柑桔皮样品中总黄酮的含量C=4.49%。回收率为98.0%.freelOrangePeelAbstract：ObjectiveInordertomakeuseoftheresourcesoforangepeel,avoidingetr

2、ytointroducethemethodoftheorangepeel,andchecktheflavanonethelotusrhizome.ResultsBythismethodgettingthecontentsofthetotalflavanoneoforangepeelisC=4.49%andrateoftherecoveryis98.0%.ConclusionUsingthistextethodstogettheouteandpurityoftheflavanoneareallveryhigh.Thismetho

3、dispurelyphysicalprocess,andhasnochemicalchangeandpollution.Itisidealtoin，1500r/min。并进行加热浓缩（加热温度在85℃左右）。浓缩冷却后加入等体积95%乙醇，放入冰箱内2h。用高速离心机进行分离15min，1500r/min。过滤得滤液滤渣，弃去滤渣。对滤液进行蒸发浓缩（加热温度在85℃左右）。待乙醇蒸发完后，将浓液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体，粉碎得终产物。1.3定量实验-总黄酮的含量测定1.3.1实验原理采用硝酸铝比色法。黄酮类物质是以2-

4、苯基并吡喃酮为母核的多羟基化合物，可与糖苷类物质遇碱变成明显黄色，其机制是黄酮类物质在碱性条件下其苯吡喃酮的1，2碳之间的C-O键打开成查耳酮的检测方法常用分光光度计法或液相色谱法。分光光度法以用黄酮与铝离子在碱性与亚硝酸存在条件下形成黄酮的铝络合物，生成稳定的黄色。黄色的深浅与黄酮含量呈一定的比例关系，可以芦丁(标准样)作对照，于500nm［3］波长处比色定量测定。1.3.2标准曲线的制备①标准溶液的制备：精密称取芦丁对照品200mg，置于100ml容量瓶中，加入95％乙醇溶液并稀释至刻度，摇匀。精密称取10ml置于100m

5、l容量瓶中，加入95%乙醇使成100ml,摇匀即得（每毫升含有无水芦丁0.2mg）②标准曲线的制备：精密吸取对照溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，12.0ml分置于50ml容量瓶中，各加95%乙醇12ml，加5%亚硝酸钠溶液2.0ml，混匀，放置6min，再加10%硝酸铝溶液2.0ml，放置6min，加5%氢氧化钠溶液20ml，最后用95%乙醇稀释至刻度，摇匀，以第一瓶为空白溶液，用UV755B紫外可见分光光度计，在500nm上测定吸光度。结果见表1。表1分光光度法测定吸光度结果（略）根据上表得一回归方程：A=1.2

6、433C0.0081，r=0.9991,n=5，其中截距0.0081，斜率为1.2433。1.3.3提取物含量的测定精密称定提取物1.5000g，置索氏提取器中，加95%乙醇回流至无色（6~8h），将提取液置于烧杯中，水浴加热浓缩至干，再用热水洗涤3次，将洗液移至分液漏斗中，并加无水正丁醇液萃取3到5次，每次10ml,.freell容量瓶中，再加95%乙醇至刻度，摇匀。精密取10ml于50ml容量瓶中加95%乙醇至刻度，摇匀，按标准曲线的制备操作测定吸光度，A=0.328。1.3.4颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤

7、纸上，在可见光下呈淡黄色，在紫外光下呈淡蓝色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点。乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。盐酸镁粉反应：取乙醇提取液1ml于试管中加镁粉，再加入浓的盐酸数滴（1次加入），在泡沫处呈紫红色。1.3.5纸层析取样品溶液10μl点在滤纸上。用正丁醇∶醋酸∶水

8、=4∶1∶5为展开剂，上行展开5h，取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可见荧光斑点。2结果A=0.328，根据回归方程：A=1.2433C-0.0081，计算样品中总黄酮的含量C=4.49%。回收实验：精密称提取物1.5000g，加入芦丁对照品1.0000g，