蜂胶提取物对荷瘤小鼠肿瘤免疫系统的影响研究

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1、蜂胶提取物对荷瘤小鼠肿瘤免疫系统的影响研究【关键词】蜂胶提取物；,,小鼠；,,免疫功能　　摘要：目的观察蜂胶提取物对荷瘤小鼠免疫系统的影响。方法通过将荷瘤小鼠移植S180肉瘤，观察蜂胶提取物对荷瘤小鼠NK细胞活性，淋巴细胞增殖以及淋巴细胞IL2诱生的影响。结果蜂胶提取物对NK细胞杀伤活性有明显增强作用，能够显著提高淋巴细胞增殖能力和IL2的含量（P＜0.01）。结论蜂胶提取物能够显著提高荷瘤小鼠免疫系统的活性。　　关键词：蜂胶提取物；小鼠；免疫功能　　EffectofEthanolExtractfromPropolisonCellIm

2、munityofTumorbearingMice　　PANMing　　(DepartmentofBioengineering，SichuanInstituteofScienceandTechnology，Zigong643000，China)　　Abstract：ObjectiveTostudytheinfluenceofethanolextractfrompropolisoncelularimmunityofmicebearingtumor．MethodsEffectofethanolextractfrompropolisonNKc

3、ellsreactive,lymphocyteproliferationandlymphocyteIL2luredhealthoftumorbearingmicetumorbearingmice．ResultsEthanolextractfrompropoliscouldstrengthenNKcellantireactive，increaselymphocyteproliferationandthecontentofIL2（P＜0.01）．ConclusionEthanolextractfrompropoliscansignific

4、antlyimprovetheimmunityactivityofmicebearingtumor．　　Keypropolis；Mice；Immunefunction　　蜂胶是蜜蜂巢中的一种树脂状物质，含有多种化学成分，有研究者提出其中的黄酮类、槲皮素、多糖等具有抗肿瘤及免疫调节等功效［1～3］。在对其免疫增强作用的系统研究中发现，蜂胶提取物能够刺激免疫机能和丙种球蛋白活性，增加抗体生成量，增强巨噬细胞的吞噬能力，从而提高机体抵抗力、抑制癌细胞生长［4～8］。本实验对蜂胶提取物抗肿瘤及其作用机制进行了初步研究，现报告如下。　　1材料与

5、方法　　1.1材料　　1.1.1动物昆明种标准小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由四川大学动物实验中心提供；BalB/C纯种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由成都中医药大学动物中心提供。　　1.1.2蜂胶提取物由本实验室制备，将蜂胶粗品用80%的乙醇提取，回收乙醇，浓缩而得。　　1.1.3肿瘤细胞株S180肉瘤，经小鼠腹腔传代保种，由生命科学学院试验室提供。L929细胞，由生命科学学院实验室提供。　　1.1.4主要试剂与仪器RPMI1640；小牛血清；胎牛血清；a甲基甘露糖苷（amm）；刀豆蛋白A(ConA)；Sigma产四甲基偶唑

6、蓝(MTT)；CO2培养箱；酶标仪。　　1.2实验方法［9］菌取传代6d的S180肉瘤细胞悬液，经生理盐水稀释后调细胞数至4×107/ml，每只小鼠腋下接种0.2ml，24h后随机分组：蜂胶提取物组小鼠每天按0.1ml/10g体重腹腔注射蜂胶提取物(15mg/ml)，1次/d，连续7d，荷瘤模型组小鼠每天按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水，环磷酰胺（CY）组小鼠每只每天腹腔注射环磷酰胺0.4mg/ml，途径、方法、次数同蜂胶提取物组，另设正常对照组小鼠注射生理盐水，途径、剂量、方法同荷瘤模型组，于接种肿瘤后第12天各组小鼠分别颈

7、椎处死取脾进行以下实验。　　1.2.1NK细胞杀伤活性的测定小鼠脾脏NK细胞的获得：常规方法制备脾细胞，计数，调细胞数至1×107个/ml，即为备用的NK细胞。靶细胞：传代培养的L929细胞在试验时用0.25％胰蛋白酶消化1～2min，加完全1640培养液轻轻吹打细胞，离心将细胞重悬于含10%小牛血清的1640培养液中，调细胞数至2×105个/ml，即为备用的NK细胞的靶细胞。NK细胞活性的测定：取事先配好的靶细胞悬液加入96孔板中，0.1ml/孔，然后培养箱中培养1h，向每孔加入0.1ml效应细胞（使效靶比例50：1），靶细胞对照孔

8、加完全16400.1ml，各设4个复孔，再放入培养箱中培养20h，MTT法检测NK细胞活性。　　杀伤率（%）＝（靶细胞OD值－实验组OD值）靶细胞OD值×100％　　1.2.2淋巴细胞增殖反应的测定常规制备1×107/m