氢气水对大鼠碱烧伤角膜新生血管抑制作用及机制研究.pdf

《氢气水对大鼠碱烧伤角膜新生血管抑制作用及机制研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：密级：公开学号：2015202122单位代码：10759石河子大学硕士学位论文氢气水对大鼠碱烧伤角膜新生血管抑制作用及机制研究学位申请人温舒指导教师杨炜申请学位门类级别医学硕士学科、专业名称眼科学研究方向眼表疾病及白内障治疗所在学院医学院中国·新疆·石河子2018年5月Inhibitoryeffectandmechanismofhydrogenwateroncornealneovascularizationinducedbyalkali-burninratsADissertationSubmitt

2、edtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByShuWenDissertationSupervisor:WeiYangMay,2018中文摘要目的：研究氢气水滴眼对碱烧伤诱导的大鼠角膜新生血管的抑制作用，通过检测在氢气水干预条件下角膜及房水组织中肿瘤坏死因子α和色素上皮衍生因子PEDF的变化，探讨角膜病理性血管形成的相关机制。方法：1.选取SPF级，6-8周龄，体重（180

3、±20）g雄性SD大鼠，均将右眼作为实验眼。2.制作碱烧伤诱导的角膜新生血管模型，成功建立48眼，将其按随机化原则进行分组，分为阴性对照组、阳性对照组和治疗组。3.阴性对照组给予生理盐水滴眼，阳性对照组给予妥布霉素地塞米松眼液滴眼，治疗组给予1.6PPM（partpermillion）氢气水滴眼。均为每次一滴，每日四次，持续14天。4.在模型建立后，采用裂隙灯显微镜分别观察第1天、第3天、第7天和第14天的角膜基本情况，拍照后使用DigimizerImageAnalysis软件测量并记录新生血管长度，计算

4、新生血管生长面积。5.在碱烧伤后第14天，水合氯醛腹腔麻醉，在无菌条件下取大鼠角膜组织并抽取房水。6.苏木精-伊红染色技术观察角膜组织病理学变化；7.免疫组织化学染色技术检测角膜组织色素上皮衍生因子PEDF蛋白表达。8.实时荧光定量PCR技术检测角膜组织色素上皮衍生因子PEDFmRNA含量。9.酶联免疫吸附测定技术检测房水内肿瘤坏死因子TNF-α蛋白含量。结果：1.碱烧伤后第3、7天和14天，阴性对照组新生血管面积分别为（9.49±2.79）mm2、（17.71±4.06）mm2和（25.35±1.40）

5、mm2；阳性对照组新生血管面积分别为（4.27±2.68）mm2、（6.44±4.67）mm2和（15.98±4.75）mm2；治疗组新生血管面积分别为（3.26±1.82）mm2、（8.59±3.98）mm2和（3.24±2.34）mm2；在第3、7和14天，治疗组和阳性对照组血管面积均小于阴性对照组，差异均有显著统计学意义（均为P<0.01）；碱烧伤第3天，虽然治疗组新生血管面积小于阳性对照组，但相差不大，差异无统计学意义（P>0.05）；碱烧伤第7天，虽然治疗组血管面积大于阳性对照组，但相差仍然较小

6、，差异无统计学意义（P>0.05）；在碱烧伤后第14天，治疗组血管面积明显小于阳性对照组，差异具有显著统计学意义（P<0.01）。2.碱烧伤第14天，HE常规染色及免疫组织化学染色结果提示：治疗组角膜组织中PEDF蛋白表达较阳性对照组和阴性对照组明显增强，基质层新生血管极少；3.碱烧伤第14天，实时荧光定量PCR结果提示：治疗组角膜组织中PEDFmRNA含量明显高于阳性对照组和阴性对照组，差异均有统计学意义（均为P<0.01）；I4.碱烧伤第14天，酶联免疫吸附测定结果提示：治疗组房水中TNF-α蛋白含量

7、明显低于阳性对照组与阴性对照组，差异均有显著统计学意义（均为P<0.01）。结论：采用1.6PPM氢气水滴眼，能够通过调控肿瘤坏死因子TNF-α，上调色素上皮衍生因子PEDF在眼内的表达，继而有效抑制碱烧伤诱导的大鼠角膜新生血管。关键词：氢气水；角膜新生血管；色素上皮衍生因子PEDF；肿瘤坏死因子α论文类型：A（基础研究）IIAbstractObjective：Toobservetheinhibitoryeffectofhydrogenwateroncornealneovascularizationind

8、ucedbyalkaliburninratsandinvestigatethemechanismofcornealpathologicalangiogenesisthroughthechangesofTNF-αandPEDFinthecorneaandaqueoushumorundertheconditionofhydrogenwaterinterference.Methods：1.TheSPFmaleSDratswerese