解淀粉芽胞杆菌对乳鼠感染轮状病毒防治作用研究

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1、分类号：S182单位代码：10193密级：公开学号：20130680专业硕士学位论文解淀粉芽胞杆菌对乳鼠感染轮状病毒防治作用研究StudiesontheeffectsofBacillusamyloliquefaciensinpreventionandtreatmentofrotavirusinfectivesucklingmice作者姓名：李静学位类别：兽医硕士专业名称：兽医硕士研究方向：微生态制剂指导教师：徐凤宇教授所在学院：动物科学技术学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文

2、是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位

3、期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人(同意/不同意，务必打印后填写)吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版(涉密学位论文解密后应遵守此协议)。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字

4、日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要轮状病毒病是由轮状病毒感染引起的初生动物消化机能紊乱的一种肠道传染病，临床上以腹泻、脱水为主要特征，给我国的畜牧业生产造成重大损失。目前对于轮状病毒病的治疗没有特效药物，一般以预防为主。因此，寻找安全、有效的预防和治疗轮状病毒病的制剂显得尤为重要。研究表明，芽胞杆菌中的个别种类可以产生抗病毒物质。所以本试验旨在获得既具有抗菌又具有抗病毒活性的益生芽胞杆菌，为拓展微生态制剂的功能奠定一定基础。试验采集20份不同地点的土壤样品，分别以金黄色葡萄球菌和大肠杆

5、菌为指示菌，采用平板涂布法，筛选出具有抗菌作用的芽胞杆菌4株，分别命名为YI-1、YI-3、YI-7、YI-8。经过小鼠毒性试验及耐人工胃酸、人工肠液试验对这4株菌进行复筛，结果发现菌株YI-1具有安全、可抗人工胃酸、人工肠液的特点。经分子生物学和柠檬酸盐试验鉴定该菌为解淀粉芽胞杆菌。用MA-104细胞培养轮状病毒，测定病毒滴度。试验乳鼠随机分为5组，分别为阴性对照组、阳性对照组、治疗组、预防组、细菌与病毒体外作用组，6日龄灌服病毒，每日观察乳鼠精神状态、排便情况，并在接种病毒后的48h、96h、

6、168h，每组随机取2只脱颈处死后，剖检观察消化道病变。同时分别取空肠、回肠组织，用甲醛固定，做石蜡切片，用HE染色后测定各组的空肠、回肠绒毛高度。结果显示在接种病毒后的96h，5组乳鼠的腹泻率分别为0%、100%、66.7%、28.5%和0%；剖检可见发病鼠空肠、回肠内充满气体，肠壁变薄，肠黏膜脱落；制备的病理切片经HE染色可见发病乳鼠空肠、回肠部分肠壁水肿，肠上皮细胞间连接被破坏；肠绒毛肿胀、变短；微绒毛排列紊乱。用SPSS17.0统计软件对测得的空肠、回肠绒毛高度进行分析，结果显示各组间肠绒

7、毛高度差异显著，具有统计学意义。关键词：解淀粉芽胞杆菌，分离鉴定，轮状病毒，防治IAbstractRotavirusdisease,causedbyrotavirus,isainfectiousdiseasewhichleadstothenewbornanimalsdiarrheaanddehydration.Atpresent,thereisnospecificdrugforthetreatmentofrotavirusdisease.Therefore,it'sparticularlyimpo

8、rtanttofindthesafeandeffectiveagentstopreventandtreatthisdisease.StudieshaveshownthattheindividualBacillusspeciescouldproducetheantiviralsubstances.Sothisexperimenttoobtainwithantibacterialandantiviralactivityofprobioticbacillusstrains,andtoex