解淀粉芽胞杆菌生物防治扩展青霉的机制及苹果采摘后防腐保鲜技术研究.pdf

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1、分类号：１０６９７；Ｑ９３学校代码１１０１６５；２０１密级；公开学号诱±專恆巧交ＤＯＣＴＯＲＡＬＤＩＯＮＩＳＳＥＲＴＡＴ解淀粉芽胞軒菌生物防治护展青霉的机制及革果义揣后防腐保鲜技术研究学科；＾称：微生物學、作者：陈五岭教授：付瑞敏指导老师西北大学学位评定委员会二〇—六年Ｖ：ＢｉｏｃｏｎｔｒｏｌＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＢａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｕｅａｃｉｅｎｓａａｉｎｓｔＰｅｎｉｃｉｌｌｕｍｅｘａｎｓｕｍｑｆｇｐａｎｄ－ｉｎ

2、ＳｔｕｄＰｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅａｎｄＦｒｅｓｈｋｅｅｏｎｐｇｙＰｏｓｔｈａｒｖｅｓｔＡｌｅｓｐｐＡ化的ｉｔｓｓｕｂｍｈｔｅｄｏＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎａｒｔｉａｌｆｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅｒｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｐｑｆｏｒ化ｅｄｅｒｅｅｏｆＤｏｃｔｏｒｏｆＰｈｉｌｏｓｏｈｇｐｙｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＢｙＦｕＲｕｉｍｉｎＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：ＣｈｅｎＷｉｌｌｉｎＰｒｏｆｅｓｓｏｒｐｇ

3、Ｍａｙ２０１６西北大学学位论文知ｉＲ产权声明书本人完全了解西北大学关于收集、保存、使用学位论文的规定。学校有权保留并向国家有关部ｎ或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后适用本声明。若＂每学位论文作

4、者签名；指导教师签名；言Ｉ居年会／义日＞＾／占年月《月日助ｆｃ大学学位论文独合惟声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下进巧的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，本论文不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西北大一学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：切為７心＞／名年６月日摘要巧要扩展青霉

5、（＆？？切７？？１ｅＷＡＷＩ／Ｗ）（ａｔｕｌｉｎＰＡＴ）巧及其水溶性代谢产物展青霉素ｐ，是导致苹果采后腐烂及苹果制品污染的重要因素。为减少由感染Ｐｅｘｐａｗｗｍ所致的苹果采后腐烂并提富胆藏期间的果实品质，本研究采用原位筛选、沪注入诱变技术选育出一ｅｘ－－株可高效抑制Ｐ／ＷＭＭＷ的茵株ＢＡ１６８，并Ｗ该菌为试材，分别对其抑菌活性、去除ＰＡＴ能力、抗菌物质的鉴定、抗菌机制、作为生物活性膜对苹果采后的防腐保鲜及生物安全性进斤了深入研究，得到如下结论。－经形态学从苹果表面原

6、位分离出可有效抑制ｅｘ／ｗｗＭ／Ｍ的菌株ＢＡ１６，、ＡＰＩ５０ＣＨ鉴定和１６ＳｒＤＮＡ系统发育等分析，该菌株被鉴定为解淀粉芽抱杆茵（公ｆｌｃＷｗａ巧ｖ／ｏ／句Ｍｃ／ｏｃ化Ｗ）。Ｗ妒注入技术对其进行诱变选育，获得抗菌性能强且遗传性能稳定－－经检测的突变株化ｆｌｗｉ如卿ｗｅ知麻０５ＢＡ１６８，，该菌株的菌悬液及无细胞发酵液可抑制ｅｘｗｗＭＷ的生长及ＰＡＴ的分泌量。／Ｋ麻ＢＡ－－为明确菌株公．口／Ｍｉ１６８措抗／！ｅＰＣＲ巧如旬ｇ／巧的关键物质，采用技术对菌株基因组进行脂肤抗

7、生素合成相关基因检测；采用高效液相色谱对菌株发酵液中的脂化类抗生素进巧分离和纯化：采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定脂化结构。鉴定结果显示该菌株可产脂狀类抗生素ｓｕｒｆａｃｔｉｎ和ｆｅｎｇｙｄｎ。经抑菌实验和基因－－ｆｅｎｃｉｎｆｌ－敲除实验ｆｗ／ｏ／Ｗ口切ＭＢＡ１，失去了ｇｙ合成能力的突变株反ｙ旬知６８４切Ｉ对；ｅｘＫｗｗＫｆｉ的括抗效果显著降低，从而确定抑制的关键物质为ｆｅｎｃｉｎ。／ｇｙ为探充ｆｅｎｇｙｃｉｎ对巧的具体抑制机制，采用扫描电镜、透射电镜、核酸染

8、色、巧光显微观察和凝胶阻滞等技术从细胞层面分析ｆｅｎｇｙｃｉｎ的抑菌机制；采用呼吸作用检测、线粒体复合酶活性检测等实验从生理生化层面探巧ｆｅｎｇｙｃｉｎ处理ｅｊｃｐａ／ｗｗＴ／代谢所产生的影响。结果发现ｆｅｎｇｙｃｉｎ不仅可改变■Ｐｅｘ／ｊｆｌＷＭＯＴ细胞膜的通透性、破坏线粒体等细胞器结构，还可通过结合Ｅｅ巧线粒体复合酶ＩＩ和阳的相关基因，抑制其表达，使线粒体酶的活性下降，呼吸及代谢受到阻碍。为研巧ｆｅｎｇｙｃｉｎ对Ｐ．ｅｘｐａｗａｆｊ合成ＰＡＴ的影响，采用实